免疫酶染色试验及双面胶纸条法环卵沉淀试验诊断血吸虫病的比较

应用免疫酶染色试验(IEST)及双面胶纸条法COPT(DGS-COPT),并以常规法DOPT(CV-COPT)为对照,采用单盲法比较检测120例血吸虫病人。120例经吡喹酮治疗后3～4年及≥5年的血吸虫病人和120名健康人的血清。三种方法的敏感性和特异性:IEST分别为91.7和95.8％;两种COPT分别为81.7～82.5和96.7～97.5％,无显著性差异。治疗后3～8年血吸虫病人的阴转率分别为70.8％(IEST)、80.8%(DGS-COPT)和81.7%(CV-COPT)。表明IEST的诊断效果显著地高于两种COPT,并可弥补COPT漏检病人的缺陷。

应用间接免疫荧光抗体试验和免疫酶染色试验诊断日本血吸虫病的进一步研究

应用IFAT及IEST对比试验200例日本血吸虫病人和100名健康人,阳性率均为99％,假阳性率分别为5％和3％;对比试验322例各种寄生虫病人和其他内科疾病患者,除华枝睾吸虫病人、姜片虫病人和肺吸虫病人分别出现4～6％和0～4％的交叉反应率外,余均未出现交叉反应。两法对治疗不同时期的日本血吸虫病人阴转率可达87.6～93.7％。认为IFAT和IEST均具有满意的诊断效果,IEST更具有实用价值,并适合于现场应用。

几种吸虫抗原的限定组分蛋白及其反应性研究

应用IEBT检测AWA、SEA、CSA和FSA组分蛋白与几种蠕虫抗原免疫兔血清和蠕虫感染兔及病人血清之间的反应性结果表明,日本血吸虫感染兔血清与AWA组分蛋白的反应性,可因感染度及感染时期的不同而有所差异。慢性血吸虫病人血清可识别53～64KD AWA组分蛋白。SEA的限定组分蛋白抗原主要存在于25KD以下;CSA和FSA的限定组分蛋白抗原,主要存在于38KD以上。几种蠕虫抗原之间的交叉组分蛋白分子量为13～105KD。

免疫增强剂“425”及／或吡喹酮治疗血吸虫病患者前及后的抗体水平和超声影像的观察

本试验分为“４２５”制剂１０天肌肉注射合并吡喹酮顿服疗法（组Ⅰ）、单用“４２５”制剂１０天疗法（组Ⅱ）和“４２５”制剂７天疗法（组Ⅲ）三组。试验结果显示，三种疗法均可不同程度地改善病人的肝脾肿大并使肝内门静脉内径缩小，试验结果还显示，“４２５”制剂与吡喹酮合并治疗可显著地增高病人血清中特异性抗体水平。临床验证结果也提示，“４２５”制剂可诱导宿主的体液免疫应答，使虫卵肉芽肿病变减弱，导致病人临床体征的改善。本研究通过临床观察，已取得具有实用意义的结果。

血吸虫病兔疫诊断中抗体检测进展及其与抗原/免疫复合物检测的互补意义

1 可用于检测日本血吸虫病患者抗体的血清学诊断方法40多年来,我国在血吸虫病免疫诊断研究方面,已取得显著成绩.国内学者从50年代初开始研究日本血吸虫尾蚴膜反应(CHR,陈祜鑫等,1951)以来,坚持理论紧密结合实际,科研为防治服务,至今已建立可用于检测血吸虫病患者特异性抗体的血清学诊断方法近60种.但是上述方法能用于诊断病人和考核疗效的并不多,这也表明某种血吸虫病血清学诊断方法,从探索研究到建立最适的检测系统,需要经过现场的反复验证。

血吸虫循环免疫复合物解离后抗原及抗体的免疫反应性研究

将血吸虫循环免疫复合物（ＣＩＣ）用新方法解离后，特异性测定其上的抗原（Ａｇ）及抗体（Ａｂ），并以可溶性血吸虫卵抗原（ＳＥＡ）、多克隆、单克隆抗体（Ｐｃａｂ、ＭｂＡｂ）用间接法对比测定感染者血清中循环抗原（ＣＡｇ）及循环抗体（ＣＡｂ）通过１０２例日本血吸虫病人及４５名健康人ＣＩＣ解离后和血清的特异性对比测定结果表明，ＣＩＣ解离后的Ａｇ及Ａｂ水平（ＯＤ均值）测定，显示满意的特异性和敏感性，与用抗ＳＥＡ－和抗ＣＣＡ－ＭｃＡｂ测定ＣＡｇ水平（ＯＤ均值）相比较，具有优于或相似的检测效果，采用抗ＳＥＡ－ＰｃＡｂ和ＳＥＡ测定血谱中的ＣＡｇ及ＣＡｂ水平（ＯＤ均值）时，均取得很好效果，且其ＣＡｇ水平均显著地高于用２种ＭｃＡｂ检测ＣＡｇ的水平。上述制剂测定ＣＩＣ解离后及血清中的Ａｇ、Ａｂ及ＣＡｇ、ＣＡｂ，可起着互补诊断的效果。本项研究结果可为今后选用适宜的血吸虫病血清学诊断的检测途径，提供重要的参考依据。

