不同青熟果色线辣椒中APRR2基因的克隆与表达分析

青熟果色是辣椒重要的商品性状之一,为探究拟南芥伪响应调节因子基因(APRR2)对青熟果色的影响,本研究以青海地方品种循化线辣椒深绿青熟果色野生型XHB及浅绿青熟果色突变体QL2017为研究材料,对不同青熟果色线辣椒中的基因APRR2进行克隆和时空表达分析。结果表明:APRR2基因CDS序列全长为1737 bp,共编码578个氨基酸,在XHB和QL2017中序列没有差异;APRR2蛋白分子质量64.34 kDa,等电点5.74,为不稳定亲水性蛋白,属于SANT超家族;在系统进化关系上,线辣椒APRR2蛋白与茄科的番茄和潘那利番茄同属一个分支;APRR2基因在2个品种不同时期不同组织中的表达存在显著差异,且具有组织特异性。APRR2基因在XHB果实、QL2017叶和果实中的表达量显著高于其他组织,在茎中表达量最低。研究结果为后续相关基因定位及深入分析线辣椒青熟果色形成机制提供了理论依据。

不同果色辣椒CCS基因克隆及表达分析

果实颜色是辣椒重要的商品性状之一。研究以观赏椒GS6、Z1,甜椒SP01及黄色突变体SP02为材料,探究辣椒红素/玉红素合酶基因(CCS)在不同成熟果色辣椒中的序列差异和表达特性,初步解析辣椒不同成熟果色形成分子机理。研究结果显示,成熟色为红色的GS6、Z1和SP01中均能克隆到CCS全长基因,且序列无差异,其全长1497 bp,编码498个氨基酸,只包含1个开放阅读框序列,没有内含子序列;而黄色突变体SP02中未能克隆出CCS基因;聚类和系统进化分析发现辣椒CCS基因与茄科作物的番茄、中华辣椒和灯笼辣椒等植物的亲缘关系较近;qRT-PCR分析结果显示:在GS6中,CCS基因在花中的表达量最高;在Z1和SP01中,CCS基因在果实中的表达量显著高于其他组织,在根中表达量最低;而在SP01的茎和叶以及SP02的所有组织中,CCS基因均未表达。在果实不同发育时期,CCS基因在SP01花后30 d(Ⅲ期)、GS6和Z1花后40 d(Ⅳ期)表达量显著上升。研究结果表明,甜椒黄色突变体SP02果实颜色的形成可能和CCS基因的缺失或变异密切相关,而在成熟色为红色的辣椒中CCS基因的表达可能在果实颜色形成过程中发挥重要作用。

50份番茄品种在青海高原地区的适应性综合评价

为筛选出适宜当地种植的高产优质番茄品种和育种材料,对引进的50份番茄品种的农艺性状进行变异分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果表明,50份材料的23个农艺性状的变异系数值在0%~103%之间,变异较为丰富;不同性状之间存在不同程度的相关性,其中单果质量与熟性、叶片长、叶片宽、首节花序、果实横径、果实纵径、单株产量呈极显著正相关,可溶性固形物含量与熟性、首节花序、单果质量、果实横径、果实纵径、单株产量呈极显著负相关;主成分分析将23个农艺性状简化为6个主成分,分别反映了果实发育特性、成熟前果色和授粉受精特性、果实品质特性、果形特性、花序类型特性、果实色泽品质特性,利用主成分分值进行综合评价,筛选出10个优良番茄品种,并通过二维分布图分析了10个优良番茄品种的性状特异性;聚类分析将50份材料分为6个组群,其中第Ⅰ组群的番茄品种在产量和品质方面均表现优良,且综合评价筛选出的10个优良品种中有9个品种属于第Ⅰ组群,说明综合评价与客观事实基本吻合。

黄瓜抗黑星病不同基因源的遗传分析

基于苗期人工接种鉴定结果,获得2份抗黑星病黄瓜材料(HX1,Cucumis sativus var.sativus,DI=5;HX5,C.sativusvar.xishuangbannesis,DI=38.7)和1份感病材料(HX8,C.sativus var.sativus,DI=80)。利用上述3份材料构建了2个组合(HX1×HX8,HX5×HX8)的6世代群体(P1、P2、F1、F2、B1和B2),并分别进行黑星病苗期人工接种鉴定。采用主基因+多基因联合遗传分析方法进行遗传分析,结果表明2份材料抗黑星病的遗传规律不同。组合HX1×HX8的F1单株表现为抗病,而组合HX5×HX8的F1单株基本表现为感病。HX1对黑星病的抗性符合两对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因混合遗传模型(E_1模型),HX5的抗性遗传符合加性-显性多基因模型(C模型)。在组合HX1×HX8中,两对主基因的加性效应均大于显性效应,B1、B2和F2群体的主基因遗传率分别为72.51%、98.19%和96.91%,多基因遗传率均为0,表明HX1对黑星病的抗性以主基因遗传为主;HX5对黑星病的抗性遗传以多基因的显性效应为主。

