维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究

目的探讨维拉帕米抑制高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化的作用及可能机制。方法2014年12月—2015年6月选取5~8周龄清洁级健康雄性SD大鼠6只,体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫组化法鉴定。将对数期VSMCs随机分为正常对照组〔含10%胎牛血清（FBS）培养基〕、高磷组（高磷培养基,含10 mml/Lβ-甘油磷酸）、维拉帕米干预组（在高磷培养基的基础上加入维拉帕米至浓度为20 mmol/L）。细胞接受2、4、6 d干预后,检测VSMCs内钙离子水平,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测VSMCs内目的基因（smad1、runx2mRNA）表达水平。细胞接受14 d干预后进行钙化检测,包括钙水平测定和茜素红染色情况。结果高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均低于高磷组（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组4、6 d后VSMCs内钙离子水平分别高于2 d后（P〈0.05）;高磷组6 d后VSMCs内钙离子水平高于4 d后（P〈0.05）;维拉帕米干预组6 d后VSMCs内钙离子水平低于4 d后（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均低于高磷组（P〈0.05）。高磷组4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于4 d后（P〈0.05）;维拉帕米干预组4 d后VSMCs内smad1 mRNA表达水平高于2 d后,runx2 mRNA表达水平低于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于2、4 d后（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组VSMCs钙水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组VSMCs钙水平低于高磷组（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组橘红色钙化结节较正常对照组多,维拉帕米干预组橘红色钙化结节较高磷组少。结论维拉帕米在高磷诱导的VSMCs钙化中起抑制作用,其可能是通过抑制钙离子内流进而抑制smad1表达,进一步抑制runx2表达,进而抑制VSMCs发生表型转化来实现的。

在线血容量监测在血液透析中的应用

在血液透析患者中,容量超负荷（volume overload,VO）与透析患者的高血压直接相关[1],而高血压又直接导致透析患者的心血管疾病的高发病率和高病死率.VO定义为任何超出正常或干体质量状态的水钠潴留.因此,在长期维持性血液透析过程中,清除患者体内多余的水分,恢复正常容量状态,即保证患者达到＂干体质量＂状态,成为血液透析的重要目的之一.但在透析过程中评估并达到患者干体质量仍然是困难的,因为在特定患者缺少可靠的诊断标准来决定该患者是否已达到干体质量[2].在线血容量监测是无创、使用简便的监测相对血容量（relatively blood volume,RBV）方法,可以在透析过程中非侵人性的监测RBV的变化,可以通过个体化的血容量域值的获得从而获得干体质量并预防低血压等并发症的发生[3].

临床护理路径在肾脏穿刺活检术患者健康教育中的应用

肾脏穿刺活组织检查（简称肾活检）是B超引导经皮肤穿刺取肾活体组织的检查。临床可根据肾组织的病理检查进行分型诊断并确定治疗措施，以改善患者的预后，降低药物的副作用，为提高疗效提供科学的依据。

连续性血液净化中抗凝药物两种应用方法对滤器凝血影响的探讨

随着连续性血液净化技术不断地更新和完善,临床应用范围日益扩大,为脓毒症及多器官功能障碍综合征等重症患者救治提供了非常重要的、赖以生存的稳定内环境,成为多脏器功能障碍综合征和危重病症救治的重要手段.目前连续性血液净化治疗操作无统一标准,如何降低治疗操作过程中由于人为因素,技术因素导致滤器管路功能丧失,也是本研究的主要目的.我们意在探索连续性血液净化药物不同浓度应用对滤器凝血时间的影响,目前此项研究较少,本课题通过研究不同药物浓度对滤器凝血时间之间的关系并对其干预将会对血液净化的治疗有一定意义.

连续性血液净化治疗中抗凝效果的观察与护理

连续性血液净化（CBP）治疗已被广泛应用于急性肾衰竭、多脏器功能障碍综合征的治疗，与间歇性血液透析相比，可缓慢、平稳地清除体内水分和大量中分子物质如炎性介质、细胞因子等，具有血液动力学稳定等优点。而保证治疗连续进行的关键是体外循环的持续有效性（主要是无凝血的发生）。因为当管路及滤器凝血后需重新更换，从而使治疗中止，不仅影响了治疗效果，而且会造成血液大量丢失。为减少或避免治疗中影响凝血的因素，规范连续性血液净化治疗操作，为临床救治和改进工作提供依据，进行了如下观察，报道如下。

甲状旁腺全切加前臂自体移植治疗慢性肾功能衰竭患者继发性甲状旁腺功能亢进的疗效观察

继发性甲状旁腺功能亢进（甲旁亢）是慢性肾功能衰竭行维持性血液透析患者的严重并发症之一.临床上可表现为皮肤瘙痒、异位钙化、骨痛等.本文对我科因继发性甲旁亢而行甲状旁腺全切加自体前臂移植术8例患者的术后疗效进行分析,探讨上述方法在治疗继发性甲旁亢中的作用.

