产淀粉酶和蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及其酶学性质分析

从分离自土壤的芽孢杆菌中筛选产淀粉酶和蛋白酶的菌株,对其进行形态学观察、生理生化试验及分子生物学鉴定,并对筛选菌株所产的淀粉酶和蛋白酶进行酶学性质分析。结果表明,筛选到产淀粉酶和蛋白酶菌株CX-47,菌株CX-47被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。酶学性质分析结果表明,菌株CX-47所产淀粉酶和蛋白酶具有相同的最适反应温度(50℃)和最适反应p H(7.0);K^(+)和Ca^(2+)对菌株CX-47所产淀粉酶催化活性具有一定的促进作用,而Li^(+)和Mn^(2+)则有一定程度的抑制作用;K^(+)、Li^(+)、Ca^(2+)和Mn^(2+)均可显著提高菌株CX-47所产蛋白酶的活性(P<0.05)。

一种中药鉴定gDNA芯片的制备与展望

中药鉴定是中药质量控制系统的首要环节,中药鉴定技术的不断发展提高了药材品质评价水平。至今,中药鉴定技术经历着从传统生药鉴定学的细胞和亚细胞水平向遗传物质DNA分子水平发展的历程,运用DNA芯片技术进行中药鉴定成为中药鉴定发展的方向之一。介绍了筛选gDNA种特异性探针的抑制性差减微阵列“SSH-ar-ray”新技术,该技术是将抑制性差减杂交与基于尼龙膜微阵列杂交相结合。以名贵中药材石斛5个品种作为实验材料,首先是用抑制性差减杂交获得2个品种之间的gDNA差异片段,然后用这些gDNA差异片段与由所有研究品种的gDNA制备成的微阵列杂交筛选到某一个品种的种特异性gDNA片段。这些种特异性gDNA探针作为种特异性探针进行物种鉴定。在此基础上建立中药鉴定gDNA芯片的方法并对其应用进行了展望探讨。

食源性致病菌生物芯片-RCA检测新方法

将生物芯片技术和滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)技术结合,建立一种在片RCA检测食源致病性菌新方法.依据待检测致病菌的基因组序列设计捕获探针(capture probe,CP)、检测探针(detect probe,DP)和滚环探针(rolling circle probe,RCP),其中捕获探针、检测探针与待检测致病菌基因组序互补,RCP不含任何待检菌基因组DNA序列,CP的5′末端修饰氨基,将其点样制备成CP微阵列,DP、RCP与待检菌gDNA混合后变性,将其与CP微阵列杂交并连接, RCA扩增反应体系中加入链亲和素进行在片扩增反应,分析检测结果.研究表明,该方法能灵敏、特异性地检测单一和混合靶标分子,以金黄色葡萄球菌为检测对象,其最低检测限可到达50 fg/μL,其线性范围是400 ~50 fg/μL, R 2 达到0.97,证实了该方法的可行性和可靠性,为食源性致病菌检测提供了新的技术方法.

基因芯片与植物基因差异表达分析

基因芯片为研究植物不同个体或物种之间以及同一个体在不同生长发育阶段、正常和疾病状态下基因表达的差异、某一性状多基因的协同作用 ,寻找和定位新的目的基因等方面带来了革命性的变革。与传统研究基因差异表达的方法相比 ,它具有微型化、用材少、快速、准确、灵敏度高。

基于网络的开放教育学习方式的发展——从E-Learning到U-Learning

科技的进步,使得学习工具便携化、学习环境智能化。从最初的计算机辅助学习,发展到如今的U-Learning时代,E-Learning的许多方面都发生了翻天覆地的变化。本文从E-Learning演化到U-Learning的过程中,分析二者的关系,既相互联系又存在区别。U-Learning的实现必须要基于ULE,从ULE的组成,了解ULE中学习活动的特点及相关学习工具。U-Learning时代的来临具有必然性,但由于技术等方面的局限,其发展道路又必将是曲折的。

论远程开放教育理论与实践一体化教学模式的构建

以远程开放教育为研究对象,以认识理论与实践一体化教学模式内涵为基础,探讨了构建理论与实践一体化教学模式的指导思想、内容和意义,认为理论与实践一体化教学模式的建立是培养应用型人才的基本途径之一。

农药2,4-滴丁酯与敌敌畏降解菌株的筛选及性能研究

通过以单一农药为碳源的选择性培养基驯化,从农药厂污水处理池活性污泥中筛选出一株能够降解有机氯农药2,4-滴丁酯和有机磷农药敌敌畏的菌株,根据菌株的形态、生理生化特征、16SrRNA序列分析,确定为假单胞菌(Pseudomonas sp.LT1).研究表明,该菌株最适生长温度为30℃,最适生长pH为7.2,对2,4-滴丁酯和敌敌畏的理想降解起始质量浓度为300mg/L;在以2,4-滴丁酯和敌敌畏为唯一碳源的无机盐培养基条件下其降解率分别为93.82%和95.65%,对土壤中的2,4-滴丁酯和敌敌畏的降解率分别为96.20%和97.06%.菌株Pseudomonas sp.LT1对2,4-滴丁酯和敌敌畏的降解酶基因位于基因组上.

