海马组织高表达Neuritin转基因小鼠的构建及鉴定

目的构建海马组织高表达Neuritin的基因小鼠并进行繁殖、基因型鉴定,为研究上调Neuritin表达对2型糖尿病认知功能障碍作用机制提供模型。方法将4对Emx1-cre基因小鼠、Neuritin-Loxp基因小鼠和db/db纯合子小鼠进行配对繁殖,提取小鼠尾巴DNA样本,经PCR法鉴定各繁殖后子代小鼠的基因型,获得杂合子Loxp/Emx1-cre/db基因小鼠,繁殖并鉴定该小鼠子代基因型,获得纯合子loxp/^(+)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(+)基因小鼠。以C57BL/6J野生型小鼠作为正常对照组,采用免疫荧光进一步确定模型的成功性,采用尼氏染色观察各组神经元病理形态。结果3种转基因型小鼠均有较好的繁殖能力,相互杂交其子鼠基因型为loxp/^(+)_Emx1-cre/^(+)、loxp/^(-)_Emx1-cre/^(+)、loxp/^(+)_Emx1-cre/^(-)、loxp/^(+)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(-)、loxp/^(-)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(-)、loxp/^(+)_Emx1-cre/^(-)_db/db/^(-)、loxp/^(+)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(+)、loxp/^(-)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(+)、loxp/^(+)_Emx1-cre/^(-)_db/db/^(+)等,上述基因小鼠繁殖结果基本符合孟德尔遗传定律。免疫荧光结果显示:loxp/^(+)_Emx1-cre/^(+)_db/db/^(+)基因小鼠的Neuritin较Db/db/纯合子基因小鼠表达量较高,差异有统计学意义(F=18.15,P<0.05)。结论PCR鉴定小鼠基因型的方法可靠,loxp/^(-)_Emx1-cre/^(+)基因型小鼠与Db/db纯合子小鼠交配是获得loxp/^(+)_Emx1-cre/^(-)_db/db/^(+)基因型小鼠的有效途径。

基于生物信息学探讨血府逐瘀汤治疗子宫肌瘤的作用机制

目的基于生物信息学方法探讨血府逐瘀汤治疗子宫肌瘤的潜在作用机制。方法利用TCMSP、TCMID、PubChem等数据库检索并筛选血府逐瘀汤的活性成分和潜在靶点。利用GEO数据库检索和筛选子宫肌瘤的相关靶点。借助STRING平台构建血府逐瘀汤治疗子宫肌瘤靶点的蛋白质相互关系(PPI)网络。使用Cytoscape软件筛选血府逐瘀汤治疗子宫肌瘤的关键靶点。使用DAVID数据库对关键基因进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集。结果经检索,获得血府逐瘀汤活性成分112个,预测活性成分的潜在靶点共7434个,获得子宫肌瘤显著差异基因1518个,通过韦恩图分析获得血府逐瘀汤活性成分靶点与子宫肌瘤差异基因的共同靶点118个。在PPI网络中筛选获得30个关键基因。对关键基因进行富集,GO分析主要涉及MAPK级联的正向调节、ERK1和ERK2级联的正向调节、细胞迁移的正向调节等生物过程;KEGG通路分析主要涉及PI3K-Akt信号通路、NOD样受体信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。结论血府逐瘀汤可能通过“活性成分—关键靶点—通路”作用减少炎症反应、降低氧化应激、促进血管新生,从而发挥治疗子宫肌瘤的作用。

广州市芳村区小学生血铅水平及干预研究

目的了解广州市芳村区部分小学生血铅水平,验证金属硫蛋白口服制剂的驱铅效果。方法测定308名一-六年级学生的血铅水平,并将其中152名儿童随机分为干预组和对照组,分别将金属硫蛋白口服制剂和安慰剂派发给实验对象,持续29d。停止服用15d后测定血铅等微量金属元素。结果小学生血铅浓度最低为0.24μmol/L,最高为1.40μmol/L,均数为（0.54±0.28）μmol/L,中位数为0.43μmol/L。儿童血铅浓度超标比例为41.9%,均为轻、中度铅中毒。干预组儿童血铅浓度由干预前0.63μmol/L下降为0.37μmol/L,且对铁、锌、钙等微量元素影响不明显。结论金属硫蛋白口服制剂可有效降低儿童血铅水平,对铁、锌、钙等微量元素的代谢无影响。

