脂氧素对Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2／白细胞介素-2受体表达的影响

目的:研究脂氧素对JurkatT细胞增殖和白细胞介素-2表达的影响。方法:体外培养JurkatT细胞,anti-CD3(2mg/L)和anti-CD28(2mg/L)单抗刺激Jurkat细胞活化,加入不同浓度脂氧素(0.1nmol/L-100nmol/L)共同孵育24h后,加入[3H]-TdR继续孵育6h,液闪仪测放射性活度;或收集培养上清,ELISA测IL-2水平,收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面IL-2受体α亚单位CD25表达,PI染色后经流式细胞仪进行细胞周期分析。结果:脂氧素剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28活化的Jurkat T细胞增殖(P<0.05);细胞周期分析发现脂氧素处理组S期细胞比例减少;脂氧素显著降低培养上清中IL-2含量(P<0.05)但对CD25表达无明显影响(P>0.05)。结论:脂氧素能抑制活化Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2表达;脂氧素可通过影响T淋巴细胞的活化增殖进而发挥免疫负性调节作用。

脂氧素对巨噬细胞表面免疫抑制分子和共刺激分子表达的影响

目的研究脂氧素A4(LXA4)对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,分为空白对照组、脂多糖(LPS)组和LXA4组。各组处理预设时间后,RT-PCR检测PIR-A和PIR-B基因表达水平,总一氧化氮检测试剂盒检测一氧化氮含量,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ分子、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)的表达量。结果LXA4显著上调PIR-B,而几乎不影响PIR-A的基因表达水平;明显促进一氧化氮分泌(P<0.01);抑制LPS活化巨噬细胞表达MHC-Ⅱ和CD86(P<0.05),但对CD80的表达无明显影响(P>0.05)。结论LXA4促进巨噬细胞表达免疫抑制分子PIR-B和一氧化氮,抑制巨噬细胞的抗原提呈能力。

脂氧素A_4对Jurkat T细胞游离钙浓度变化及增殖的影响

目的研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化及细胞增殖的影响。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果①采用含钙细胞外液时,LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度,而用无钙细胞外液时,细胞内游离钙离子浓度下降不明显;②LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵钙通道(SOC)激活剂thapsigargin(TG)引起的Jurkat T细胞内游离钙离子浓度的增高,100 nmol/L LXA4也能抑制抗CD3单抗(a-CD3)引起的细胞内钙离子浓度的增高,SOC阻滞剂2-Aminoethoxydiphenylborate(2-APB)能显著抑制TG引起的钙内流;③LXA4呈剂量依赖性抑制a-CD3和抗CD28单抗(a-CD28)诱导的Jurkat T细胞增殖,细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由G1期进入S期,降低S期细胞比例、细胞增殖指数(P I)和DNA含量。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道引起的胞质内游离钙浓度的升高而抑制其增殖。

脂氧素对粒细胞集落刺激因子表达的影响及其机制初探

体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7，实验分为空白组、脂多糖（LPS）组（1mg／L LPS）及脂氧素A4（LXA4）处理组（1mg／L LPS与0．1～1000nmol／L LXA4共同温育）。处理预设时间后，实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验分别检测粒细胞集落刺激因子（G—CSF）基因表达和蛋白质分泌水平，免疫印迹法检测IχBα。降解和NF—χB转位情况，荧光素酶报告质粒检测NF-χB转录活性。结果表明：LPS诱导G—CSF表达（P〈0．01），LXA4抑制G-CSF基因表达和蛋白质分泌，其中10nmol／LLXA4作用最明显（抑制率为39．8％）（P〈0．01）；10nmot／L LxA4明显抑制IχB。降解（P〈0．05）、NF-χB转位（P〈0．05）以及LNF-χB的转录活性（P〈0．05）。这提示LXA4可能通过抑制NF-χB的转位和转录活性而抑制LPS诱导RAW264．7巨噬细胞分泌G—CSF。

“医”心向党,“医”路向前

2009年,我在华中科技大学完成博士课题后,本可以研究生标兵身份优先留校被聘为副教授,但那时我收到了美国哈佛医学院博士后研究的邀请函,为了继续追求科研真理,以后能更好地报效祖国,我接受了邀请函,赴美国进行了5年的博士后研究,师承著名免疫学家Jean-Pierre Kinet教授和Charles Serhan教授。留学期间我勤学钻研,孜孜不倦地向哈佛的大师们学习请教,在科研上取得了一些成果,也因此获得了留在哈佛工作的机会。众所周知,作为全球顶尖学府之一,哈佛的科研条件和人才团队也都是最顶级的。心动吗?肯定是心动的,但我却并没有丝毫犹豫,祖国的进步和强大,是我毕生事业的雄心所在。身在海外的我更加深刻体会到爱国之心、故乡之情,而作为一名共产党员,更应该以毕生所学报效祖国。