基因芯片技术及其应用

基因芯片是通过微加工和微电子技术在固相物质表面建构的一种生物化学分析系统,由于它能够实现对核酸的准确、快速、高通量的微型自动化检测,自20世纪80年代问世以来被广泛地应用于DNA测序、基因的表达分析、寻找新基因、单核苷酸多态性研究(SNPs)等基础研究中,并向许多领域延伸,本文从基因芯片技术原理出发,综述了其特点、功能和分类。

cDNA RDA技术和植物基因工程目的基因筛选的探讨

cDNA RDA技术在研究基因差异表达和筛选差异基因方面有着一定的优势 ,植物在不同的外部环境和条件刺激下 ,基因表达存在差异。作者结合 cDNA RDA技术的基本原理和方法 ,对应用该方法筛选目的基因进行了探讨。

富硒猕猴桃果酒酵母的筛选及鉴定

通过酵母菌的分离、显微镜观察和WL培养基的筛选,初筛出酵母菌10株。采用猕猴桃果汁发酵法、CO2损失质量比较法、以及生理生化的鉴定,从中复筛出一株发酵能力好、产果香酒香浓郁的菌株Y-41。查阅《酵母菌的特征与鉴定手册》,初步鉴定该菌株为毕赤酵母属,再通过分子生物学鉴定,确定该菌株为库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。对Y-41菌种进行了耐受性检测,结果表明Y-41对葡萄糖、酒精度、p H值具有较高耐受性,可作为富硒猕猴桃果酒发酵专用菌种。

氮离子注入蛹虫草选育高效富硒菌株的研究

为了更好地开发蛹虫草资源,对蛹虫草菌株富集微量元素硒的培养条件进行了优化,选择最佳参数的低能离子束注入蛹虫草,通过石墨炉原子吸收光谱法检测注入前后菌丝体中硒元素的含量。结果表明:蛹虫草发酵富硒的最优培养条件为蛋白胨质量浓度3 g/100 mL、葡萄糖质量浓度3 g/100 mL、亚硒酸钠质量浓度为8?g/mL、pH值为7,此时,富硒率为21.58%。离子束最佳注入参数为:注入离子为N+,注入能量10 keV,注入剂量1.82×1015 ions/cm2,选育出富集微量元素硒较高的10株菌株,最高富硒率为30.97%,比出发菌株提高了近42%。

高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定白豆蔻中金属元素

建立高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定白豆蔻中Ca、Fe、Mg、Zn的方法。以微波消解作为样品的前处理方式，分析乙炔流量和燃烧器高度对测定结果的影响，通过实验分别确定测定Ca、Fe、Mg、Zn的最佳参数。在最佳参数条件下，测定白豆蔻中Ca、Fe、Mg、Zn的含量分别为7641、982、5367、87．7μg/g，加标回收率为97．9％-106．3％，精密度为1．1％～2．1％。该方法快速、准确、稳定、污染少，具有较高的实用价值，可为食品中多元素检测提供科学依据。

不完全消解-高分辨连续光源石墨炉原子吸收光谱法测定蔗糖中镉和铅

建立了不完全消解-高分辨连续光源石墨炉原子吸收光谱法测定蔗糖中Cd,Pb的方法。试验选择不完全消解作为样品的前处理方式,比较了几种常用的基体改进剂,发现磷酸二氢铵的影响显著,并且对吸收峰的峰形有显著改善。测定蔗糖中Cd,Pb分别为2.75,107.3ng/g,检出限分别为0.073,0.935ng/mL,加标回收率分别为94.3%,96.2%,本法的精密度(RSD)均小于4.0%。该方法快速、准确、稳定、污染少,具有较高的实用价值,为食品中多元素检测提供了科学依据。

氯化锂诱变蛹虫草菌株液体发酵富集微量元素锌

为更好地开发蛹虫草资源,以蛹虫草为富锌载体,进行发酵富锌培养条件优化,选择最佳质量分数的Li Cl诱变蛹虫草,通过火焰原子吸收法检测诱变前后菌丝体中锌元素的含量。结果表明:蛹虫草富锌的最优碳源为蔗糖,质量分数为3%,最优氮源为蛋白胨,质量分数为3%,最佳培养时间为6 d,最佳接种量为5%,最佳装液量为100 m L/250 m L,培养基中添加的最佳Zn SO4质量浓度为100μg/m L,此时,富锌率为18.54%。Li Cl的最佳诱变条件为:Li Cl质量分数0.15%。选育出富锌较高菌株5株,最高富锌率达24.68%,比出发菌株提高了近42%,具有广阔的应用前景。

