FOLFOX4联合1-MT对胃癌小鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的:观察FOLFOX4联合1-甲基-色氨酸(1-methyl tryptophan,1-MT)对荷胃癌小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,以及对胃癌组织吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)表达的影响。方法:将IDO真核表达质粒(pcDNA3.1-IDO)转染小鼠胃癌细胞MFC,建立稳定表达IDO的细胞株,RT-PCR与Westernblot法检测细胞中IDO的表达。小鼠皮下接种转染pcDNA3.1-IDO的MFC细胞悬液,建立高表达IDO的小鼠胃癌皮下移植瘤模型(32只),同时设空白对照(8只,接种未转染的MFC细胞)和阴性对照(8只,接种转染pcDNA3.1质粒的MFC细胞),观察各组小鼠成瘤情况。将32只模型小鼠随机分为1-MT治疗组、FOLFOX4治疗组、FOLFOX4+1-MT联合治疗组和未治疗组(阳性对照组),每组8只。治疗组分别注射给予1-MT、FOLFOX4或FOLFOX4+1-MT,阳性对照组给予生理盐水。观察各组小鼠一般情况及肿瘤质量差异。注射细胞悬液后第12天处死所有小鼠,剥离瘤体并称重,计算各组小鼠平均瘤质量及抑瘤率,另取肿瘤标本采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织中IDO的表达。结果:RT-PCR与Westernblot均检测到pcDNA3.1-IDO转染细胞中IDO的表达。高表达IDO的胃癌皮下移植瘤模型小鼠肿瘤质量大于空白对照组和阴性对照组小鼠(P<0.05),且其胃癌组织IDO的表达亦较空白对照组和阴性对照组明显增加(P<0.05)。给予1-MT、FOLFOX4和FOLFOX4+1-MT治疗后,模型小鼠进食量均不同程度增加,行动较之前灵活,嗜睡也有不同程度好转,FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠症状基本缓解。1-MT治疗组、FOLFOX4治疗组和FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠肿瘤质量均小于未治疗组(P<0.05),其抑瘤率分别为8.91%、80.20%、86.13%,FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠肿瘤质量小于1-MT治疗组和FOLFOX4治疗组(P<0.05)。1-MT治疗组、FOLFOX4治疗组和FOLFOX+1-MT联合治疗组小鼠胃癌组织中IDO的表达均低于未治疗组(P<0.05);FOLFOX4+1-MT联合治疗组胃癌组织中IDO的表达低于1-MT治疗组和FOLFOX4治疗组(P<0.05)。结论:1-MT对胃癌小鼠皮下移植瘤的生长和胃癌组织IDO的表达具有抑制作用,并能与FOLFOX4发挥协同抗肿瘤作用。

FOLFOX4与1-D-甲基色氨酸联合治疗对荷胃癌小鼠调节性T细胞的影响

目的:研究FOLFOX4与1-D-甲基色氨酸(1-D-methyl tryptophan,1-D-MT)联合应用是否有利于改善荷胃癌小鼠的免疫耐受状态。方法:用脂质体转染法,将pcDNA3.1-IDO质粒和pcDNA3.1(+)空质粒稳定转染MFC细胞,并设未转染组;用RT-PCR和Western blot法检测未转染组、空质粒转染组和pcDNA3.1-IDO转染组IDO mRNA和蛋白的表达;然后建立荷胃癌小鼠皮下移植瘤模型,并设未转染组、空质粒转染组,IDO+生理盐水(NS)组、FOLFOX4组、1-D-MT组和FOLFOX4+1-D-MT联合处理组,采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏中Treg细胞数量变化;RT-PCR检测FOXP3 mRNA表达量变化。结果:IDO mRNA与蛋白表达在稳定转染pcDNA3.1-IDO质粒组细胞较未转染组、空质粒转染组表达量明显增加(P<0.05)。IDO+NS组小鼠脾脏Treg细胞比例及FOXP3 mRNA含量较未转染组、空质粒组均明显增多(P<0.05)。FOLFOX4+1-D-MT组和1-D-MT组与FOLFOX4组相比,Treg细胞比例及FOXP3 mRNA含量均明显降低(P<0.05),且联合治疗组较1-D-MT组降低更明显(P<0.01)。结论:通过抑制Treg的增殖及降低FOXP3 mRNA表达,FOLFOX4与1-D-MT联合应用可降低机体免疫逃逸能力。