我国血吸虫病诊断工作面临的问题及展望

我国血吸虫病防治工作经过３０多年的不懈努力，取得了巨大成绩［１，２］。当前血吸虫病防治策略的调整，选择采用以化疗为主的综合性防治措施，因此血吸虫病诊断工作，愈益显得重要。寻找简易、准确、具有考核疗效和防治效果以及监测疫情的诊断方法，为当前迫切需要解决...

中药“425”合剂诱导的抗血吸虫卵肉芽肿效应及其机制研究

改“425”制剂（中药当归提取物）为口服型，并伍用鲨鱼软骨粉（SCP），制成“425”合剂，用以研究感染血吸虫3周的BALB／c小鼠服用“425”合剂后4周诱导的抗肝内虫卵肉芽肿（SEG）效应及机制。测定小鼠肝内SEG大小，用EtnA检测小鼠血清抗体IgG及其亚类IgGI水平（OD均值）；采用流式细胞仪测定小鼠脾脏T细胞亚群的细胞均数和比值。服用“425”合剂（组Ⅰ）和单用SCP（组Ⅲ）小鼠的SEG大小显著小于感染对照鼠（组Ⅳ），组Ⅰ、组Ⅱ（单用“425”制剂）和组Ⅲ的SEG减小车之间无显著性差异；组Ⅰ和组Ⅱ的IgG和ISG1水平均显著高于组Ⅲ和组Ⅳ者；组Ⅰ和组Ⅲ的CD4+／CD8+比值（1．70－1．88）明显高于组Ⅱ（0．95）。实验结果表明，“425”合剂能诱导明显的抗肉芽肿效应，其机制与体液免疫和细胞免疫密切相关；SCP能非常显著诱导细胞免疫效应，特别是具有抗肝内纤维化作用；“425”制剂能明显诱导体液免疫效应。‘本项研究尚未见有类似报道。

日本血吸虫感染动物红细胞上非游离性循环抗原水平的检测和动态研究

应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原的多克隆抗体（抗ＳＥＡ－ＰｃＡｂ）检测感染５０～２００条尾蚴后不同时间的兔红细胞（ＲＢＣ）上非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ）。结果表明，感染兔ＲＢＣ上存有ＮＦ－ＣＡｇ，而正常家兔ＲＢＣ上则无；ＧＭＲＴ，前者为２．８３±０．１７～１０２４．００±０．００，后者为１．００±０．００～３．３６±０．１５，两者有显著性差异（均Ｐ＜０．０１）：感染家兔后４～７周内，ＧＭＲＴ呈现低水平，８～９周时显著升高，１０周时均为高峰（ＧＭＲＴ达１０２４．００±０．００），１０周后，均明显下降，１８周时为低水平。结果表明．ＮＦ－ＣＡｇ检测优势仅在感染早期（１０周内）。本文报告感染兔ＲＢＣ上存有ＮＦ－ＣＡｇ，尚未见类似报道，为今后研究ＣＡｇ的新途径和新内容提供了依据，也为感染宿主体液内ＣＡｇ的归宿问题提供了重要依据。

SCP合剂治疗血吸虫病患者前后超声影像及特异性抗体水平的变化

目的 研究用SCP合剂治疗日本血吸虫病患者的效果。方法 30例血吸虫病患者服用SCP合剂前后 ,观察超声影像及检测血清抗体IgG和IgG4 水平 ,以确定该合剂的临床效果。结果 经治疗后 1.5～ 3个月 ,肝实质超声影像显著改善者 15例 ;血清特异性抗体IgG水平显著上升 ,IgG4 水平明显下降。结论 用SCP合剂治疗血吸虫病患者 ,其肝实质病变显著减弱 。