黄瓜抗黑星病相关基因的差异表达分析

以抗黑星病黄瓜材料HX1为试材,接种黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)2 h、8 h、20 h、32 h和72 h的叶片作为试验方(Tester),相应的未接种叶片作为对照方(Driver),利用SSH技术,构建了黑星病菌侵染初期的正向和反向cDNA-SSH文库。用巢式引物PCR检测插入片段,获得了200个阳性克隆,通过测序,除去重复序列,共得到105个Unique ESTs,其中50个为singleton,55个为contings。与非冗余蛋白数据库进行BLASTx比对,结果显示,17条ESTs未找到同源序列,88条非重复序列和已知基因的同源性较高,占全部ESTs序列的83.8%,其中86条ESTs与非冗余蛋白数据库已知功能的蛋白具有高度的相似性。结合高密度点阵膜杂交差异筛选,阳性率为75.0%。经初步分析这些序列的功能,差异表达的ESTs功能涉及能量和基础代谢、信号转导、蛋白和核酸代谢、光合作用及逆境中特异表达的基因等方面,为研究黄瓜抗黑星病基因提供了依据。

不同灌水量对青海高原地区线辣椒产量和耗水规律的影响

以"青线椒1号"为试材,在青海省农林科学院试验站日光温室内进行了单次562、437、312、187、62m3/hm2 5种不同灌溉量对线辣椒生长发育及产量影响的试验,测定分析了不同处理下土壤含水率、土壤电导率、土壤温度及线辣椒植物学性状和产量性状的变化。结果表明:在1个灌水周期内,各处理土壤含水量总体呈下降趋势;562、437、312m3/hm2处理下的电导率呈现高-低-高的变化趋势,187、62m3/hm2处理下电导率随时间变化的趋势较为平缓,没有明显升高或降低的趋势;土壤温度随灌水量的减小而升高;不同灌溉量下辣椒株高、茎粗、产量差异显著;从节水高效模式来看,312m3/hm2的灌溉处理为最经济灌水量。

线辣椒成熟果色黄色性状遗传规律

以线辣椒黄色突变体H0809为母本材料,野生型XHB(红色)及红色高代自交系CP1211-1、CP12332-5、CP1235-11、CP1245-6、CP1256-10、CP1271-3为父本材料,配制杂交组合,对亲本、不同组合F1代及F2代分离群体的果实颜色性状进行调查与分析。结果表明,各组合F1代群体辣椒果实颜色均为红色,说明辣椒果实红色对黄色为显性,F2代分离群体红色和黄色单株数量符合孟德尔3∶1的分离比例,表明线辣椒成熟果色黄色性状受1对隐性基因控制,黄色线辣椒H0809为红色野生型XHB的隐形突变。

线辣椒SSR-PCR反应体系优化及多态性标记筛选

以循化线辣椒果实黄色突变体H0809和高代自交系0599-1为试材,采用L_9(3~4)正交试验设计,研究线辣椒SSR-PCR反应体系的主要成分对扩增结果的影响,并对420对SSR分子标记进行筛选。结果表明,最优的反应体系为:总体积20μL,基因组DNA 20 ng,dNTP 100μmol·L^(-1),引物0.6μmol·L^(-1),Mg^(2+)2.5 mmol·L^(-1),Taq DNA聚合酶1.5μmol;通过筛选,获得72对具有多态性的SSR标记,多态性率为17.1%,平均每个标记扩增出2.67个等位基因。本试验建立的SSR-PCR反应体系和筛选的多态性标记可用于线辣椒种质资源分析、分子标记辅助育种、分子遗传图谱构建及基因克隆等研究。

三七总皂苷对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨三七总皂苷（panaxnonginsengsaponins,PNS）对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用,并研究其对氧化应激及炎症反应相关因子的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠,体质量250～300g,随机分为假手术组（Sham组）、肝缺血再灌注组（HIR组）和三七总皂苷治疗组（PNS组）,各10只。HIR组和PNS组构建肝缺血再灌注模型,PNS组术前1h予50mg/kg PNS生理盐水溶液（5mg/mL）腹腔注射,Sham组及HIR组于术前1h给予相同剂量的生理盐水腹腔注射。预处理3h后处死大鼠,检测并比较三组肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）及血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）水平。结果 PNS组肝缺血再灌注损伤后肝组织中MDA水平、MPO活性、ICAM-1含量及血清TNF-α、IL-1β低于HIR组（P〈0.05）,SOD活性则高于HIR组（P〈0.05）。结论三七总皂苷可通过减少氧化应激水平和炎症因子表达,减轻肝缺血再灌注损伤,达到肝脏保护作用。

