热喷涂粒子形貌形成的研究进展

在综述现有研究的基础上,探讨了喷涂工艺参数、粒子特性、基体表面状态以及粒子-基体间相互作用等因素对喷涂粒子形貌的影响,并对未来热喷涂粒子形貌形成过程的研究方向进行了展望。

昆仑山8.1级地震后中国大陆及华北地区地震活动趋势探讨

着重研究了昆仑山8 1级地震对中国大陆未来三年Ms≥7 0、华北地区Ms≥5 0地震的影响及其地震发展趋势。

辽宁数字地震台站系统软件的维护与管理

简要介绍了辽宁数字地震台站操作系统的组成及系统参数的配置,对日常工作中经常出现的一些问题进行了归纳并给出了处理方法。

介质电性各向异性变化的识别及应用

应用地电阻率各向异性度S分析了辽宁省地电观测资料,结果表明地电阻率各向异性度作为地电资料一种分析方法是可行的,某些地震发生前后,地电阻率的各向异性度存在明显的异常变化。

磁致热涂层的冷喷涂工艺及其性能研究

电磁加热在电饭煲、电压力锅及电磁炉等烹饪器具方面广泛应用,这些烹饪器具要求所使用的锅具具有良好的导磁性能。采用冷喷涂技术在非导磁的铝质锅具表面制备了具有稳定电磁参数及良好加热性能的铁基导磁涂层。借助扫描电子显微镜(SEM)、热震试验箱、拉伸试验机等研究了熔覆层的微观形貌、断面结合层、结合强度以及耐冷热冲击性能。结果表明:在铝基锅具表面喷涂的导磁涂层结合力达到55 MPa,孔隙率小于0.9%,冷热冲击循环100次涂层无开裂;同时,测试30个锅具的电磁参数L_(s)和R_(s),导磁参数稳定一致,并具有良好的电磁加热特性。

新宁为肢残者捐赠轮椅

2011年5月26日，新宁县光彩事业促进会在县城中心广场举行“爱心轮椅”捐赠仪式，向该县50名肢体重度残疾者现场发放价值3万余元的“爱心轮椅”50辆，受到社会各界好评。

SARS-CoV-2重组载体疫苗的研究进展

重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的全球传播对人类生命健康造成了巨大威胁。目前已有多种类型的疫苗在全球范围内获批使用,以阻止疫情蔓延。其中重组载体疫苗起到了非常重要的作用,截至2021年5月25日,已有4款载体疫苗在不同国家获批使用,17款疫苗正在进行临床试验以及40余款疫苗处于临床前研究阶段。本文就目前全球SARS-CoV-2重组载体疫苗的研究现状作一综述。

流感病毒疫苗株在MDCK细胞中增殖条件的优化

目的优化四价流感裂解疫苗中H1N1(IVR-180)、H3N2(IVR-186)、BV(NYMC BX-69A)、BY(B/Phuket/3073/2013)亚型疫苗株在MDCK细胞中的增殖条件。方法以血凝滴度和半数组织感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID50)为指标,通过棋盘法对4种亚型流感病毒疫苗株在MDCK细胞上种毒的MOI(0.1、0.01、0.001、0.000 1)、TPCK胰酶终浓度(0.5、1、1.5、2、3、4μg/mL)及收毒时间(0、24、48、72、96 h)进行优化,并检测各条件下MDCK细胞的葡萄糖和乳酸代谢情况。结果 H1N1(IVR-180)、H3N2(IVR-186)、BV(NYMC BX-69A)、BY(B/Phuket/3073/2013)4种亚型流感病毒疫苗株的最适MOI分别为0.000 1、0.001、0.000 1和0.001,TPCK胰酶终浓度分别为1、2、1和2μg/mL,收毒时间分别为72、48、48和48 h。各条件下MDCK细胞的葡萄糖和乳酸代谢水平呈整体上升趋势。结论成功优化了4种亚型流感病毒疫苗株在MDCK细胞上的增殖条件,为以MDCK细胞为基质流感疫苗的研发奠定了基础。

SARS-CoV-2疫苗序贯免疫的研究进展

严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染造成的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是人类本世纪来面临的威胁最大的传染病之一。目前,全球范围内有4类疫苗已经获批上市或授权紧急使用—灭活疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗和重组蛋白疫苗。随着COVID-19大流行的持续,已进行全程免疫人群的抗体水平逐渐降低,加强免疫是必要的措施,而序贯免疫策略似乎是一种更好的疫苗接种策略。本文将对四类不同技术路线疫苗在序贯免疫中的研究进行综述。

H1N1疫苗株在MDCK和MDCK-G1细胞中的培养条件比较

目的比较H1N1流感病毒疫苗株在MDCK和MDCK-G1细胞中的最佳培养条件、产毒量、病毒滴度和细胞代谢情况。方法通过棋盘法摸索两种细胞的最佳种毒条件,然后比较2株细胞在最佳条件种毒后的血凝滴度、半数组织感染剂量(TCID50)、葡萄糖和乳酸的代谢情况。结果MDCK-G1细胞以感染复数(MOI)=0.001、1μg/ml TPCK胰酶接种H1N1流感病毒后,72 h时血凝滴度达到峰值(1∶512),病毒滴度为107.4TCID50/ml;MDCK细胞以MOI=0.0001、1μg/ml TPCK胰酶接种H1N1流感病毒后,72 h时血凝滴度达到峰值(1∶256),病毒滴度为106.6TCID50/ml。结论MDCK-G1比MDCK细胞更适合流感病毒的增殖。本研究为细胞基质流感疫苗的研究提供了参考数据。