基于HIF-VEGF-Notch通路探讨通脉活血汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的探讨通脉活血汤通过影响大鼠低氧诱导因子(HIF)-血管内皮生长因子(VEGF)-Notch通路对局灶性脑缺血再灌注损伤(FCIRI)的保护作用。方法将54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑制剂组[HIF-1α抑制剂YC-1,2.5 mg/(kg·d)]和通脉活血汤低、中、高剂量组[20、40、80 mg/(kg·d)]。线栓法构建大鼠脑中动脉阻塞(MACO)模型,模拟局灶性脑缺血再灌注。建模后假手术组和模型组腹膜注射2.5 ml/d 5%葡萄糖注射液,抑制剂组和通脉活血汤组分别注射对应剂量YC-1和通脉活血汤。对大鼠神经功能进行评分、检测大鼠脑脊液中VEGF水平、检测冰冻切片中胚胎干细胞关键蛋白(Sox2)和胶质酸性蛋白(GAFP)细胞数、RT-PCR检测HIF-1、VEGF、Notch1 mRNA水平、Western印迹检测HIF-1α、Notch1蛋白水平。结果与假手术组相比,模型组脑组织中Sox2、GFAP染色细胞数显著降低(P<0.05);神经功能评分、脑组织中Notch1、VEGF和HIF-1 mRNA水平、脑脊液中VEGF水平、脑组织中HIF-1α和Notch1蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,抑制剂组和通脉活血汤低、中、高剂量组脑组织中Sox2、GFAP染色细胞数显著升高(P<0.05),且通脉活血汤各剂量组升高水平呈剂量依赖性(P<0.05);神经功能评分、脑组织中Notch1、VEGF和HIF-1 mRNA、脑脊液中VEGF水平、脑组织中HIF-1α和Notch1蛋白水平显著降低(P<0.05),且通脉活血汤各剂量组降低水平呈剂量依赖性(P<0.05)。与抑制剂组相比,通脉活血汤高剂量组神经功能评分、Sox2、GFAP染色细胞数、脑组织中Notch1、VEGF和HIF-1 mRNA、脑脊液中VEGF水平、脑组织中HIF-1α和Notch1蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论在局灶性脑缺血模型大鼠的治疗过程中,通脉活血汤可能通过影响HIF-VEGF-Notch通路来促进神经干细胞增殖分化,从而起到神经保护的作用。

复方血栓通胶囊治疗冠心病急性心肌梗死临床疗效观察

目的观察复方血栓通胶囊对冠心病急性心肌梗死患者临床疗效及炎症因子的影响。方法选取220例冠心病急性心肌梗死患者,按照随机数字表法分为常规组及联合组各110例。常规组的治疗方案为口服硫酸氢氯吡格雷片、阿司匹林肠溶片、阿托伐他汀钙片;联合组在常规组治疗方案的基础上加用复方血栓通胶囊。治疗4周后,计算两组的治疗有效率,并检测两组患者治疗前后的左心室射血分数、舒张压、收缩压及心率;血清炎症细胞因子:白细胞介素-1(IL-1),白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的含量;肌红蛋白(Mb)、谷草转氨酶(GOT)、脑钠肽(BNP)的水平。结果经治疗后,联合组的治疗有效率85.45%,明显高于常规组的73.64%(P<0.05);两组患者的左心室射血分数治疗后均高于治疗前,其中联合组明显高于常规组(P<0.05);两组患者的舒张压及收缩压治疗后与治疗前相比变化不明显,且两组间相比差异亦无统计学意义(P>0.05),治疗后两组患者的心率较治疗前均明显降低(P<0.05),但两组间相比差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者的血清IL-1,IL-6及IL-10含量较治疗前均明显改善,其中联合组改善程度明显强于常规组(P<0.05);两组患者的血清Mb、GOT、BNP水平较治疗前均明显降低(P<0.05),其中联合组明显低于常规组(P<0.05)。结论复方血栓通胶囊治疗冠心病急性心肌梗死能够显著提高临床疗效,有效改善患者的相关指标且安全性较高。

2型糖尿病认知功能障碍的作用机制研究进展

近年来,随着生活质量的提高及人口老龄化程度不断地加大,我国糖尿病发病率在成年中高达11%,糖尿病患者中约有65%左右存在认知功能障碍,伴有认知功能障碍的糖尿病问题也逐渐成为全球性及最备受关注的社会公共卫生问题,目前针对2型糖尿病伴有认知功能障碍尚无有效治疗药物,且其发病机制也尚未得到完全阐明。本文就炎症反应、神经递质的变化、神经营养生长因子、糖基化终末产物、胰高血糖素样肽-1、PI3K/Akt信号通路及Akt/CREB信号通路方面概述2型糖尿病认知功能障碍的作用机制的相关研究进展,为进一步深入研究2型糖尿病伴有认知功能障碍的发病机制、有效治疗药物及其临床应用提供参考。

