毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析

以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为31.78ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为(1.37±0.22)mmol/L,Vmax值为(3.95±0.46)mmol/(L·min·mg);对H2O2的Km值为(0.026±0.003)mmol/L,Vmax值为(1.27±0.03)mmol/(L·min·mg);该酶在28℃,pH7.0～7.4时活性最高。实时荧光定量PCR分析表明,PtAPX2在杨树老叶叶肉中表达量最高。对PtAPX2亚细胞定位、底物结合特征、酶学性质及组织特异性表达的分析加深了对木本植物抗氧化机理的认识。

实现耕地总量平衡并不意味着就能保障农业持续发展

改革开放以来,随着城市规模的不断扩张和农村非农产业的不断发展,耕地占用不断增加,耕地总量不断减少,使我国人多地少的矛盾更趋紧张,耕地面积由1978年的9939万公顷减为1994年的9491万公顷,减少了4.5％,人均耕地由1.55亩减为1.19亩,减少了23.2％,尤其是处于改革开放前沿的江苏、浙江、福建、广东等东南沿海4省区,人均耕地由1.2亩减为0.7亩,减少了41.7％,其中福建、浙江、广东等省1994年分别降为0.6亩以下,远低于联合国粮食组织界定的0.80亩的警戒线。90年代初期,由于耕地的持续减少和多年的粮食产量徘徊,使我国粮食供给再度紧张,进口大量增加,并由此引发了一场国际性的“

《道德经》的文学价值和教育理念

老子不仅是一位著名的思想家,还是一位出色的文学家。《道德经》的语言简洁明净、洗练超脱、短而有味,运用了多种语言表达技巧,形成了独特的文学风格。其中蕴含的道德教育理念,也对我国的道德教育产生了深远影响。一、《道德经》的文学价值1.《道德经》中的语言技巧《道德经》体现出老子深厚的文学功底和独特的语言表达技巧,主要表现在以下几个方面:第一,《道德经》具有音律之美。《道德经》

“问题下属”的常见病象、诱发因素及矫治之方

在现实工作中，一个组织、一个部门中似乎总是存在让领导头疼、不听指挥的下属，其或是在做事的过程中极为低效，或是对事情的设想与捕述远远优于实际的效果，或是在领导提出意见与建议时第一时间表现出反感与对市情绪，或是墨守成规，不愿尝试新事物。如何实现对这些“问题下属”的成功改造和高效领导，成为组织发展中必须解决的关键问题之一。基于此，本文拟基于领导者的视角探析下属不良行为产生的根源，并提出防治措施。

准确把握新时代高校纪检监察工作的特点要求

在高校纪检监察工作中如何着力提高监督工作质量特别是日常监督实效;如何在关键领域、薄弱环节上有所突破,实现高质量发展,这是新时代高校纪检监察工作的努力方向。高校纪检监察工作要在坚持思想政治引领、“三转”、坚持问题导、提升纪检监察干部能力上下功夫。

肉鸡肠毒综合症的诊断与治疗

近几年来,在我国商品肉鸡饲养发达地区的肉鸡群中普遍存在着一种以腹泻,粪便中含有没有消化的饲料、采食量明显下降、生长缓慢、饲料报酬下降,中后期排血色蛋清样或黏脓样、柿子样粪便,并伴有不同程度的神经性兴奋、瘫痪等症状。该病自1999年开始流行,特别是在山东、河北、辽宁、江苏、河南等肉鸡饲养发达的地区,无论是在地面平养还是网上平养的商品肉鸡都普遍存在。此病多发于30-40日龄的肉鸡。

毛白杨抗坏血酸过氧化物酶启动子克隆与分析

【目的】研究毛白杨抗坏血酸过氧化物酶(APX)的基因启动子在转录调控中的作用,为进一步探讨抗坏血酸过氧化物酶启动子在植物抗逆中的应用奠定基础。【方法】依据毛白杨与毛果杨基因的高度同源性,以毛果杨LG-IX染色体上抗坏血酸过氧化物酶启动子序列为模板设计引物,从毛白杨总DNA中克隆一段启动子序列。【结果】克隆出的抗坏血酸过氧化物酶启动子序列长1234bp,与毛果杨同源基因的同源性高达81.96%。该启动子包含多种可能与胁迫相关的顺式作用元件保守序列,这些顺式作用元件参与光调节转录、激素信号和植物防御信号的应答,PpAPX-IX基因在老叶叶肉和老叶叶脉中表达较多,老叶中表达较多,在新叶中表达较少;在生长旺盛的部分比如根和形成层表达量很低或不表达。【结论】该启动子能为组织特异性启动子,受多种逆境胁迫产生的化学信号的诱导在成熟细胞中特异性表达,可以构建该启动子连接PBI101的表达载体。