连续无创血流动力学监测在连续性血液净化中的作用

目的探讨连续无创血流动力学监测在连续性血液净化(CBP)护理治疗中的指导作用。方法将70例行CBP治疗患者,随机分为两组,每组35例。对照组于CBP治疗前和治疗后均进行一次无创血流动力学监测,观察组给予连续无创血流动力学监测,每4 h监测1次,统计分析两组患者并发症的发生率和容量状态达标率。结果观察组并发症的发生率显著低于对照组,观察组的容量状态达标率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在CBP治疗中,通过连续无创血流动力学监测,便于观察患者血流动力学的动态改变,为早期护理治疗干预提供可靠依据,从而减少治疗过程中并发症的发生。

干扰SET8抑制血管平滑肌细胞转分化的研究

目的探讨赖氨酸甲基转移酶SET8对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)向成骨样细胞分化的影响。方法体外分离培养大鼠VSMCs,将VSMCs随机分为正常对照组(未转染)、空质粒组(转染NS-sh RNA)、SET8-sh RNA组。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测SET8和调节成骨与软骨分化的关键转录因子RUNX2 m RNA和蛋白的表达水平;应用酶联免疫法检测碱性磷酸酶(ALP)活性。结果 SET8-sh RNA可成功抑制VSMCs中SET8的表达;RT-PCR及Western blot结果显示,SET8-sh RNA组RUNX2 m RNA和蛋白的表达较正常对照组和空质粒组明显下降(P<0.05)。ALP活性测定结果显示,SET8-si RNA组ALP活性较正常对照组和空质粒组显著降低(P<0.05)。结论干扰SET8基因表达能够抑制大鼠VSMCs向成骨样细胞转分化。

干扰SET8调节血管平滑肌细胞增殖、凋亡促进血管钙化

背景与目的 血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡在许多血管钙化疾病的病理过程中起关键作用。近期研究表明,赖氨酸甲基转移酶SET8参与调节细胞增殖、凋亡过程。文章旨在探寻SET8是否通过调节VSMC增殖、凋亡而影响血管钙化。 方法 体外培养原代大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组和SET8-shRNA组。以脂质体LipofectamineTM2000为载体,转染VSMC。采用茜素红染色法和钙含量测定法判断细胞钙化程度；采用MTT法检测三组细胞的增殖能力；实时荧光定量PCR、Western blot法检测三组细胞中增殖基因Survivin和凋亡基因Caspase-3的表达水平,分析干扰SET8对VSMC增殖、凋亡及其相关基因和蛋白表达的影响。 结果 ①干扰SET8可成功抑制VSMC中SET8蛋白的表达（P〈0.05）。②转染VSMC后,与正常对照组和空质粒组比较,SET8-shRNA组钙含量明显升高（P〈0.05）。③MTT结果显示,在第12 h、24 h、36 h、48 h,SET8-shRNA组VSMC的增殖能力较正常对照组和空质粒组明显降低（P〈0.05）。④实时荧光定量PCR和Western blot结果显示SET8-shRNA组Survivin的mRNA和蛋白表达较正常对照组和空质粒组明显下降,而Caspase-3的mRNA和蛋白表达则相反（P〈0.05）。 结论 干扰SET8能够增加促凋亡基因表达,抑制增殖基因表达,SET8有可能参与调节大鼠血管钙化。

SET8-shRNA抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移

目的 探讨赖氨酸甲基转移酶SET8对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和迁移的影响。方法 体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组、SET8-shRNA组。应用RT-PCR、Western blot检测SET8和钙黏附蛋白E-cadherin mRNA和蛋白的表达,应用MTT法检测细胞增殖能力,应用Transwell实验检测细胞迁移能力。结果 SET8-shRNA组与正常对照组和空质粒组比较SET8表达水平降低（P〈0.05）。MTT结果显示,第12 h、24 h、36 h、48 h,SET8-shRNA组细胞增殖活性较正常对照组和空质粒组明显减弱（P〈0.05）。Transwell实验显示,SET8-shRNA组细胞迁移能力减弱（P〈0.05）。SET8-shRNA组E-cadherin mRNA和蛋白的表达较正常对照组和空质粒组明显增强（P〈0.05）。结论 干扰SET8基因表达能够促进E-cadherin的表达,抑制大鼠VSMC增殖、迁移能力。