基于网络药理学研究血府逐瘀汤治疗血管性认知功能障碍的作用机制

目的基于多成分、多靶点及多通路研究血府逐瘀汤治疗血管性认知功能障碍的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集血府逐瘀汤的活性成分,应用Swiss Target Prediction反向预测活性成分靶点,应用GeneGard数据库查询血管性认知功能障碍的靶点,借助STRING平台构建蛋白互作网络(PPI),利用Cytoscape 3.6.0软件可视化和筛选出关键靶点。用DAVID平台对关键靶基因进行GO生物过程富集和分析关键靶点的KEGG信号通路富集。结果研究得到88个主要相关活性成分和29个主要潜在靶点,其中有8个关键靶点;富集分析显示关键靶点主要富集于PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、FoxO信号通路、Ras信号通路等显著相关的44条通路,涉及涉及ERK1和ERK2级联正调控、MAP激酶活性的正调节、MAPK级联、蛋白激酶B信号的正调控等26条生物过程。结论血府逐瘀汤及其主要活性成分主要通过多靶点、多通路发挥治疗糖尿病肾病的作用机制,其中PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、FoxO信号通路及HIF-1信号通路可能为主要作用途经。

基于多层次互作网络探讨血府逐瘀汤治疗2型糖尿病作用机制

目的利用网络药理学研究血府逐瘀汤治疗2型糖尿病的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集血府逐瘀汤的活性成分,应用Swisstargetpredict反向预测活性成分靶点,应用Gene Gard和Disgenet数据库查询2型糖尿病的靶点;借助STRING平台构建蛋白互作网络(PPI),使用Cytoscape 3.6.0软件筛选出关键靶点。用DAVID平台对关键靶基因进行GO生物过程富集和分析关键靶点的KEGG信号通路富集。最后运用Cytoscape 3.6.0软件进行网络拓扑分析和绘制网络互作图,Omic Share工具绘制GO和KEGG气泡图。结果研究得到5个关键活性成分和14个关键靶点,GO富集分析包括GO条目74个,其中生物过程相关条目50个,主要涉及细胞增殖的正调控、MAPK级联、蛋白质磷酸化的正调节等方面;分子功能相关条目10个,主要涉及为酶结合、细胞因子活性、ATP结合、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性、激酶活性等方面。KEGG通路富集分析包含KEGG通路87条,主要与MAPK信号通路(MAPK signaling pathway)、肿瘤坏死因子信号通路(TNF signaling pathway)、PI3K-Akt信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)、胰岛素信号通路(Insulin signaling pathway)等信号通路有着密切联系。结论血府逐瘀汤活性成分主要可能通过MAPK3、TNF、AKT1、IL6等关键靶点作用于MAPK信号通路(MAPK signaling pathway)、PI3K-Akt信号通路等,起到治疗2型糖尿病的作用。

新型脂肪因子网膜素-1抗炎作用的研究进展

新型脂肪因子网膜素具有抗炎作用,网膜素-1是3个亚型中的主要亚型,其水平与身体质量指数和胰岛素抵抗指数等呈负相关,与脂联素呈正相关。肥胖、糖耐量受损和2型糖尿病患者血清网膜素-1水平显著降低,这被减肥、有氧训练及抗糖尿病药物反转。网膜素-1抑制炎症性肠病和类风湿性关节炎等的炎症反应,这与JNK和NF-κB信号通路相关。本文就网膜素的分子生物学特征、抗炎作用以及与肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病的关系予以简要概述。

促进间充质干细胞归巢的研究进展及其相关机制

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)被认为是一种有前景的再生医学干细胞资源,其强大的组织分化能力和免疫调节能力在修复的过程中起着关键作用。其中,MSCs要发挥治疗效果大部分依赖于对损伤部位的特定归巢,而其对靶位点的低归巢率严重影响着疗效。因此,如何促进MSCs的归巢率成为了提升其疗效的研究重点。本文就MSCs的归巢过程、促进MSCs向靶组织归巢及其机制、MSCs归巢与肿瘤进行了综述。

