酸奶中嗜热乳酸链球菌的分离鉴定及益生特性研究

[目的]探讨酸奶中嗜热乳酸链球菌的益生特性。[方法]利用MRS琼脂培养基从酸奶中分离嗜热乳酸链球菌,通过糖发酵试验对其进行生化鉴定。研究嗜热乳酸链球菌的抑菌特性和胆盐耐受性,并分析不同pH值对嗜热乳酸链球菌的的影响。[结果]镜检结果表明该菌为革兰氏阳性,经生化鉴定可确定该菌为嗜热乳酸链球菌。嗜热乳酸链球菌对人体肠道内的常见病原菌有抑制作用,尤其是对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用明显。嗜热乳酸链球菌可以耐受人体肠道的胆盐环境,并在其特定部位生存。嗜热乳酸链球菌可耐受强酸,能在胃酸中存活,在近中性pH值环境中生长较好。[结论]嗜热乳酸链球菌可在人体肠道内发挥益生作用,保护机体免受病原菌的侵害。

吉林白鹅α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测

用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(IFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-α融合蛋白(rGoIFN-α)的分子量大小约为43ku,能与IFN-α抗血清发生特异性结合反应。重组吉林白鹅α干扰素经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在鸭胚成纤维细胞上抗鹅细小病毒的活性为3.32×105 U/mg,本试验结果表明,该表达系统能够表达重组鹅α干扰素,且表达的重组鹅α干扰素具有一定的抗病毒活性。

抗原-抗体复合物疫苗研究进展

抗原-抗体复合物疫苗是由特异性高免血清按照恰当的比例与抗原混合而制成。免疫复合物疫苗能够增强抗原递呈细胞的递呈能力,能有效的提高机体的免疫能力。近年来国内外研究者做了大量的相关研究,在鸡新城疫和传染性法氏囊病等禽病的复合物疫苗研究中取得了一定成果,在乙型肝炎复合物疫苗研究中取得了突破性的进展,为病毒性疾病的防控开辟了一条新的途径。论文就免疫复合物疫苗研究方面的优点、作用机制及应用前景进行了综述。

狂犬病鼠源野毒M株核蛋白基因的克隆及序列分析

从感染狂犬病的鼠脑中快速提取细胞总RNA,用RT-PCR方法得到编码核蛋白完整结构基因的cDNA,进一步将此基因克隆入pGEM-T中,进行核苷酸序列的测定,并推导出氨基酸序列,将这一序列与国内外已发表的9株狂犬病病毒的NP全基因进行比较分析。结果表明狂犬病鼠源野毒M株与上述9株的同源性在71.0%～99.8%之间,氨基酸同源性在77.6%～99.6%之间,M株与CVS株无论核苷酸序列还是氨基酸序列同源性都最高,分别为99.8%和99.6%,而与CTN珠的核苷酸序列同源性较低,与Mokola株的核苷酸序列以及氨基酸序列同源性都最低,分别为71.0%和77.6%。本研究为进行狂犬病病毒的分子流行病学调查和研制狂犬病基因工程苗提供了理论依据。

猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机制及防制研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)属动脉炎病毒科,动脉炎病毒属,感染猪可引起猪繁殖与呼吸障碍综合征,是一种严重危害养猪业的病毒。本文综述了近年来PRRSV与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,并对预防猪繁殖与呼吸综合征的几种疫苗的研制及特点进行了比较分析,为今后猪繁殖与呼吸综合征的控制提供参考。

吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备

采用PCR方法扩增了吉林白鹅ɑ干扰素(JL-GoIFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-ɑ,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-ɑ)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-ɑ融合蛋白(rJL-GoIFN-α)的分子量大小约为43 ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林白鹅α干扰素,经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25 mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN-ɑ抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN-ɑ,并制备了兔抗鹅的IFN-ɑ抗血清,为下一阶段鹅ɑ干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。

吉林白鹅α干扰素基因的克隆与序列分析

从吉林白鹅(Anser cygnoides)肝脏组织提取基因组DNA,应用Primer 5.0软件设计一对加入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物,PCR扩增得到α干扰素基因(IFN-α),将PCR产物克隆至pMD18-T克隆载体,转化DH5α感受态细胞,挑取阳性菌落进行鉴定和测序。结果表明,IFN-α已被成功克隆。序列分析结果显示该基因序列与GenBank中已知的狮头鹅(A.anser)IFN-α序列(登录号HQ009755)同源性为99.5%。

鹅细小病毒野毒的分离及VP3基因的克隆及序列分析

试验对吉林省农安县某鹅场发现的疑似鹅细小病毒病进行了野毒的分离与鉴定,并以鹅细小病毒标准毒B株染色体DNA为模板,对VP3成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得了1603bp的DNA片段。通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T克隆载体。经鉴定证实,成功地构建了pMD18-T-VP3克隆载体。序列分析结果表明,该基因序列与鹅细小病毒标准毒B株的VP3成熟蛋白基因序列同源性为98%。

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原体之一,本文对猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、编码结构蛋白、非结构蛋白、血清学诊断方法及分子生物学检测技术方面的研究进展予以综述,以期为进一步研究奠定基础。

