LC-MS/MS法同时测定人血浆中阿司匹林和水杨酸的质量浓度

目的 建立LC-MS/MS法同时测定人血浆中阿司匹林及其代谢物水杨酸的浓度,并将此方法应用于健康受试者口服阿司匹林肠溶片(100 mg)后的药代动力学研究。方法 健康受试者口服100 mg阿司匹林肠溶片,血浆样品以氟化钾作为稳定剂,经蛋白沉淀法处理后采用LC-MS/MS法检测阿司匹林和水杨酸浓度。使用WinNonlin 6.4计算主要药动学参数。结果 阿司匹林质量浓度在10.0~1 000μg·L~(-1)内线性关系良好,水杨酸质量浓度在100~10 000μg·L~(-1)内线性关系良好,定量下限分别为10.0μg·L~(-1)和100μg·L~(-1)。阿司匹林和水杨酸在试验操作条件下稳定性良好。健康受试者口服100 mg阿司匹林肠溶片后,检测到阿司匹林和水杨酸的ρ_(max)分别为535.77μg·L~(-1)和4 883.17μg·L~(-1),t_(max)分别为4.50 h和5.50 h,t_(1/2)分别为0.55 h和2.40 h。结论 该方法可同时测定人血浆中阿司匹林和水杨酸的浓度,适用于阿司匹林肠溶片在人体内的药物动力学研究。

基于转录组的褐软蜡蚧微卫星分子标记开发

褐软蜡蚧Coccushesperidum是一种在世界范围内危害多种经济作物和园林树木的昆虫.基于高通量测序技术获得褐软蜡蚧的转录组数据,通过微卫量识别工具(MISA)筛选SSR位点,同时利用PrimerPremier3批量设计引物并进行验证.结果显示,褐软蜡蚧的转录组数据经过拼接和聚类,最终获得111073条单基因簇(unigenes),长度为201~23463bp,平均长度为1687bp,并通过MISA预测到51272个SSR位点.其中,单核苷酸重复率最高(87.14%),三核苷酸重复率次之(8.93%),二核苷酸重复率最低(2.74%);单核苷酸以A/T重复为主(80.16%),三核苷酸以CCG/CGG重复为主(2.33%),二核苷酸以AG/CT重复为主(1.24%).同时利用七大数据库进行功能注释,GO注释率最高,为47.85%.此外,共随机挑选50对引物,其中15对引物在3个褐软蜡蚧地理种群中均成功扩增出目的条带.通过转录组数据筛选褐软蜡蚧SSR位点,为褐软蜡蚧的种群遗传及功能基因等研究奠定基础.

HPLC法同时测定大柴胡汤中4种成分的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定大柴胡汤中芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷和黄芩苷含量的方法。方法 采用Diamonsil C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈(A)-含体积分数为0.1%甲酸的5 mmol·L^(-1)醋酸铵缓冲溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1)。检测波长为230 nm和254 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果 芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷分别在质量浓度2.00~20.0、7.00~70.0、20.0~200、10.0~100 mg·L^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999),平均回收率分别为99.7%、99.2%、98.8%和98.6%;RSD为0.9%、0.6%、0.6%和1.2%(n=9)。结论 本实验建立的方法可以用于大柴胡汤中芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷及黄芩苷的含量测定,为大柴胡汤质量控制提供依据。

酵母三股螺旋结构β-葡聚糖测定方法研究

建立了刚果红法快速检测酵母三股螺旋结构活性β-葡聚糖的方法,检测体系中酵母三股螺旋结构β-葡聚糖的助溶剂二甲基亚砜终浓度为2%,最大吸收波长为523 nm,β-葡聚糖的质量（Y）与ΔOD523值（x）的回归方程为Y=923.0x-5.641,线性系数R2=0.996,β-葡聚糖的质量在35~199μg与相应的ΔOD有良好的线性关系。刚果红法测得酵母三股螺旋结构β-葡聚糖的质量的精密度高,其相对标准偏差为2.21%;该方法测得酵母细胞壁样品中三股螺旋结构β-葡聚糖的含量为18.33%,回收率在97.68~103.90%之间,平均回收率为99.60%,回收率的相对标准偏差为2.32%。说明刚果红法测定三股螺旋结构β-葡聚糖的回收率高,适用于酵母三股螺旋结构活性β-葡聚糖的测定,是一种快速、简便且高效的适用于工业生产过程检测的测定方法。