日本血吸虫感染家兔红细胞上非游离性循环抗原的分离及动态水平研究

采用特定方法成功地从５０和１００条尾蚴感染的家兔红细胞上分离出非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ），并应用抗ＳＥＡ和ＡＷＡ的多克隆及单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ，对ＮＦ－ＣＡｇ水平的动态进行了观察。结果表明，ＮＦ－ＣＡｇ的水平在感染后８～１０ｗｋ间达高峰，１０ｗｋ后下降到较低水平。提示检测ＮＦ－ＣＡｇ的优势是在感染早期（１０ｗｋ内）。结果还显示，ＮＦ－ＣＡｇ水平与感染程度密切相关。在检测ＮＦ－ＣＡｇ时，特异性的多克隆抗体具有与单克隆抗体相似的检测效果。本文为探索血吸虫循环抗原的新途径和新内容及其归宿问题，提供了重要依据。

重组Sj26(rSj26)抗原免疫酶测定新方法诊断日本血吸虫病的研究

将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和重组Sj26(rSj26)抗原致敏的硝酸纤维素膜片(NCD)用于膜片免疫酶测定(D-IEA),分别检测同批日本血吸虫病人、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人和健康人血清104例的特异性抗体,同时用目测及光密度(OD)值测定两种方法判断反应结果。结果显示,分别采用上述两种抗原检测所获的阳性率或假阳性率间无显著性差异。此结果首次提示rSj26抗原的血清诊断效果与目前血吸虫病血清学方法常用抗原SEA相似。本文报告的免疫酶测定新方法,可同时采用两种方法判断结果,迄今尚未见到类似报道。试验结果均表明用D-IEA检测时显示高度的敏感性(92.1％—94.7％)和特异性(0.0％—2.9％),具有实用价值。

日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1/Th2细胞因子水平的动态变化

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化 ,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法 采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变 ,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后 0、4、6、8和 12周血清及脾淋巴细胞IL 2、IFNγ 和IL 4水平的动态变化。结果 小鼠感染后 6周出现明显肝肉芽肿病变 ,8周肉芽肿反应达高峰 ;12周则明显缩小 ;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL 2和IFNγ 在感染后 4～ 6周开始上升 ,8周达高峰 ,随后下降 ;而Th2细胞因子IL 4在感染后 8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论 Th1细胞因子IL 2和IFNγ 与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关 ,而Th2细胞因子IL 4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。

细胞信号转导抑制剂介导Th1/Th2免疫偏移对血吸虫虫卵肉芽肿的影响

目的 观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(P13-K)特异性抑制剂(分别为tyrphostin-25、D-sphingosine和wortmannin)对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变的影响,并探讨其作用机制。 方法 于小鼠感染日本血吸虫后第35天起,经尾静脉分别注射3种信号转导分子抑制剂,连续5 d。在小鼠感染后6和8wk,观察小鼠肝肉芽肿病变,并用ELISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠血清IFN-γ、IL-4和一氧化氮(NO)水平。结果 感染小鼠应用TPK和PKC抑制剂后均可显著抑制肝肉芽肿病变,PKC抑制剂可使肉芽肿减少率达56.2％～63.4％(P<0.01)。PKC抑制剂主要抑制Th2细胞因子IL-4的表达,其抑制率为34.1％和65.6％(P<0.01),而对NO水平的检测结果进一步证明了PKC抑制剂对IL-4表达的抑制作用。 结论 在日本血吸虫感染早期应用PKC抑制剂干预T淋巴细胞信号转导可显著抑制小鼠肝肉芽肿病变,其机制可能是由于抑制了Th2优势应答并介导Th2向Th1免疫反应偏移。

原位分子杂交检测上海真厉螨与柏氏禽刺螨体内肾综合征出血热病毒的研究

目的：提供革螨传播肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）的分子生物学证据。方法：用上海真厉螨与柏氏禽刺螨叮咬ＨＦＲＳＶ接种乳小鼠，取叮咬后ｄ１０及ｄ１００以上的上海真厉螨与柏氏禽刺螨冰冻切片，用地高辛标记ＨＦＲＳＶｃＤＮＡ核酸探针原位分子杂交检测其体内病毒ＲＮＡ。结果：叮咬野鼠型（７６－１１８株）接种乳小鼠后ｄ１０上海真厉螨检出病毒ＲＮＡ，在细胞浆、细胞核中及核膜上呈细密颗粒状或全浆阳性，见于生殖器官细胞、胃及支囊上皮细胞及脑皮质细胞；叮咬家鼠型（ＵＲ株）病毒接种乳小鼠后ｄ１２螨亦检出病毒ＲＮＡ，病毒的细胞组织分布与野鼠型相同；分别检测野鼠型螨３１只和家鼠型２３只，其中阳性分别为１７只和１０只；叮咬野鼠型病毒接种乳小鼠后ｄ１３２，家鼠型ｄ１０２螨仍能检出病毒ＲＮＡ。柏氏禽刺螨叮咬野鼠型病毒接种乳小鼠ｄ１０，检测螨２０只，其中阳性１２只，病毒ＲＮＡ主要分布于生殖器官细胞内。结论：上海真厉螨与柏氏禽刺螨均可经叮咬获得ＨＦＲＳＶ，上海真厉螨可分别感染野鼠型和家鼠型ＨＦＲＳＶ，野鼠型在螨群体内至少可维持１３２ｄ，家鼠型１０２ｄ，具有贮存两型病毒的作用，是ＨＦＲＳＶ的适宜媒介和贮存宿主，在动物宿主间交叉传播两型ＨＦＲＳＶ中?