下胫腓联合分离外科治疗研究进展

下胫腓联合损伤是踝关节骨折的常见伴发伤,下胫腓联合损伤可致踝关节稳定性丧失,早期正确的诊断和治疗是预后良好的关键。处理不当易造成踝关节慢性不稳定和创伤性关节炎的发生。目前在下胫腓联合损伤的诊断和治疗上存在较多争议,主要涉及下胫腓联合损伤后稳定程度的判定及固定方式的选择。本文对下胫腓联合损伤从解剖学、生物力学、损伤机制、诊断及治疗进展方面进行综述。

神经生长因子对骨折愈合的影响

骨折的愈合是一个十分复杂的过程,在愈合过程中,需要多种生长因子参与协调作用。在正常骨组织和骨折、骨痂中有神经生长因子(NGF)及其受体的表达,且NGF对中枢和外周神经系统的生物效应是维持、促进交感神经和来自神经嵴的感觉神经细胞的存活、分化、成熟,是参与损伤神经再生和功能修复的重要因素。并可诱导神经纤维进入骨组织,促进骨折部位神经再生和修复骨组织,从而促进骨愈合。

青海线辣椒生产状况及发展对策

线辣椒是青海高原正在发展的优质制干辣椒品种,也是青海东部农区的特色产业。为了加快线辣椒生产和产业的健康发展,文章总结当前青海省线辣椒生产的现状,分析辣椒生产中的主要问题与原因,针对生产和产业发展的问题,提出品种提纯复壮、加快推广地膜种植等技术措施,以及加快发展设施线辣椒生产和鼓励线辣椒制干品开发建设等建议。

几种缺陷单桩竖向承载性状的现场模型试验研究

为评价灌注桩在施工过程中因形成缩径、扩径、断桩、泥皮等缺陷导致单桩竖向极限承载力变化的程度,针对缺陷桩单桩开展了现场模型试验研究。进行正常桩和缺陷桩的竖向静载模型试验,测试单桩竖向极限承载力,对比缺陷桩和正常桩的单桩承载特性,分析了缩径、扩径、断桩、泥皮等缺陷对单桩承载性状的影响。对比正常桩和缺陷桩的荷载-沉降关系曲线,得出了基于文中缺陷桩设计方案的结论,缩径缺陷和泥皮缺陷均使单桩竖向极限承载力降低,降幅在正常桩极限承载力的15%范围内;扩径缺陷桩的荷载-沉降关系曲线无明显陡降点,桩顶沉降较正常桩递增缓慢;断桩缺陷影响荷载-沉降关系曲线中反弯点的出现位置,即反弯点出现时的桩顶位移与断桩缺陷距地表的距离有关。

黄瓜果肉色的遗传分析

以1份西双版纳黄瓜和2份普通黄瓜自交系为试验材料配制2个杂交组合,并构建4世代群体(P1、P2、F1、F2)。分别采用目测分级、色差仪测定a值和b值以及HPLC方法测定β-胡萝卜素含量等4个指标,研究黄瓜果肉色性状的遗传规律。结果表明:2个杂交组合F2群体的果肉色相关指标呈单峰偏态或双峰分布,表现为主基因+多基因的数量遗传特征。多世代联合分析表明,黄瓜果肉色遗传基本符合两对主基因+多基因模型。两组合8个果肉色相关指标最优模型的F2群体主基因遗传率较高,为76.0%～99.3%,多基因遗传率较低,为0～23.7%。对黄瓜橙黄果肉色的选择应在分离早期世代进行。

胶原-肝素自组装多层膜修饰钛表面

背景:对钛表面进行生物化修饰,改善钛表面的生物相容性是目前钛表面改性研究的热点之一。目的:采用层层自组装技术,在钛表面构建胶原-肝素多层膜,实现钛表面的细胞外基质化修饰,以改善钛的细胞相容性。方法:首先采用NaOH处理钛基材,获得多孔、负电荷的钛表面;然后吸附1层正电荷的聚赖氨酸;最后,多次交替吸附负电荷的肝素和正电荷的胶原,形成以胶原为最外层的多层膜结构。通过漫反射红外光谱、扫描电镜、原子力显微镜、接触角测量对多层膜进行表征。并与骨髓基质细胞共培养,考察细胞的黏附、增殖情况。结果与结论:漫反射红外光谱、原子力显微镜、扫描电镜、接触角测量结果表明肝素-胶原多层膜逐渐形成,此涂层可促进成骨髓基质细胞的黏附、增殖和分化。肝素-胶原多层膜有望成为一种新型的生物化钛表面,从而改善钛表面的生物相容性。