结直肠癌化疗合理用药原则专家共识

结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤,化疗仍是其主要治疗方式之一。因肿瘤的分期和部位不同,化疗的目的、方式、疗效也各不相同,如新辅助化疗、辅助化疗、联合化疗、姑息化疗。重庆市医学会肿瘤学分会化疗学组组织专家组成员,在大量循证医学证据的基础上,参考国内外相关指南和文献,讨论并制定了《结直肠癌化疗合理用药原则专家共识》,旨在规范结直肠癌化疗的治疗模式,保障医疗质量,提高化疗疗效、延缓复发、改善预后。

抗肿瘤药物Ⅰ期临床试验质量控制的问题分析

目的:了解抗肿瘤药物Ⅰ期临床试验既往质量控制中存在的问题,探索影响其质量的风险因素及应对措施。方法:选取2020—2022年该院Ⅰ期临床试验项目的质量控制报告,根据不同的检查阶段,对质量控制报告中存在的问题进行描述性分析。结果:2020—2022年,该院Ⅰ期病房开展的抗肿瘤药物Ⅰ期临床试验项目共112项,涉及440份质量控制报告,共发现问题203次。根据不同的检查阶段,试验期存在的问题数量最多(67次,占33.00%);其次为试验前,发现问题61次(占30.05%)。在具体的问题方面,发生次数排序居前3位的问题分别为研究人员授权相关问题(23次,占11.33%)、不良事件记录不规范问题(18次,占8.87%)和研究人员培训相关问题(16次,占7.88%)。结论:开展基于风险的质量管理,加强质量控制的强度和质量,提升质量控制人员的专业技能,有利于提升临床试验项目质量和结果的可靠性。

肺癌化疗原则专家共识

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤,化疗仍是其主要治疗方式之一。因病理和肿瘤分期不同,化疗的目的和方式存在差异,发挥的作用也各不相同,如新辅助化疗、辅助化疗、根治性化疗、姑息化疗。重庆市医学会肿瘤学分会化疗学组专家组成员在大量循证医学证据的基础上,参考国内外相关指南和文献报道,经过反复讨论和修改,形成了《肺癌化疗原则专家共识》,该共识按照疾病类型和分期阐述了肺癌化疗的标准治疗模式,为肿瘤科医师科学规范开展肺癌化疗临床实践提供了参考。

省、懒、怕、作,癌症最喜欢这4个字

自讨苦吃、自寻烦恼、自作自受都是指在日常生活中我们自己主动给自己找事做、找麻烦、找罪受,其实肿瘤也常常是我们“自找”的。人人都怕癌症,但癌症有时候还真就是你自己招来的。虽说肿瘤是先天性和后天性多种因素导致的疾病,先天性因素中的遗传、基因突变以及内分泌因素等,我们常常无法避免和改变;但是90%以上的癌症是后天因素造成的。我们可以通过把控后天性人为因素来远离肿瘤。资料表明,通过消除或减少相关风险因素影响,能够防止40%左右的新发癌症病例。

重复经颅磁刺激对癌痛患者的镇痛效果研究

目的:探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对癌痛患者的镇痛疗效。方法:本研究采用前瞻性随机对照试验,将50例癌痛患者随机分为rTMS组和对照组各25例。在常规药物治疗的基础上,rTMS组给予高频10Hz、左侧背外侧前额叶(DLPFC)刺激治疗,对照组采用假刺激治疗。采用数字评价量表疼痛评分、口服吗啡等效剂量(OME)、WHO生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评定患者的治疗效果。结果:经2周治疗后,rTMS组患者的NRS评分均较治疗前及对照组治疗后明显降低(P<0.05),对照组治疗前后比较差异无统计学意义。治疗后,2组患者的OME均较治疗前有所增加(P<0.05),但rTMS组的增加剂量要明显低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组患者WHOQL-BREF总分均较治疗前明显提高(P<0.05),但rTMS组更高于对照组(P<0.05)。治疗后,rTMS组的治疗有效率及显效率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:rTMS可明显缓解癌痛患者的疼痛程度,降低止痛药物使用剂量,改善癌痛患者的生活质量,是一种有效的癌痛康复治疗工具。

钙池操纵的钙通道的调控机制

钙池操纵的钙通道(store-operated calciumchannel,SOC)系存在于细胞膜表面的一种新发现的钙通道,它是非兴奋性细胞Ca2+内流的主要通道。SOC的开启是由钙库耗竭所激发,然而,钙库耗竭如何开启SOC仍不十分清楚。文章综述了SOC开启调控机制的有关研究进展。