日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响

目的 观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法 用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 0～ 12w ,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL - 2、IFN -γ和Th2细胞因子IL - 4表达水平。结果 单性感染小鼠 6～ 12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL - 2和IFN -γ ,但无明显动态变化 ,而IL - 4未能测出 ;双性感染小鼠IL - 2和IFN -γ在感染后 4～ 6w开始上升 ,8w达高峰 ,随后下降 ,IL - 4则在感染后 8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高 ,单性感染 8w双性再感染 4w时 ,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL - 2、IFN -γ和IL - 4表达水平即迅速升高且在双性再感染 8～ 12w逐渐增强。结论 日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同 ,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导 ,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原 (SEA)所诱导 。

原位分子杂交检测厩真厉螨经叮刺传播姬鼠型和家鼠型HFRSV的研究

目的用分子生物学方法进一步证明革螨在传播两型HFRS中的作用。方法将叮刺感染姬鼠型（76—118株）HFRSV乳鼠后第10天厩真厉螨270只和家鼠型（UR株）HFRSV后第10天厩真后螨200余只，分别制成组织悬液接种正常乳鼠，用Dig标记HFRSVCDNA探针原位分子杂交检测接种后第9天鼠肺；将叮刺感染乳鼠后螨在适宜条件下饲养至100天以上，分别叮刺4～5日龄正常乳鼠，于第3天取鼠肺冰冻切片，经Dig标记HFRSVCDNA探针原位分子杂交检测。结果叮刺76一118株病毒感染乳鼠螨悬液接种4只乳鼠，3只阳性，UR株接种6只，全部阳性；76—118株组饲养至132天，UR株组102天的螨叮刺正常乳鼠后，也从鼠肺中检出病毒RNA。结论首次用分子生物学方法证明该螨可通过叮刺获得姬鼠型和家鼠型HFRSV，螨群体不但维持76—118株病毒132天以上、UR株102天以上，而且均能经叮刘传播，说明此螨能作为姬鼠型和家鼠型HFRSV的适宜传播媒介和贮存宿主，这一发现为我国的HFRS疫区保存和演变提供了一定的实验依据，有流行病学意义；原位分子杂交可缩短用敏感动物分离革螨体内HFRSV的时间，可用于革螨等媒介昆虫传HFRSV的实验研究和流行病学调查。

日本血吸虫感染兔红细胞上非游离性循环抗原的分子基础及其性质研究

本文采用特殊方法成功地从感染兔红细胞上分离出非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ），并经实验证明ＮＦ－ＣＡｇ主要含有分子重为１２ＫＤａ和４７ＫＤａ两种组分抗原，分别称为ＳｊＲ１２和ＳｊＲ４７蛋白分子，前者属虫源性组分抗原，后者为卵源性组分抗原。ＳｊＲ１２和ＳｊＲ４７组分抗原从其存在部位、分子量及抗原成分特点分析，均不同于现在国内外所报道的循环抗原（也可称为游高性循环抗原，Ｆ－ＣＡｇ），具有明显的理论意义和应用前景。本项研究尚未见有类似报道。

NO介导Th1/Th2免疫偏移与日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变的作用

目的 观察日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变与一氧化氮 (NO)、Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨NO介导Th1/Th2免疫偏移在血吸虫卵肉芽肿病变中的作用。方法 采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变。用硝酸还原酶法和ELISA夹心法分别检测日本血吸虫感染小鼠 0～ 12周血清及脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO、IFNγ和IL - 4表达水平 ,并进行相关分析。结果 感染小鼠 0～ 12周血清和脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO表达水平与小鼠肝肉芽肿病变动态相一致 ,并呈显著正相关 ,与IFNγ表达水平呈显著正相关 ,而与IL - 4在小鼠感染慢性期 (12周 )呈显著负相关。结论 NO在日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变过程中可能是一种与Th1/Th2细胞因子具有同样重要作用的调节因子 ,并可能是通过调节Th1/Th2细胞因子而发挥作用的 。