经皮椎体成形术治疗老年性胸腰椎压缩性骨折(附127例报告)

目的探讨经皮椎体成形术﹙PVP﹚治疗老年性胸腰椎压缩性骨折的临床效果。方法 2007年3月~2010年10月间,对127例胸腰椎压缩性骨折患者在C臂透视下行PVP治疗并进行随访,手术前后疼痛程度应用疼痛视觉模拟评分和MiGill-Melzack疼痛分级法评分。结果平均随访时间为10个月,相对于术前、术后及随访时VAS评分、MiGill-Melzack评分﹙〈0.05﹚及生活质量的评估明显改善。结论 PVP治疗老年性胸腰椎压缩性骨折可达到疼痛缓解、加强椎体硬度,是创伤小,疗效满意,能够提高患者生活质量的有效方法。

冲刷条件下既有桥梁桩基础工作性状研究进展

水流冲刷可导致桥梁桩基础周围土体受到侵蚀,其后果轻则降低桩基础承载力,重则导致整座桥梁坍塌。尽管有关桥梁桩基础冲刷的研究很多,而涉及如何评价冲刷对桥梁桩基础承载性状影响的研究却较少,但正在受到学术界与工程界的高度重视。在分析由冲刷引起桥墩、桥台及桩基病害的基础上,重点从理论分析、数值模拟、模型试验等方面评述冲刷条件下,桩基水平和竖向承载性状的研究现状与进展,认为急需更多系统性的研究以探求合理的理论分析方法。因而,有必要进行大量的数值模拟和模型试验甚至是现场试验来研究桩基的冲刷性状,进而为找到分析冲刷对整座桥梁结构安全性能影响的实用评估方法提供理论基础。

卡托普利对逆转自发性高血压大鼠心、脑、肾微血管减少的实验研究

目的探讨卡托普利降压治疗对自发性高血压大鼠(Spontaneouslyhypertensiverat,SHR)心、脑、肾微血管(毛细血管)减少是否具有逆转作用,并对其机制进行初步探讨。方法采用单宁酸-氯化铁组织化学媒染毛细血管的方法,分别对成年SHR、经卡托普利治疗3个月的SHR及正常血压大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)的心、脑、肾进行组织化学染色显示毛细血管,通过计算机图像分析技术进行定量分析。结果治疗组SHR心、脑、肾微血管密度较对照组SHR明显增多(P<0.01),接近WKY组(P>0.05)。结论成年高血压大鼠存在着较普遍的微血管稀少现象,经卡托普利早期治疗后,在降压的同时具有逆转SHR微血管稀少的作用。

青海露地夏植不同大白菜品种的耐抽薹性评价

为筛选出适宜青海地区种植的耐抽薹白菜品种,在高原生态条件下对国内外收集的32个大白菜品种进行耐抽薹性鉴定。通过调查播种至抽薹天数,初步评价其抽薹性;测定不同品种中心柱长度,对抽薹性进行再评价。结果表明:大白菜不同品种之间的耐抽薹性差异很大;32个品种按其耐抽薹性初步分为耐抽薹性强、中、弱和易抽薹4类。通过再评价,最终筛连出耐抽薹性强的品种5个,耐抽薹性中的品种3个,耐抽薹性弱的品种11个,其中耐抽薹性强的品种可以在青海地区生产使用。

基于宏基因组的青海农用沼气池微生物组成和功能分析

以产气性能不同的青海农用沼气池为研究对象,利用宏基因组技术分析了全年温度最高和最低时期污泥样品的微生物组成和功能特征。物种注释显示发酵系统中蕴藏着丰富的微生物种群。在细菌类群中,拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门丰度最高,占所有菌群相对丰度的72.37%~74.00%,参与关键的发酵作用。在4种样品中,互养菌门(相对丰度1.62%~4.73%)丰度偏低,与沼气产气的变化规律相一致,可能是沼气生产重要的功能类群。在属水平上,优势类群依次是海螺菌属(相对丰度6.75%)、梭菌属(相对丰度4.56%)、密螺旋体属(相对丰度3.60%)和假单胞菌属(相对丰度3.01%)。古菌类群中,产甲烷菌属(相对丰度25.41%~31.65%)是最优势类群,也是最主要的产气功能类群。功能注释表明,产气好比产气差的样品具有更多的有效基因,参与甲烷代谢相关路径的功能基因丰度更高。在样品中,甲烷代谢途径涉及的氢代谢营养型产甲烷菌参与CO2还原反应,所有代谢通路完整,且产气好的样品功能酶基因丰度趋高。研究结果表明,在青海农用沼气发酵系统中,甲烷产生的途径主要依赖于H2氧化/CO2还原的合成。