MDCK细胞基质与鸡胚基质单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫反应的比较研究

目的:比较鸡胚基质和细胞基质的H1N1单价流感疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应的差异。方法:分别采用鸡胚基质和MDCK细胞基质H1N1流感疫苗注射C57BL/6小鼠,通过体外中和实验,胞内细胞因子染色及多细胞因子检测比较2种基质生产的单价流感疫苗诱导的体液及细胞免疫反应的差异。结果:体液免疫方面,细胞基质疫苗组血清滴度与鸡胚基质疫苗组血清滴度基本一致。在细胞免疫方面,细胞基质疫苗组的细胞免疫相关细胞因子分泌水平更加显著。结论:由于病毒培养基质的不同,2种流感单价疫苗在诱导免疫反应时间存在一定差异。细胞疫苗具有诱导多种免疫反应的优势,综合细胞工艺的其他优势,说明利用细胞工艺生产流感疫苗将会成为趋势。本实验有助于评价不同基质制备的单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫水平。

MDCK细胞和MDCK-G1细胞感染H1N1流感病毒后病毒滴度和细胞转录组表达差异分析

目的通过分析细胞表达基因及其相关信号通路的差异等信息,探索MDCK和MDCK-G1细胞株在接种H1N1流感病毒后出现病毒滴度和细胞生长趋势差异的内在生物学特性等原因。方法通过Illumina测序平台对2株细胞进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)和测序结果生物信息学分析后,选择了17个差异基因进行实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证。结果MDCK和MDCK-G1细胞差异基因(differentially expressed genes,DEGs)|log_(2)(FoldChange)|>0和padj≤0.05总数为2786个。相比于MDCK细胞,MDCK-G1细胞有967个基因的表达显著上升,1819个基因的表达显著下降。差异基因通过基因本体(Gene Ontology,GO)数据库富集功能注释和京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)进行通路分析发现,2株细胞在免疫调控和细胞生长周期调控上均存在差异,qRT-PCR验证的17个基因中有16个基因的表达趋势与转录组测序结果一致。结论2株细胞的转录谱存在显著差异。

胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾细胞消化方法的研究

目的考察不同胰蛋白酶及消化后是否弃去胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞消化效果的影响,并评价培养基中添加胎牛血清对减轻胰蛋白酶细胞毒性的作用。方法选用5种胰蛋白酶分别消化MDCK细胞,消化5 min后弃去胰蛋白酶为弃去组,不弃去为保留组。观察消化过程,记录细胞达到不同状态所需的时间。完全消化后,检测细胞的活率、结团率、直径。以不同浓度的胰蛋白酶消化MDCK细胞,按培养基是否添加胎牛血清分为含血清和无血清组,检测细胞活性。结果重组胰蛋白酶消化时间长于动物源胰蛋白酶。保留和弃去组细胞活率均值都大于94.77%,结团率均值均大于34.56%,直径均值分别为17.33和16.97μm且差异有统计学意义(t=4.632,P<0.001)。细胞活性随胰蛋白酶添加量呈现梯度变化。含血清和无血清组的细胞活性差异有统计学意义(t=12.545,P<0.001)。结论5种胰蛋白酶均可完全解离贴壁MDCK细胞,其中重组胰蛋白酶消化时间较长,作用温和,比较适合生产。弃去胰蛋白酶再继续消化的做法可行且有益,胰蛋白酶浓度对细胞活性有影响,胎牛血清可以减轻胰蛋白酶的潜在毒性。

表达甲型H5N1禽流感病毒结构蛋白的重组痘苗病毒的构建与鉴定

目的构建表达甲型H5N1禽流感病毒(H5N1 avian influenza A virus,H5N1 AIAV)NIBRG14株结构蛋白的重组痘苗病毒,为研制新型人用流感疫苗奠定基础。方法通过反转录PCR扩增H5N1 AIAV NIBRG14株的血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)编码基因,并将改造的HA、NA基因克隆至痘苗病毒穿梭质粒pSCCK。在重组质粒与痘苗病毒天坛株(vaccinia virus Tiantan,VTT)于Vero细胞中发生同源重组后,筛选同时表达HA和NA的重组痘苗病毒(rVTT-HA/NA),并对其进行鉴定。结果反转录PCR扩增的HA和NA基因大小约分别为1700和1400 bp,与预期相同。DNA测序证实,改造的HA和NA序列正确。对获得的rVTT-HA/NA进行PCR及测序表明,HA和NA基因正确插入VTT。蛋白质印迹显示,rVTT-HA/NA感染的Vero细胞表达的HA和NA能与相应的抗体发生反应。表达的HA具有血凝活性,血凝滴度为1∶32。结论重组痘苗病毒rVTT-HA/NA可稳定表达H5N1 AIAV NIBRG14株的HA和NA。

人用H5N1禽流感病毒疫苗生产工艺的优化

目的 建立优化的人用H5N1禽流感病毒疫苗生产的工艺。方法 在不同的稀释倍数、收获时间及灭活剂添加量下,通过测量收获液的病毒滴度和血凝效价,来确定病毒的最佳生产条件,并对离心法和凝胶过滤层析法的纯化效果进行对比。结果 103~104半数鸡胚感染量(50% egg infective dose,EID50)病毒接种鸡胚,收获的鸡胚尿囊液的病毒滴度和血凝效价最高,分别为10-8.3EID50和1∶480;在56~72 h血凝效价最高。甲醛浓度1∶10 000灭活144 h为灭活最佳条件。两种纯化方法得到的样品纯度和卵清蛋白的去除率相近,但离心纯化法和凝胶过滤层析纯化法病毒回收率有较大的差异,分别为19%和70%。结论 成功建立了高产毒的鸡胚基质H5N1禽流感病毒培养、灭活及纯化工艺。