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基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量
1
作者
李凤巍
裴悦宏
+5 位作者
张晓枫
王智
陈海涛
徐宸
冉茂
孙现超
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期96-105,共10页
本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spacers,rDNA-ITS)序...
本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spacers,rDNA-ITS)序列差异位点,设计一对特异性检测引物RSW1F/RSW2R,建立烟草靶斑病菌实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)快速准确检测体系,并分析烟草靶斑病最低发病菌量.结果表明,设计的引物特异性良好,灵敏度达到1×10^(-3) ng/μL.利用已获得的实时荧光定量PCR体系计算得出引起烟草靶斑病发病的最低菌量为12.03 pg/μL.此外,对重庆龚滩地区烟叶中烟草靶斑病菌含量进行计算,发现土壤以及周边杂草可能为该地区烟草靶斑病菌的侵染来源,并进一步确定该地区预防烟草靶斑病的最佳时期为5月15日至6月15日,为烟草靶斑病菌的田间预警预报及流行提供理论依据.
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关键词
烟草
烟草靶斑病
实时荧光定量PCR
下载PDF
职称材料
中国式现代化的文化传统与理论基础
2
作者
李凤巍
果强
《品位·经典》
2023年第12期5-7,33,共4页
中国现代化之路是在现代化持之以恒的探索中寻得的正确途径。对中国式现代化全面、科学、系统的理解,从文化传统来说,中国式现代化传承并超越了中华优秀传统文化;从理论基础来说,中国式现代化是以马克思主义科学的世界观和方法论为理论...
中国现代化之路是在现代化持之以恒的探索中寻得的正确途径。对中国式现代化全面、科学、系统的理解,从文化传统来说,中国式现代化传承并超越了中华优秀传统文化;从理论基础来说,中国式现代化是以马克思主义科学的世界观和方法论为理论遵循。
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关键词
中国式现代化
文化传统
理论基础
马克思主义
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职称材料
几种生防菌剂对“云烟87”抗病性及农艺性状的影响
被引量:
1
3
作者
李凤巍
江龙
+6 位作者
胡丽涛
王智
陈海涛
马啸
朱晓伟
王晶
孙现超
《植物医学》
2022年第6期60-70,共11页
为明确生防菌剂对常见烟草病害的影响,本研究选取了5种常见生防菌剂分析其对烟草病害及农艺性状的影响,结果显示枯草芽孢杆菌和侧孢苏云金复合菌对烟草病毒病、烟草野火病和烟草赤星病有较好防效.进一步对比2种生防菌剂灌根和叶面喷施...
为明确生防菌剂对常见烟草病害的影响,本研究选取了5种常见生防菌剂分析其对烟草病害及农艺性状的影响,结果显示枯草芽孢杆菌和侧孢苏云金复合菌对烟草病毒病、烟草野火病和烟草赤星病有较好防效.进一步对比2种生防菌剂灌根和叶面喷施不同时期、不同施用方法对烟草病害发生以及农艺性状的影响,发现枯草芽孢杆菌最佳施用时期以及最佳施用方式分别为旺长中期和叶面喷施处理;侧孢苏云金复合菌最佳施用时期以及最佳施用方式为旺长中期和灌根处理,在该时期二者能显著降低烟草病害的发生,并提高烟草农艺性状,该研究为生防菌防治烟草病害并提高烟草农艺性状提供了理论基础.
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关键词
生防菌剂
烟草
田间防效
农艺性状
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职称材料
本氏烟半胱氨酸蛋白酶基因家族特征及其在TMV侵染中的功能
被引量:
1
4
作者
裴悦宏
李凤巍
+6 位作者
刘维娜
温玉霞
朱鑫
田绍锐
樊光进
马小舟
孙现超
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第21期4196-4210,共15页
【目的】明确抗病毒化合物氯吲哚酰肼(chloroinconazide,CHI)诱导的本氏烟(Nicotiana benthamiana)半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CP)在烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)侵染过程中的作用及其基因家族特征,为理解茄科作物...
