从红系发育角度探讨高原红细胞增多症发病机制

高原红细胞增多症(HAPC, high altitude polycythemia)是由高原低氧引起的以红细胞过度生成为主要表现的病症,该病发病机制复杂,现代医学、藏医学及中医学对HAPC有大量的研究,主要围绕流行病学,细胞生物学及分子生物学方面,但研究方向比较分散,且药物方面的研究明显不足,所以目前对该病的治疗仍然没有系统的认识,因此本文对HAPC的现代研究进行系统的归纳总结,主要包括影响红细胞生成过程中的影响因子,信号通路及低氧条件下红细胞的损伤,为HAPC的机制研究提供方向,以期为中西医的治疗方案提供理论基础。

昆仑雪菊通过NOS/NO途径改善高脂饮食诱导低氧环境大鼠海马组织的损伤

目的研究高脂饮食对低氧环境大鼠海马组织的影响及昆仑雪菊干预效果与机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,分别为低氧对照(H)组、低氧高脂饮食(HH)组、昆仑雪菊干预低氧(XJH)组、昆仑雪菊干预低氧高脂饮食(XJHH)组。进行造模与昆仑雪菊提取液干预,实验周期为一周。光学显微镜观察海马病理变化,TBA比色法检测海马组织丙二醛含量,WST-1法检测超氧化物歧化酶活力,硝酸还原酶法检测硝酸盐/亚硝酸盐(NOx)水平、荧光实时定量RT-PCR检测海马NOS mRNA水平。结果与H组比,HH组SOD升高(P<0.05),MDA降低(P<0.05),iNOS mRNA升高(P<0.05),XJH组NO、MDA均升高(P<0.05),eNOS mRNA水平降低(P<0.05),nNOS mRNA升高(P<0.05);与HH组比,XJHH组MDA升高(P<0.05),nNOS mRNA升高(P<0.05)。结论①低氧环境可对大鼠海马产生损伤,集中在CA1区,高脂饮食加重此反应,原因为高脂饮食上调iNOS mRNA表达。②昆仑雪菊可减轻高脂饮食诱导的低氧环境大鼠海马的病理损伤,机制可能与上调nNOS mRNA表达介导的保护作用有关。

阳明病(阳明腑实证)欲解时TNF-α的变化及大承气汤干预作用的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)在阳明病(阳明腑实证)欲解时及大承气汤干预后变化的研究。方法健康未孕SD大鼠290只,随机分为正常组(n=90)、模型组(n=100)、大承气汤组(n=100)。正常组每天给予等量蒸馏水,模型组采用给实验大鼠灌中药热药、自身粪便混悬液及脂多糖的方法造成大鼠阳明病(阳明腑实证)的模型,大承气汤组在造模成功后分别于卯时(5:00-7:00)、酉时(17:00-19:00)给予大承气汤干预,连续观察5天。造模结束与药物干预后,每天于卯时、酉时从正常组中抽取9只大鼠,模型组和大承气汤组中抽取10只大鼠,断头处死后获取组织匀浆,观察肿瘤坏死因子(TNF-α)含量变化。结果正常组TNF-α表达低于模型组(P<0.01),模型组TNF-α表达呈现节律性,大承气汤组欲解时TNF-α表达有短暂升高后逐渐降低,低于非欲解时组(P<0.05),最后趋于稳定。结论阳明病(阳明腑实证)模型组大鼠TNF-α表达呈现时间节律性,经大承气汤干预后,大承气汤组TNF-α表达逐渐下降,尤以酉时明显。

昆仑雪菊对低氧环境下高脂饮食实验大鼠肝脏氧化应激损伤的影响

目的:探讨昆仑雪菊水提液对低氧环境下高脂饮食大鼠肝脏氧化应激损伤的影响。方法:将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组、低氧对照组、低氧高脂饮食组、昆仑雪菊低氧组、昆仑雪菊低氧高脂饮食组。上午各组大鼠予以相关饮食干预,灌胃剂量10 mL/kg;下午围绕研究目的给予生理盐水或昆仑雪菊水提液进行干预,灌胃剂量10 mL/kg。1周后检测各组大鼠肝组织超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)、一氧化氮(Nitric Oxide,NO)指标,观察大鼠肝组织病理形态变化。结果:低氧对照组大鼠肝脏组织MDA、eNOSmRNA高于空白对照组(P<0.05或P<0.01);低氧高脂饮食组MDA、iNOSmRNA、NO明显高于空白对照组(P<0.01);低氧高脂饮食组MDA、NO、i-NOSmRNA明显高于低氧对照组(P<0.01),而eNOSmRNA低于低氧对照组(P<0.01);昆仑雪菊低氧组eNOSm-RNA低于低氧对照组(P<0.01)。昆仑雪菊低氧高脂饮食组MDA、iNOSmRNA、NO低于低氧高脂饮食组(P<0.01),SOD、nNOSmRNA高于低氧高脂饮食组(P<0.01)。昆仑雪菊低氧高脂饮食组MDA低于昆仑雪菊低氧组(P<0.01),NO、nNOSmRNA均高于昆仑雪菊低氧组(P<0.01或P<0.05)。结论:低氧、低氧联合高脂饮食可引起实验大鼠肝脏氧化压力升高及明显的结构损伤;昆仑雪菊水提液可明显降低低氧联合高脂饮食大鼠的肝脏氧化压力及结构损伤,其机制与NOS调节有关。