紫薯杏鲍菇复合果醋混菌发酵工艺

以紫薯和杏鲍菇为主要原材料,通过果酒酵母和醋化醋杆菌混合发酵生产复合果醋,采用单因素试验,正交试验的方法,优化紫薯和杏鲍菇复合果醋混菌发酵的制备工艺。优化得到的配方及制备工艺条件为:紫薯与杏鲍菇比例为2∶1,白砂糖添加量为15%,pH为4.0,果酒酵母接种量为2.5%,醋化醋杆菌接种量为12%,种龄20 h,接种间隔0 h,装液量40 m L/250 m L,32℃,在此条件下产酸在第7天达到最大,为43.20 g/L,酿制出的紫薯杏鲍菇复合果醋澄清现粉红色,醋味浓郁,营养丰富,具有紫薯和杏鲍菇清香味。

不完全消化-微乳液进样-HR-CS GFAAS测定休闲食品中5种金属元素

建立不完全消化-微乳液进样-高分辨-连续光源石墨炉原子吸收光谱法测定休闲食品中Cu、Al、Cr、Cd和Pb的方法。以不完全消化作为样品的前处理方式,正丁醇作为助乳化剂,研究微乳液的形成条件,系统地分析基体改进剂及其添加体积、灰化温度和原子化温度对吸光度和吸收峰峰形的影响,通过单因素试验确定Cu、Al、Cr、Cd和Pb的最佳测定条件。将本法所测得的结果与微波消解作为前处理方式所测得的结果进行比较,两者相近,本法的加标回收率为96.4%~105.6%。该方法快速、准确、稳定,具有较高的实用价值,为休闲食品中多元素检测提供了科学依据。

吖啶酮类衍生物的研究进展

吖啶酮本身所具有的独特结构,决定了其衍生物在材料、生命科学、环境科学、医药工业等领域被广泛的研究和应用,针对目前研究吖啶酮类衍生物的热点,综述了吖啶酮在光电材料、生物探针、离子荧光探针及生物活性等领域的研究进展。

高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定秀珍菇中金属元素

将秀珍菇样品用超纯水清洗后烘干至恒重,粉碎过0.149mm筛。称取适量样品(约0.5g),加入硝酸5mL及过氧化氢1mL进行微波消解。将溶液蒸至近干,残渣用硝酸(0.5+99.5)溶液溶解,并定容至25mL。取上述4种元素的标准溶液制备标准曲线,采用高分辨连续光源和低噪声线阵电荷耦合式检测器,按选定的仪器工作条件进行钙、铁、镁、锌4种元素的火焰原子吸收光谱顺序测定。按所提出的方法用于实际样品分析,加标回收率在95.5%~104%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于3%。

一种新型Co^(2+)荧光探针的合成及其性能研究

以8-羟基喹啉衍生物与2,4-二羟基苯甲醛为原料,合成了一种新型的离子荧光探针HQHD。该化合物结构通过红外、氢谱、碳谱以及高分辨质谱进行确认。当以V(乙腈)∶V(水)=1∶9缓冲溶液为溶剂时,荧光探针的性能研究表明,在16种常见金属离子和NH^+_4中,HQHD对Co^(2+)具有较好的专一识别能力,p H在6.98~8.6范围内对Co^(2+)的识别能力最强。当Co^(2+)与其他离子形成共存离子溶液时,并不影响HQHD对Co^(2+)的检测效果,说明配体HQHD具有较强的抗干扰能力。当Co^(2+)在0.5×10^(-5)~5×10^(-5)mol/L的浓度范围内,体系的荧光强度ΔF与Co^(2+)的浓度呈现良好的线性关系,线性拟合系数为0.982 6,检测限为9.77×10^(-8)mol/L。Job's plot曲线表明,Co^(2+)与配体比为1∶1。

响应面法优化大豆分离蛋白提取及复合酶解制备活性肽

用碱提酸沉法从大豆中提取大豆分离蛋白,并经单因素及响应面优化法确定大豆分离蛋白最佳提取工艺为碱提时间60 min、碱提温度60℃、碱提pH值11.0、酸沉pH值5.0。使用最佳提取工艺提取大豆分离蛋白提取率为29.25%。用胰蛋白酶、糜蛋白酶分别酶解大豆蛋白产生的肽均具有抑菌活性,而采用胰蛋白酶与糜蛋白酶复合酶解大豆分离蛋白,产生的活性肽抑菌活性比单酶酶解产生的更高,且对蜡样芽孢杆菌抑菌活性最高,抑菌圈直径可达19.8 mm。通过对DPPH自由基的清除率检测复合酶解获得活性肽的抗氧化活性,发现其对DPPH自由基的清除率达到37.5%,比胰蛋白酶、糜蛋白酶单酶酶解获得的活性肽抗氧化活性都强,说明大豆分离蛋白经复合酶解后产生了具有较高抑菌活性和抗氧化活性的活性肽。