血液透析治疗两班次之间最佳净尘时间研究

目的为有效防控透析患者院内感染,探讨两班次血液透析治疗之间最佳净尘时间。方法选取血液净化中心(简称血透室)的中央治疗区域(面积56 m2)做为采样区,根据每班次治疗结束是否给予净尘措施,设对照组与干预组,单日不采取净尘措施为对照组,干预组双日实施环境净尘措施。分别采集治疗前(晨起),第1班次透析治疗结束终末处理后10 min、20 min、30 min、35 min,在采样区每个时间点,放置营养琼脂糖培养基5个、以自然沉降法充分暴露5 min,而后送检微生物室进行细菌培养,连续采样2周。采用重复测量方差分析,对5个时间点的培养结果进行统计分析。结果与试验组相比,透析治疗前(晨起)空气培养菌落数(3.29±0.18)cfu/皿,差异无统计学意义(t=0.457,F=0.652);净尘时间≤20 min时菌落计数(6.09±1.11)cfu/皿,差异无统计学意义(t=1.449,F=0.165);净尘30 min时菌落计数达最低(3.58±0.41)cfu/皿,(t=2.966,F=0.007),净尘30 min时空气中悬浮菌落数≤4 cfu/皿。结论两班次透析治疗之间是否净尘及净尘时间长短影响室内空气质量,随着净尘时间的延长空气中悬浮的菌落总数逐渐降低,净尘时间不足30 min时,室内菌落含量≥4 cfu/皿,净尘时间30 min以上室内菌落含量≤4 cfu/皿,达到《医院感染管理规范》及2010版血液净化标准化操作规程中Ⅲ类环境的要求。

肾癌中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2的表达及其与E-钙黏蛋白、微血管密度的关系

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(Eph A2)在肾癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成、E-钙黏蛋白的关系。方法利用免疫组织化学法检测肾癌组织68例、正常肾组织24例中EphA2、E-钙黏蛋白的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析EphA2、MVD、E-钙黏蛋白与肾癌临床病理特征的关系及其的相关性。结果肾癌组织中EphA2阳性表达及MVD明显高于正常肾组织,E-钙黏蛋白阳性表达明显低于正常肾组织(均P<0.01)。EphA2在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);MVD在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组的表达亦显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(均P<0.01);MVD值还与肿瘤直径有关(均P<0.01);E-钙黏蛋白在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著低于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);Spearman等级相关分析表明,EphA2蛋白表达与MVD呈显著正相关(r=0.555,P<0.01),与E-钙黏蛋白蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.483,P<0.01)。结论 EphA2蛋白的高表达预示肿瘤恶性程度的增加,其机制可能通过影响或协同E-钙黏蛋白和微血管生成来实现的。

肾癌中EphA2/EphrinA1的表达及其意义

目的探讨EphA2/EphrinA1在肾癌中的表达及其与肾癌临床病理特征的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术检测22例肾癌组织和12例非肾癌正常肾组织中EphA2、EphrinA1的基因及蛋白表达情况,并对其进行比较和相关分析;利用免疫组织化学法检测68例肾癌组织和24例正常肾组织中EphA2、EphrinA1的表达,分析与肾癌临床病理特征之间的关系。结果肾癌组织中EphA2和EphrinA1的mRAN和蛋白均明显高于正常肾组织(1.60±0.80 vs 0.58±0.19,1.37±0.63 vs 0.91±0.40;424.38±43.14 vs 332.44±42.83,419.44±52.13 vs 325.36±42.33,均P<0.01)。但两种蛋白与其mRAN表达均不存在相关关系(r=0.050,P>0.05;r=-0.171,P>0.05)。在肾癌组织分级不同的各组间,EphA2、EphrinA1蛋白的表达差异有统计学意义(χ2=9.575,P<0.01;χ2=7.947,P<0.05),且随着等级的增加,EphA2、EphrinA1蛋白的表达量也显著增加(r=0.350,P<0.01;r=0.344,P<0.01)。结论EphA2和EphrinA1蛋白高表达于肾癌高分期组、高分级组和淋巴结转移组,其高表达的机制除与基因表达上调有关外,EphA2蛋白降解受阻可能是导致其升高的重要因素。

