猪水肿毒素单抗竞争ELISA试剂盒的研制及应用

本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗原包被浓度为0.32μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶2,酶标单抗工作浓度为1∶3200,血清抑制率大于40%为阳性。应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对60份血清进行猪水肿毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为33.8%,细胞毒性中和试验检出率为30.9%,两者符合率达88.2%。试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便。本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪水肿病疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有较高的应用价值。

系数倍率分光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量

目的 探索银杏叶中总黄酮含量的测定方法。方法 银杏叶粉经乙醇提取处理后 ,在 470和 5 0 0nm波长处测定其吸收度 ,用系数倍率法测定其总黄酮的含量。结果 总黄酮含量为 1 .30 % ,芦丁回收率为 95 .7%。结论 该法能较好地消除共存组分的干扰 ,简便可靠。