NF-κB p65、IκBα、IL-1β mRNA在大鼠放射性肺损伤过程中的变化及意义

目的:探讨NF-κB p65、IκBα、白介素(IL)-1βmRNA在大鼠放射性肺损伤过程中的变化及意义。方法:将64只SpragueDawley雄性大鼠随机分成空白组和实验组。空白组不做任何处理,实验组予单次18Gy照射,并于照射后2周、6周、12周、24周末取肺组织,苏木精—伊红(HE)染色、Masson染色观察右肺组织病理形态变化,采用样本碱水解法测定肺组织匀浆羟脯氨酸含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清炎症因子IL-1β水平,荧光定量PCR(qPCR)法检测NF-κB p65、IκBα、IL-1βmRNA相对表达量。结果:HE及Masson染色显示:空白组大鼠肺组织肺泡结构完好,无充血、渗出、水肿等,实验组大鼠照射后早期出现充血、水肿、胶原蛋白渗出、炎症细胞浸润、肺泡壁及肺泡间隔逐渐增厚,之后肺组织纤维化加重、肺泡腔变小、消失。实验组照射后6周、12周、24周的羟脯氨酸含量均明显高于空白组(均P<0.05)。实验组大鼠照射后各时间点血清IL-1β水平、NF-κB p65、IL-1βmRNA相对表达量均高于空白组,而IκBαmRNA相对表达量低于空白组(P<0.05)。实验组血清IL-1β水平、NF-κB p65、IL-1βmRNA相对表达量在照射后6周升到最高,之后逐渐回落,而IκBαmRNA相对表达量变化趋势相反。结论:早期放射性肺损伤NF-κB p65、IL-1β的mRNA表达明显上调,IκBα表达下调,抑制NF-κB p65、减轻炎症反应可能减缓放射性肺损伤。

TGF-β/Smad通路在大鼠放射性肺损伤中的作用

目的:研究TGF-β/Smad信号通路在大鼠放射性损伤中的作用。方法:将144只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(A组)和不同剂量8Gy、10Gy、12Gy、14Gy、16Gy照射组(分别为B组、C组、D组、E组、F组),每组24只。采用^(60)Coγ射线放射治疗仪分别给予各剂量照射组大鼠进行右全肺照射,A组不作照射处理。于照射后第2、第5、第12、第24周末处死大鼠,取其右肺组织行苏木精—伊红(HE)、Masson染色评价其病理改变;westen blotting检测大鼠肺组织中Smad2、Smad7蛋白表达。结果:(1)A组大鼠肺组织肺泡结构完整,未见明显渗出、增生;照射后第5、第12周末,所有照射组大鼠肺组织表现为淋巴细胞浸润为主的慢性炎症改变,且可见肺组织间胶原沉积、纤维组织增生;照射后第24周末,B组、C组、D组照射后充血、水肿消退,部分肺组织仍可见淋巴细胞浸润,肺间质纤维化较第12周减轻,而E组、F组则表现为明显的肺泡壁增厚,肺泡壁不完整,组织间仍有较多的淋巴细胞,肺间质纤维组织增生明显。(2)与A组比较,各照射组大鼠肺组织的Smad2、Smad7蛋白表达量在照射后第5周末均明显升高(均P<0.05),随后逐渐下降。与第5周末比较,B组、C组、D组、E组的Smad2蛋白表达量在第12、第24周末明显回落(均P<0.05),而高剂量的F组到第12、第24周末并未出现明显回落(均P>0.05),且第24周末明显高于其他各组(均P<0.05);同时,B组、C组、D组的Smad7蛋白表达量在第24周末也均大幅回落(均P<0.05),但E组、F组却无明显下降趋势(均P>0.05)。结论:在大鼠放射性肺损伤中,Smad2、Smad7蛋白的变化与其肺组织病理改变一致,TGF-β/Smads信号通路参与调控大鼠放射性肺损伤的过程。