【目的】明确抗病毒化合物氯吲哚酰肼(chloroinconazide,CHI)诱导的本氏烟(Nicotiana benthamiana)半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CP)在烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)侵染过程中的作用及其基因家族特征,为理解茄科作物抗病毒分子机制及化学调控提供理论依据。【方法】利用全基因组策略,从茄科作物基因组数据库Sol Genomics Network中检索获得本氏烟NbCP的全家族基因序列,利用生物信息学分析NbCP基因家族的进化关系、Motif基序及启动子顺式作用元件。根据生物信息分析结果,利用实时荧光定量PCR技术分析TMV侵染后NbCP基因的表达,以此筛选出潜在抗病蛋白。使用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默技术和马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)介导的基因过表达技术验证该关键蛋白对TMV-GFP侵染的影响,结合实时荧光定量PCR手段探索该关键蛋白的抗病毒机制。【结果】NbCP家族共有24个成员,根据其染色体定位命名为NbCP1—NbCP24。进化关系分析表明NbCP分成5个亚家族,其中Group V含有7个NbCP,而Group I仅含2个NbCP;Motif分析表明不同分支NbCP具有相似的motif分布;启动子顺式作用元件分析表明NbCP家族基因受光调控,并且多个NbCP家族基因启动子含有茉莉酸甲酯、水杨酸甲酯、脱落酸、赤霉素和生长素等激素响应元件。结合生物信息学分析,从上述各个亚家族中分别筛选1个关键潜在抗病相关NbCP基因(NbCP8、NbCP12、NbCP13、NbCP18、NbCP22),并利用实时荧光定量PCR技术分析上述基因在TMV侵染第5天的表达,发现NbCP8表达差异性最大,上升了2.6倍,NbCP8在叶中的表达量最高,其次是茎和根,在花中的表达量最低。TRV介导的NbCP8沉默能显著增加TMV-GFP的侵染,而PVX介导的NbCP8过表达能显著抑制TMV-GFP侵染,表明NbCP8作为植物正调控因子抑制病毒侵染。沉默NbCP8显著抑制了水杨酸信号途径相关基因PR1以及茉莉酸信号途径相关基因MYC2的表达,但对NPR1、COI1以及脱落酸信号途径相关基因ABA1和NCED1的表达无显著影响;而过表达NbCP8则显著提高了PR1以及ABA1的表达,但对NPR1、MYC2、COI1和NCED1的表达无显著影响。【结论】本氏烟NbCP参与了植物胁迫防御,其中NbCP8在抗TMV防御中起显著作用,其分子机制是通过诱导水杨酸信号途径参与抗病防御,研究结果可为茄科作物抗病毒的分子机制提供证据。
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关键词
本氏烟
全基因组
半胱氨酸蛋白酶
NbCP8
烟草花叶病毒
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职称材料
题名
基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量
1
作者
李凤巍
裴悦宏
张晓枫
王智
陈海涛
徐宸
冉茂
孙现超
机构
西南大学植物保护学院
中国烟草总公司重庆市公司烟叶分公司
中国烟草总公司重庆市公司石柱分公司
出处
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期96-105,共10页
基金
国家自然科学基金项目(31870147)
中国烟草总公司重庆市公司科技项目(B20212NY2312,B20221NY1307,B20211-NY1315)
广西中烟工业有限责任公司项目(2021450000340029).
文摘
本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spacers,rDNA-ITS)序列差异位点,设计一对特异性检测引物RSW1F/RSW2R,建立烟草靶斑病菌实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)快速准确检测体系,并分析烟草靶斑病最低发病菌量.结果表明,设计的引物特异性良好,灵敏度达到1×10^(-3) ng/μL.利用已获得的实时荧光定量PCR体系计算得出引起烟草靶斑病发病的最低菌量为12.03 pg/μL.此外,对重庆龚滩地区烟叶中烟草靶斑病菌含量进行计算,发现土壤以及周边杂草可能为该地区烟草靶斑病菌的侵染来源,并进一步确定该地区预防烟草靶斑病的最佳时期为5月15日至6月15日,为烟草靶斑病菌的田间预警预报及流行提供理论依据.
关键词
烟草
烟草靶斑病
实时荧光定量PCR
Keywords
tobacco
tobacco target spot
RT-qPCR
分类号
S432.44 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
中国式现代化的文化传统与理论基础
2
作者
李凤巍
果强
机构
河北科技大学马克思主义学院
河北师范大学马克思主义学院
出处
《品位·经典》
2023年第12期5-7,33,共4页
文摘
中国现代化之路是在现代化持之以恒的探索中寻得的正确途径。对中国式现代化全面、科学、系统的理解,从文化传统来说,中国式现代化传承并超越了中华优秀传统文化;从理论基础来说,中国式现代化是以马克思主义科学的世界观和方法论为理论遵循。
关键词
中国式现代化
文化传统
理论基础
马克思主义
分类号
G63 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
几种生防菌剂对“云烟87”抗病性及农艺性状的影响
被引量:
1
3
作者
李凤巍
江龙
胡丽涛
王智
陈海涛
马啸
朱晓伟
王晶
孙现超
机构
西南大学植物保护学院
中国烟草总公司重庆市公司丰都分公司
中国烟草总公司重庆市公司石柱分公司
重庆烟草科学研究所
中国烟草总公司重庆市公司
出处
《植物医学》
2022年第6期60-70,共11页
基金
国家自然科学基金(31870147)
中国烟草公司重庆市公司科技项目(A20201NY02-1306,B20212NY2312,B20221NY1307,B20211-NY1315)。
文摘
为明确生防菌剂对常见烟草病害的影响,本研究选取了5种常见生防菌剂分析其对烟草病害及农艺性状的影响,结果显示枯草芽孢杆菌和侧孢苏云金复合菌对烟草病毒病、烟草野火病和烟草赤星病有较好防效.进一步对比2种生防菌剂灌根和叶面喷施不同时期、不同施用方法对烟草病害发生以及农艺性状的影响,发现枯草芽孢杆菌最佳施用时期以及最佳施用方式分别为旺长中期和叶面喷施处理;侧孢苏云金复合菌最佳施用时期以及最佳施用方式为旺长中期和灌根处理,在该时期二者能显著降低烟草病害的发生,并提高烟草农艺性状,该研究为生防菌防治烟草病害并提高烟草农艺性状提供了理论基础.