生脉饮加味方对缺血再灌注致急性肾损伤的影响及机制研究

目的:探讨预服生脉饮加味方对大鼠肾缺血再灌注致急性肾损伤的影响及作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分成假手术组、模型组及生脉饮加味方组各15只,3组连续灌胃7d后构建肾缺血再灌注模型,随后分别于造模后第1、3、6天检测大鼠的尿素氮(BUN)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)mRNA和肾损伤分子-1(KIM-1)以及血肌酐(SCr)的表达、肾小管细胞的凋亡情况及肾组织的病理变化,同时检测Bax蛋白表达、Bcl-2及Caspase-3。结果:与假手术组相比较,第1、3天模型组中肾组织的病理损伤显著,Bcl-2/Bax值降低,差异有统计学意义(P<0.01),血Scr与BUN水平、Caspase-3蛋白表达、肾组织中NGALmRNA、Kim-1表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,生脉饮加味方组Caspase-3蛋白表达、Bcl-2/Bax值、凋亡指数,肾组织中Kim-1、NGALmRNA表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),肾组织的病理损伤减轻明显。结论:预服生脉饮加味方对肾脏缺血再灌注所致的急性肾损伤有一定的改善作用,其作用机制可能与上调Bcl-2/Bax值及下调肾组织Caspase-3有关。

高原红细胞增多症中医研究现状

由于中国西北高原地区经济的迅速增长,更多的人选择移居至此地,但移居人群中或较长时间内(>半年)居住在平均海拔>2500m的城市居民易对青藏高原温度、缺氧自然环境失调习服而罹患高原红细胞增多症(high altitude polycythemia, HAPC),在高原居住以及迁居人群的健康会因此受到高度威胁。由于移居高原人口增多、人文环境变化和饮食不当,本病的死亡率也逐渐上升,中医疗法对本病具有特殊的优点和良好的效果,但缺乏中医对病名、病因、病机、治疗的认识的系统全面的总结和归纳,故本文作者将利用文献研究回顾HAPC的中医科研状况。

阳明病(阳明腑实证)模型大鼠“欲解时”相关炎症因子变化的研究

目的:通过观察阳明病(阳明腑实证)模型大鼠"欲解时"血常规及肠黏膜上有关炎症因子的变化,初步探讨阳明病"欲解时"的病理生理学基础。方法:实验大鼠随机分为欲解时对照组、欲解时模型组、非欲解时对照组、非欲解时模型组,建立阳明腑实证大鼠模型后,分别于阳明病"欲解时"及"非欲解时"每天取血及肠组织,连续5d,血细胞分析仪检测血常规,免疫组化法测Toll样受体4(TLR4)蛋白含量,荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测肠组织TLR4 mRNA水平。结果:欲解时模型组大鼠白细胞、中性粒细胞、单核细胞数较非欲解时模型组升高,其中单核细胞数上升差异有统计学意义(P<0.05);模型组淋巴细胞显著低于对照组(P<0.05)。欲解时模型组TLR4 mRNA及蛋白较非欲解时模型组显著降低,第1天TLR4 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阳明腑实证病程中,欲解时模型组大鼠中性粒及淋巴细胞较对照组体现出较早较长时间的差异性,意味着欲解时的免疫反应更为明显。通过TLR4检测表明欲解时阳明腑实证的炎症反应较非欲解时轻,可能与其表达下调相关炎性介质的释放减少有关。

基于病程变化研究的阳明腑实证动物模型探索

目的探索符合阳明腑实证病程变化研究的动物模型。方法实验大鼠按随机数字法分为正常组(8只)、模型高剂量组(14只)、模型中剂量组(12只)、模型低剂量组(10只)、治疗组(10只)。除正常组外,其余各组大鼠用附子、干姜、肉桂水煎剂灌胃[20 g/(kg·天)],正常组灌等量蒸馏水。实验第13日给予大鼠自身粪便混悬液灌胃,2 ml/只,2次/日,禁食不禁水。实验第15日正常组腹腔注射生理盐水,模型高剂量组腹腔注射脂多糖7 mg/kg,模型中剂量组注射5 mg/kg,模型低剂量组注射3 mg/kg,治疗组注射5mg/kg,造模成功后治疗组予以大承气汤(8.5 g/kg)每日2次灌胃,所有大鼠5天后处死。通过观察其体温、死亡率、白细胞计数、血浆LPS、小肠组织IL-6的含量,综合评价适合阳明腑实证病程研究的动物模型LPS适宜的注射剂量。结果造模成功后模型组、治疗组较正常组体温及血浆LPS含量均明显升高(P<0.05),模型组中IL-6含量与正常组比较具有显著性差异(P<0.05),造模成功第5日模型中剂量组白细胞、中性粒细胞显著升高(P<0.05),模型组淋巴细胞明显下降(P<0.05)。结论综合实验大鼠体温、白细胞分类计数、死亡率、LPS含量及IL-6含量等因素综合考量,认为LPS注射剂量为5 mg/kg条件下造成的阳明腑实小肠热盛证动物模型有明显的疾病特征的同时可以耐受5日的病程观察期,可为该病病程变化研究提供有效数据。