小鼠胚胎胃肠道细菌的分离与初步鉴定

对常规饲养、正常妊娠的小白鼠胚胎后期胃肠道细菌进行分离鉴定,通过细菌培养特性、形态特征和生化试验鉴定,初步确定小鼠胚胎后期胃肠道中存在的微生物菌群有微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、变形杆菌属(Proteus)和双岐杆菌属(Bifidobacterium)等细菌,其中G+细菌占据了绝对优势,小鼠胚胎胃肠道中细菌的平均数量达到1.2×102CFU/g～3.2×102CFU/g。本研究为哺乳动物胚胎时期存在于胃肠道中细菌的深入研究奠定了基础。

狂犬病病毒分子流行病学研究进展

介绍了狂犬病病毒的流行特点、基因型和检测方法 ,综述了狂犬病病毒核蛋白和糖蛋白基因的研究进展 ,并简要概述了我国学者对狂犬病病毒N基因和G基因的序列分析比较结果 ,表明我国狂犬病病毒的街毒存在着地域差异。

貂出血性肺炎的实验室诊断

从病死貂的肝、心血中分离到一株革兰氏阴性杆菌,生化试验鉴定为铜绿假单胞菌。动物试验证明,该菌具有致病性。采用试管液体二倍稀释法测定了14种药物对该菌的药敏试验,从中筛选出有效药物,为临床防治该病提供了理论指导。

新形势下动物传染病教学的改革探讨

动物传染病学作为动物医学专业的主干课程,是动物医学专业毕业生与社会需求对接的重要环节。根据新形势下动物传染病流行和防控特点的变化,探讨高校动物医学专业该门课程教学改革的方向和措施,以达到激发学生学习兴趣,提高教学效果,增强学生的专业理论和实践技能的目的,培养出符合行业需求的兽医人才。

稻瘟病病菌的液体培养及滤液毒性测定

通过对吉林省近两年的部分稻瘟病菌进行液体培养,并对其中的10个生理小种进行毒性的测定和分析,认为稻瘟病菌提取液的毒性并不和浓度完全成正比关系,而是在某一范围内稻瘟病菌的毒性随着粗毒素的浓度的增加而增加。

基于卓越人才培养计划下动物病理生理学实验教学改革与探讨

实验教学是高校实现人才培养目标的重要环节,随着卓越人才培养计划模式的提出,《动物病理生理学》作为承前启后的桥梁课程,其传统的实验教学模式已经无法满足人才培养目标的要求。因此,进一步加深和完善该课程的实验教学改革具有重要的现实意义。在分析传统实验教学中存在的问题的同时,提出了基于卓越人才计划培养模式下的实验教学改革方案,以期为提高动物病理生理学实验教学效果提供参考与借鉴。

动物病理学教学实习的改革探索与实践

动物病理学是动物医学本科教育中重要的专业基础课,是与动医临床学科互相衔接的桥梁。开展动物病理学教学实习改革,对于提高动物病理学教学实习质量、培养大学生的实践能力和综合能力有重要意义。结合本门学科特点和人才培养要求,从教学实习内容、教学实习手段、教学实习考核等方面进行改革,以期探索出一条动物病理学教学实习的新途径,进一步提高学生的综合素质,同时为其他相关课程的教学实习提供依据和经验。

猪流行性腹泻病毒新型检测方法的研究进展

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种可引起出生仔猪呕吐、腹泻和脱水为主要临床症状的高度传染性肠道病毒。PEDV为套式病毒目、冠状病毒科、α冠状病毒属成员,为有囊膜呈皇冠状的单股正链RNA病毒,基因组长约2.8kb,由3个非结构蛋白(ORF1a、ORF1b和ORF3)和4个结构蛋白(S、E、M和N)共同组成[1]。2010年后,PEDV突然在我国呈暴发性流行,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。

猪氨基肽酶对PEDV感染作用的研究进展

近些年,猪流行性腹泻病毒(PEDV)的变异及分离一直是业界研究的热点,而猪氨基肽酶(pAPN)是否为PEDV感染的功能性受体一直备受争议。因此,论文就pAPN对PEDV作为受体及在PEDV感染中的作用的最新研究进展进行综述,以期阐明pAPN是否为PEDV的功能性受体并为PEDV的分离及后续研究提供参考。

猪传染性胃肠炎病毒感染相关猪源miRNA的筛选及表达差异分析

经生物信息学预测发现猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)3′UTR可能是ssc-miR-182的潜在作用位点,本研究以猪传染性胃肠炎病毒为研究对象,构建TGEV 3′UTR双荧光素酶报告基因载体,并将其与合成的ssc-miR-182模拟体瞬时共转染至猪小肠上皮细胞,通过荧光监测仪测定荧光素酶活性;同时通过荧光定量PCR方法检测TGEV感染猪小肠上皮细胞后在不同时间段ssc-miR-182的表达变化情况。研究结果显示,ssc-miR-182对TGEV 3′UTR有一定的抑制作用,并且TGEV在感染小肠上皮细胞以后ssc-miR-182的表达明显上调。结果表明,宿主ssc-miR-182与TGEV的感染和复制增殖相关。