基于网络药理学研究血府逐瘀汤治疗糖尿病肾病的作用机制

目的基于网络药理学方法研究血府逐瘀汤治疗DN的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集血府逐瘀汤的活性成分,应用Swisstargetpredict反向预测活性成分靶点,用GeneGard数据库查询DN的靶点;借助STRING平台构建蛋白互作网络(PPI),使用Cytoscape 3.6.0软件筛选出关键靶点。通过DAVID平台对关键靶基因进行GO生物过程富集并分析关键靶点的KEGG信号通路富集,最后用Cytoscape 3.6.0软件进行网络拓扑分析和绘制网络互作图。结果研究得到103个主要相关活性成分和104个主要潜在靶点,其中有22个关键靶点;富集分析显示,关键靶点主要富集于JAK-STAT信号通路、TNF信号通路及HIF-1信号通路等显著相关的76条通路,涉及ERK1和ERK2级联正调控、上调MAP酶活性、蛋白磷酸化等74条生物过程。结论血府逐瘀汤主要通过多靶点、多通路发挥治疗DN的作用。

骨髓特异性高表达neuritin转基因小鼠的构建

目的构建骨髓特异性高表达neuritin转基因小鼠并进行繁殖、基因型鉴定,为进一步研究neuritin蛋白治疗外周神经病变奠定基础。方法将2对转基因小鼠loxp-stop-loxp-neuritin与转基因小鼠lyz-Cre/+进行饲养和繁殖,对其子鼠提取尾组织DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,获取基因型neuritinloxp/+_lyz-Cre/+即为骨髓特异性高表达neuritin小鼠。选择C57BL/6j野生型小鼠作为对照,并通过组织免疫荧光检测小鼠骨髓neuritin的表达量,进一步验证neuritin loxp/+_lyz-Cre/+小鼠的准确性。结果 2种转基因纯合子小鼠均有繁殖能力,相互杂交其子鼠基因型为neuritin loxp/+_lyz-Cre/+、neuritin loxp/-_lyz-Cre/+、neuritin loxp/+_lyz-Cre/-、neuritin loxp/-_lyz-Cre/-,其繁殖结果基本符合孟德尔遗传定律。免疫荧光结果显示:neuritin loxp/+_lyz-Cre/+小鼠骨髓neuritin表达量显著高于野生型小鼠(P<0.05)。结论 PCR是小鼠基因型鉴定的可靠方法。雄性lyz-Cre/+小鼠与雌性neuritin loxp/+小鼠交配是获得neuritin loxp/+_lyz-Cre/+小鼠的有效途径。

2型糖尿病认知功能障碍相关因素的研究进展

糖尿病是一种以脂肪与碳水化合物代谢紊乱、高血糖及慢性病为特征的常见而严重的代谢内分泌疾病，是由于胰岛素分泌和（或）作用缺陷所引起，且2型糖尿病（T2DM）也导致大多数细胞器老化的加速，认知功能降低和痴呆是糖尿病的并发症。随着我国人口持续上升以及人口老龄化进程的加快，糖尿病的发病率呈持续上升趋势，并且已成为一个重大的公共卫生问题。糖尿病伴有认知功能下降的问题也引发了人们的广泛关注。T2DM认知功能障碍主要表现在注意力、学习和记忆能力下降等方面.

alirocumab添加治疗血脂异常随机对照临床试验的系统评价

目的系统评价alirocumab添加治疗血脂异常的有效性和安全性。方法计算机检索Pub Med、Sciencedirect、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、维普数据库中筛选alirocumab添加治疗血脂异常的随机对照试验。由两位研究人员根据纳入和排除标准筛选文献、提取数据并对文献进行质量评价,采用RevMan 5.3和Stata 12软件进行Meta分析。结果共纳入13项研究,包括5 051例患者。Meta分析结果显示alirocumab添加治疗血脂异常在降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白B(Apo B)、脂蛋白a(Lpa)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)水平和升高HDL-C水平方面均优于安慰剂。alirocumab在降低LDL-C、TC、Apo B、Lpa和non-HDL-C水平和升高HDL-C水平方面均优于依折麦布,在降低TG方面与依折麦布相当。alirocumab在降低LDL-C、TC、Apo B、Lpa和non-HDL-C水平方面均优于他汀类,在降低TG和升高HDL-C水平方面与他汀类相当。在总不良反应发生率方面,试验组和对照组无显著差异,但alirocumab引起注射部位挫伤高于对照组。结论当前证据显示,alirocumab添加治疗血脂异常安全、有效,但其对临床心血管终点事件的影响仍有待论证。