关键词
生防菌剂
烟草
田间防效
农艺性状
Keywords
bio-control bacteria agent
tobacco
the field control effect
agronomic characters
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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职称材料
题名
本氏烟半胱氨酸蛋白酶基因家族特征及其在TMV侵染中的功能
被引量:
1
4
作者
裴悦宏
李凤巍
刘维娜
温玉霞
朱鑫
田绍锐
樊光进
马小舟
孙现超
机构
西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市重点实验室
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第21期4196-4210,共15页
基金
国家自然科学基金(31870147)
中国烟草总公司重庆公司科技项目(A20201NY02-1306,B20202NY1338,B20211-NY1315)
+1 种基金
广西中烟工业有限责任公司项目(2021450000340029)
国家大学生创新创业训练项目(202210635030)。
文摘
【目的】明确抗病毒化合物氯吲哚酰肼(chloroinconazide,CHI)诱导的本氏烟(Nicotiana benthamiana)半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CP)在烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)侵染过程中的作用及其基因家族特征,为理解茄科作物抗病毒分子机制及化学调控提供理论依据。【方法】利用全基因组策略,从茄科作物基因组数据库Sol Genomics Network中检索获得本氏烟NbCP的全家族基因序列,利用生物信息学分析NbCP基因家族的进化关系、Motif基序及启动子顺式作用元件。根据生物信息分析结果,利用实时荧光定量PCR技术分析TMV侵染后NbCP基因的表达,以此筛选出潜在抗病蛋白。使用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默技术和马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)介导的基因过表达技术验证该关键蛋白对TMV-GFP侵染的影响,结合实时荧光定量PCR手段探索该关键蛋白的抗病毒机制。【结果】NbCP家族共有24个成员,根据其染色体定位命名为NbCP1—NbCP24。进化关系分析表明NbCP分成5个亚家族,其中Group V含有7个NbCP,而Group I仅含2个NbCP;Motif分析表明不同分支NbCP具有相似的motif分布;启动子顺式作用元件分析表明NbCP家族基因受光调控,并且多个NbCP家族基因启动子含有茉莉酸甲酯、水杨酸甲酯、脱落酸、赤霉素和生长素等激素响应元件。结合生物信息学分析,从上述各个亚家族中分别筛选1个关键潜在抗病相关NbCP基因(NbCP8、NbCP12、NbCP13、NbCP18、NbCP22),并利用实时荧光定量PCR技术分析上述基因在TMV侵染第5天的表达,发现NbCP8表达差异性最大,上升了2.6倍,NbCP8在叶中的表达量最高,其次是茎和根,在花中的表达量最低。TRV介导的NbCP8沉默能显著增加TMV-GFP的侵染,而PVX介导的NbCP8过表达能显著抑制TMV-GFP侵染,表明NbCP8作为植物正调控因子抑制病毒侵染。沉默NbCP8显著抑制了水杨酸信号途径相关基因PR1以及茉莉酸信号途径相关基因MYC2的表达,但对NPR1、COI1以及脱落酸信号途径相关基因ABA1和NCED1的表达无显著影响;而过表达NbCP8则显著提高了PR1以及ABA1的表达,但对NPR1、MYC2、COI1和NCED1的表达无显著影响。【结论】本氏烟NbCP参与了植物胁迫防御,其中NbCP8在抗TMV防御中起显著作用,其分子机制是通过诱导水杨酸信号途径参与抗病防御,研究结果可为茄科作物抗病毒的分子机制提供证据。
关键词
本氏烟
全基因组
半胱氨酸蛋白酶
NbCP8
烟草花叶病毒
Keywords
Nicotiana benthamiana
genome-wide
cysteine proteinase(CP)
NbCP8
tobacco mosaic virus(TMV)
分类号
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量
李凤巍
裴悦宏
张晓枫
王智
陈海涛
徐宸
冉茂
孙现超
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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职称材料
2
中国式现代化的文化传统与理论基础
李凤巍
果强
《品位·经典》
2023
0
下载PDF
职称材料
3
几种生防菌剂对“云烟87”抗病性及农艺性状的影响
李凤巍
江龙
胡丽涛
王智
陈海涛
马啸
朱晓伟
王晶
孙现超
《植物医学》
2022
1
下载PDF
职称材料
4
本氏烟半胱氨酸蛋白酶基因家族特征及其在TMV侵染中的功能
裴悦宏
李凤巍
刘维娜
温玉霞
朱鑫
田绍锐
樊光进
马小舟
孙现超
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
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