益生菌对EAE小鼠肠道菌群及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠肠道菌群变化,探讨益生菌对EAE小鼠肠道菌群及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法:选择30只SPF级雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE模型组和益生菌组,每组10只。正常对照组不做任何处理,EAE模型组、益生菌组采用MOG35-55多肽制备EAE模型,益生菌组从造模次日起以0.4 ml/d的益生菌溶液灌胃,正常对照组、EAE模型组每日灌胃等量生理盐水,观察小鼠发病情况。取脑组织行LFB染色;取小鼠粪便定量检测肠道菌群数量,计算双歧杆菌与肠杆菌细菌数量的比值(B/E值);ELISA检测脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α表达;免疫组织化学法检测NF-κBp65核表达;分别采用RT-PCR和Western blot法检测脑组织中TLR4和NF-κBp65 mRNA及蛋白表达。结果:正常对照组小鼠均未发病,EAE模型组、益生菌组发病小鼠出现不同程度的尾部下垂、行走不稳、后肢无力等。益生菌组与EAE模型组相比潜伏期、高峰期延迟,神经功能评分降低(P<0.05)。正常对照组脑组织髓鞘结构清晰,EAE模型组髓鞘纤维结构紊乱,有空泡形成,益生菌组较EAE模型组轻。EAE模型组拟杆菌数量低于正常对照组(P<0.05);益生菌组双歧杆菌、乳杆菌数量高于EAE模型组(P<0.05),益生菌组B/E值高于EAE模型组(P<0.05)。EAE模型组IL-1β、IL-6、TNF-α表达高于正常对照组(P<0.05),益生菌组表达低于EAE模型组(P<0.05)。EAE模型组NF-κBp65核表达高于正常对照组(P<0.05),益生菌组核表达低于EAE模型组(P<0.05)。EAE模型组TLR4和NF-κBp65 mRNA及蛋白表达均高于正常对照组(P<0.05),益生菌组表达均低于EAE模型组(P<0.05)。结论:EAE小鼠肠道菌群失调,肠道定植抗力减弱。益生菌可以改善EAE小鼠肠道菌群失衡,增强肠道定植抗力,并可减轻脑组织脱髓鞘和炎症反应,具有神经保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

复发缓解型多发性硬化患者血清miR-326表达水平与NSE、MBP水平变化的关系

目的:探讨复发缓解型多发性硬化(RRMS)患者在复发期及缓解期时外周血清miR-326的表达水平与神经元特异性烯醇化酶(NSE)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的关系及临床意义。方法:选取西南医科大学附属医院神经内科2017年8月至2020年4月期间就诊收治的RRMS患者59例,其中急性期组(复发期)33例,缓解期组26例,另外选取同期体检健康者30例作为对照组。采用RT-PCR检测各组外周血清miR-326的表达水平,同时采用酶联免疫法检测所有纳入者外周血清中NSE、MBP的表达水平,比较RRMS发作期组、缓解期组与健康对照组外周血清中miR-326、NSE及MBP的水平表达情况,并对RRMS急性期组和缓解期组miR-326的表达水平与NSE、MBP水平相关性进行分析。结果:与健康对照组和RRMS缓解期组比较,急性期组外周血清中miR-326、NSE及MBP的表达水平均显著升高(P<0.01),而缓解期组外周血中上述指标相较于健康对照组也有所增加,但表达水平均低于急性期组(P均<0.01)。相关性分析发现无论在RRMS急性期组还是缓解期组,其外周血中miR-326的表达水平与NSE、MBP的水平均呈正相关关系(P<0.01)。结论:RRMS患者外周血清中存在miR-326的高表达,在急性期更为明显,且miR-326的水平与NSE、MBP水平呈正相关关系。