Evolocumab治疗血脂异常的疗效与安全性的系统评价

目的:评价evolocumab治疗血脂异常的疗效与安全性。方法:计算机检索Medline、Pubmed、Embase、Cochrane图书馆、CNKI、万方、维普等数据库,纳入evolocumab与安慰剂或依折麦布比较的随机对照试验(RCT),利用Stata 12和RevMan 5.3软件对数据进行Meta分析。结果:纳入11篇文献共4 955例患者,Meta分析结果显示:与安慰剂和依折麦布比较,evolocumab能够显著降低LDL-C水平的百分比[安慰剂:-60.87%,95%CI(-64.23,-57.50),P=0.000;依折麦布:-38.37%,95%CI(-40.12,-36.63),P=0.000];显著升高HDL-C水平的百分比[安慰剂:6.79%,95%CI(5.84,7.74),P=0.000;依折麦布:6.79%,95%CI(5.24,8.34),P=0.000],并能显著降低TC和TG水平的百分比。在总不良反应发生率方面,两组无显著性差异[RR=1.01,95%CI(0.92,1.10),P=0.91]。结论:当前证据显示,evolocumab能有效降低血脂异常患者LDL-C、TC和TG水平和升高HDL-C水平。

IL-6抑制剂Sirukumab治疗类风湿关节炎疗效和安全性的meta分析

目的评价白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)抑制剂Sirukumab对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、Embase、Web of Science、Clinical Trials Website、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方、维普等数据库中关于Sirukumab治疗RA有效性和安全性的随机对照试验(randomizedcontrolledtrials,RCTs),采用RevMan 5.3软件对数据进行meta分析。结果共纳入6篇RCTs,3197例患者。Meta分析结果显示,Sirukumab2个剂量组(50,100 mg)ACR20、ACR50、ACR70的有效率均高于安慰剂组(P<0.0001)。Sirukumab 2个剂量组不良反应、严重不良反应、严重感染、注射部位反应、因不良反应终止试验等的发生率高于对照组(P<0.05)。与阳性药Adalimumab比较,Sirukumab 2个剂量组DAS28-ESR的有效率较高(P<0.05),ACR50有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论现有证据表明Sirukumab治疗RA安全有效。受纳入文献数量的限制,上述结论还需进一步开展高质量的临床试验来评价其有效性和安全性。

间充质干细胞组织特异性归巢的研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一种非造血组织的多能干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能,在机体组织再生和炎症控制的过程中发挥关键作用。其中,以MSCs为基础的治疗,其疗效至少部分取决于对所需细胞部位的特定归巢。然而,最近许多研究发现MSCs对不同组织的归巢特性存在差异,在一定程度上影响了MSCs发挥治疗作用。因此本文对MSCs在骨髓、脾和淋巴结、肠、心脏、肿瘤、多脏器的归巢现象和治疗作用、归巢的影响因素以及体内示踪技术进行了综述。

溴芬酸钠滴眼液治疗白内障术后炎症有效性与安全性的Meta分析

目的评价溴芬酸钠滴眼液治疗白内障术后眼部炎症的有效性和安全性。方法计算机检索Pub Med、Medline、OVID、EMBase、Cochrane图书馆、Springer Link、中国知网、维普、万方等数据库中关于溴芬酸钠滴眼液治疗白内障术后眼部炎症有效性和安全性的随机对照试验(RCTs),检索时限均为建库至2017年10月。采用Rev Man 5.3对纳入的文献进行Meta分析。结果共纳入7篇RCTs,3 514例单眼接受白内障手术患者。分析结果显示溴芬酸钠滴眼液组在白内障手术15 d后实现眼部炎症完全清除的受试者比率和在白内障手术后第1日眼部疼痛得到缓解的受试者比率高于安慰剂组[分别为RR=1.94,95%CI(1.72,2.19),P<0.000 01;RR=1.35,95%CI(1.21,1.50),P<0.000 01];溴芬酸钠滴眼液组因缺乏疗效或不良反应而终止临床试验的受试者数量显著低于安慰剂组[分别为RR=0.14,95%CI(0.11,0.18),P<0.000 01;RR=0.32,95%CI(0.24,0.42),P<0.000 01]。溴芬酸钠滴眼液组的总不良反应发生率、眼痛和畏光的发生率低于对安慰剂组(P<0.000 01),其他不良反应(眼压升高、头疼、异物感、结膜充血、严重不良反应)的发生率两组间均无显著差异(P>0.05)。结论溴芬酸钠滴眼液用于白内障术后能有效改善眼部炎症、眼部疼痛,其不良反应少且耐受。