在血液透析中复用通路的快捷上机法

为了降低血液透析成本,减少初次使用综合征的发生,提高生物相容性,常使用复用管道、空纤;但复用管道、透析器在血液透析前的准备工作比较繁琐,耗费时间,并耗用大量的生理盐水.现将我科近年来1 260例次快捷、安全的上机法总结报告如下.……

分阶段延续性护理模式提高血液透析患者生存质量的效果

目的探讨分阶段延续性护理模式在提高血液透析患者生存质量中的作用。方法选取2012年6月—2014年6月血液透析患者200例，按照随机数字表法分为两组，每组100例。对照组实施常规护理，观察组在常规护理的基础上，加强分阶段延续性护理，比较两组患者的实验室指标、生活质量及满意度。结果观察组患者人血白蛋白、血红蛋白均高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；观察组血清钾浓度低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；观察组患者总体健康得分高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；观察组患者对护理工作的满意度高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论分阶段的延续性护理提高了血液透析患者的生存质量及对护理工作的满意度，值得临床推广与应用。

血栓弹力图在慢性肾脏病中的诊疗作用

目的 探讨血栓弹力图（thrombelastography,TEG）在慢性肾脏病中的诊疗作用及临床意义.方法 选取2016年6月至2017年2月河北医科大学第四医院住院慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）非透析患者270例,根据TEG综合凝血指数分为非高凝组、高凝组,分析两组间相关临床指标的变化,并研究影响组间差异的相关因素.结果 两组间相关临床指标的对比分析：高凝组凝血反应时间、凝血形成时间、白蛋白明显低于非高凝组[（4.69±0.94）min与（6.29±1.63）min、（0.93±0.13）min与（1.51±0.58）min、（27.54±7.81）g/L与（34.26±8.39）g/L,P值均为0.000];高凝组Angle角、血栓最大强度（MA）、纤维蛋白原、D二聚体、血小板计数、蛋白/肌酐、蛋白定量明显高于非高凝组[（76.76±2.23）°与（68.19±7.65）°、（75.13±3.81）mm与（66.35±7.81）mm、（4.28±0.93）g/L与（3.56±1.10）g/L、0.4（0.15,0.91）mg/L与0.22（0.12,0.52）mg/L、（276.03±127.15）×10^9/L与（198.18±78.46）×10^9/L、5430（2579,9634）mg与2620（692,5286）mg、4864（2341,7712）mg/g与2557（840,5805）mg/g,P均〈0.05]差异均有统计学意义.凝血酶原、凝血活酶时间、凝血酶时间、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、肌酐两组间比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）.常见临床指标的相关分析显示：综合凝血指数分组与Angle角、血栓最大强度、纤维蛋白原、血小板计数、蛋白/肌酐、蛋白定量呈线性正相关（r值分别为0.532、0.522、0.307、0.354、0.293、0.216,P均〈0.05）;与凝血反应时间、凝血形成时间、白蛋白呈线性负相关（r值分别为-0.462、-0.496、-0.360,P〈0.05）.Logistic回归分析结果显示：血小板计数、白蛋白、纤维蛋白原是综合凝血指数分组的影响因素[OR（95％CI）分别为：1.007（1.002～1.013）、0.868（0.827～0.912）、1.510（1.042～2.187）,P均〈0.05）].结论 TEG是能反映CKD患者凝血状态的更为敏感的指标,且对CKD患者的抗凝治疗有一定的指导意义;血小板计数、白蛋白、纤维蛋白原是影响患者凝血功能的因素.

持续中心静脉压监测在连续性血液净化治疗中的应用效果

目的探讨在连续性血液净化（CBP）治疗中，持续动态中心静脉压（CVP）监测对CBP治疗的指导作用。方法2013年7—12月选择行CBP治疗的患者60例，随机分为观察组和对照组，每组30例。对照组于CBP治疗前后各测1次CVP，观察组从CBP治疗前直至治疗后给予持续动态CVP监测，比较两组患者并发症的发生率和容量达标情况。结果观察组患者并发症发生率为16．7％，对照组为40．0％，两组比较差异有统计学意义（χ2=4．022，P〈0．05）。观察组患者容量状态指标CVP为（8．77±2．36）cmH2O，对照组为（11．93±2．39）cmH20，两组比较差异有统计学意义（t=5．16，P〈0．05）。结论在CBP治疗中，通过持续动态CVP监测，便于观察患者血容量的动态变化，及时、准确地调整超滤量，减少因超滤率的快慢而导致的相关并发症发生。