第三代EGFR-TKI耐药后诊疗策略专家共识

近年来,随着肺癌精准诊疗的快速发展,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)已成为EGFR突变晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的标准治疗选择,但EGFR-TKI耐药是难以避免的临床和科学难题,尤其以第三代EGFR-TKI治疗耐药最被临床所关注。

脂氧素A4对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的探讨脂氧素A4（LXA4）对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制。方法体外培养HUVEC，培养后的细胞分别以单纯M199培养基培养（对照组）、氯化钻（CoCl2）诱导细胞缺氧（缺氧组）、不同浓度LXA4（1、10、100nmol/L）加入缺氧组细胞培养液中（药物干预组）；倒置相差显微镜下观察各组HUVEC的形态学变化；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度LXA4培养24h和100nmol/L的LXA4作用不同时间（4、8、12、24h）后缺氧HUVEC存活率；免疫细胞化学法检测细胞胞质内第Ⅷ因子相关抗原抗体（vWF）水平变化（以灰度值表示），细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性；激光共聚焦显微镜观察细胞质内游离Ca^2＋荧光强度变化。结果（1）细胞形态：缺氧组HUVEC明显失去原有正常细胞形态，细胞变圆，核固缩；药物干预组正常细胞数量增多，加入100nmol/L浓度的LXA4后，大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似。（2）细胞存活率：缺氧组细胞存活率为（40．1±3．9）％，药物干预组细胞培养液中加入1、10、100nmoVL浓度的LXA4后，细胞存活率分别为（52．9±1．4）％、（64．1±3．3）％、（76．6±1．6）％，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。药物干预组细胞培养液中LXA。浓度为100nmo／／L时，作用4、8、12、24h，细胞存活率分别为（68．2±2．3）％、（82．5±1．4）％、（82．9±1．4）％和（72．2±8．5）％，且在12h时达峰值；药物干预组各时间点细胞存活率分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）vWF水平：随着药物干预组细胞培养液中LXA。浓度的增加，其胞质内vwF水平逐步降低，LXA4浓度为1、10、100nmol／L时，vWF水平分别为203．9±0．7、204．6±0．9、191．8±0．5，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）Ca2’荧光强度：激光共聚焦显微镜观察结果显示，LXA4可提高缺氧HUVEC胞质内Ca^2＋荧光强度。结论LXA4对缺氧HUVEC维持正常的细胞形态起重要作用，并可提高其细胞存活率及降低细胞质内vWF水平，其保护机制可能是通过降低细胞内钙超载和转移细胞核内Ca^2＋使细胞质内Ca^2＋增加。

脂氧素A_4通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道电流而抑制其激活和增殖

目的通过研究脂氧素A4（LXA4）对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流（Isoc）及细胞激活和增殖的影响，初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3／AM负载细胞后，用激光共聚焦扫描显微镜技术动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化；全细胞膜片钳技术记录Isoc；ELISA测IL-2水平；3^H-TdR掺入法测细胞增殖情况，并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果（1）用含钙细胞外液时，LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度，而用无钙细胞外液时则无显著差异；（2）LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵的钙通道（SOC）激活剂thapsigargin（TG）引起Jurkat T细胞内游离钙浓度的增高，100nmol／L LXA4也能抑制anti-CD3或植物血凝素（PHA）引起的细胞内钙离子浓度的增高，SOC阻滞剂2-aminoethoxydiphenylborate（2-APB）能显著抑制TG引起的钙内流；（3）膜片钳结果显示，LXA4抑制正常Jurkat T细胞Isoc，TG能显著增大Isoc，而LXA4呈剂量依赖性抑制TG引起的Isoc的升高；（4）LXA4剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28诱导的Jurkat T细胞IL-2表达及细胞增殖，细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由GI1期进入S期，降低S期细胞比例。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞Isoc引起的胞质内游离钙离子浓度的升高而抑制其激活和增殖。

大细胞神经内分泌癌诊治重庆专家共识

大细胞神经内分泌癌(LCNEC)是少见的高级别神经内分泌癌,好发于肺、胃肠道、胰腺和宫颈等,预后差.因病变原发部位及分期不同,LCNEC治疗的目的和手段存在很大的差异.重庆市医药生物技术协会肿瘤罕见病疑难病专委会专家组在大量循证医学证据的基础上,参考国内外文献报道,经过反复讨论和修改,形成了本共识.共识阐述了LCNEC的标准治疗模式,为肿瘤科医师提供参考.