IDO对胃癌细胞移植瘤中E-cadherin、N-cadherin及IL-6水平的影响

目的:检测转染吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的MFC胃癌细胞移植瘤中E-cadherin、N-cadherin及IL-6的表达水平。方法:建立MFC胃癌细胞移植瘤模型,分为MFC胃癌细胞组、pcDNA3.1-MFC细胞(空质粒)组、pcDNA3.1-IDO-MFC细胞组,免疫组化方法检测3组的E-cadherin和N-cadherin表达情况,酶联免疫吸附试验检测3组荷瘤小鼠血清液中IL-6的表达水平。结果:pcDNA3.1-IDO-MFC组移植瘤组织中,E-cadherin的表达较空质粒组和MFC细胞组明显减少(P<0.05),N-cadherin的表达较其他两组明显增多(P<0.05)。pcDNA3.1-IDO-MFC细胞组荷瘤小鼠血清IL-6水平较其他两组明显增高(P<0.05)。结论:IDO转染导致胃癌细胞移植瘤中E-cadherin水平下调、N-cadherin和IL-6水平上调,该结果为IDO参与肿瘤细胞的侵袭和转移提供实验依据。

维生素C联合奥曲肽治疗肝硬化消化道出血的效果分析

探讨维生素 C与奥曲肽对肝硬化胃肠道出血的影响。方法:选取70例肝硬化胃肠道出血病人,采用数字表格将其分为两组35名,对照组采用奥曲肽,并在此基础上添加维生素C。两组胃肠道出血的平均控制时间、治疗前后患者心室率监测值以及中心静脉压水平、整体疗效、肝硬化消化道出血复发率。结果:观察组平均消化道止血的时间短于对照组,观察组病人的心室速率、中心静脉压力均明显好于对照组,总体效果显著, P<0.05。且观察组肝硬化胃肠道大出血的复发率为2.85%,与对照组相比,差异有统计学意义。结论:奥曲肽与维生素 C结合治疗肝硬化胃肠道大出血有明显疗效,能有效地阻止肝硬化胃肠道大出血,并能稳定病人的生命体征,减少止血时间,提高病人的预后。

观察食管癌患者放疗后经药膳食疗干预后的临床疗效

研究药膳食疗对食管癌放疗患者治疗效果、生活质量的影响。方法 选取我院102例食管癌患者分实验组、对比组,分别进行常规护理与药膳食疗干预,比较两组护理质量、满意度等差异。结果 实验组不良反应低于对比组;生活质量与能力、满意度与睡眠质量均具有明显优势(P<0.05)。结论 食管癌放疗后对患者的生活质量以及营养摄入均带来较为严重的损伤,对其进行药膳食疗干预,能够明确降低患者的生活压力,改善其远期预后,值得重视。

中医药膳对放疗后食管癌患者生活质量及治疗依从性的影响作用

研究中医药膳对食管癌放疗患者生活质量与治疗依从的影响。方法 对比组开展常规干预,实验组增加中医药膳干预,比较两组生活质量及治疗依从等不同。结果 实验组治疗依从性高于对比组;生活与护理质量以及满意度等各项评分均好于对比组(P<0.05)。结论 食管癌放疗患者的治疗压力较大,患者多存在较为严重的营养压力,对其进行中医药膳干预,能够显著提高患者的生活质量,降低不良反应,值得应用。

奥曲肽治疗肝硬化上消化道出血的临床效果研究

探讨奥曲肽在肝硬化上消化道大出血中的作用。方法:对100例肝硬化上消化道出血病人进行分析。将其分为两组:对照组采用常规的治疗,观察组奥曲肽和常规治疗,对比分析两组止血、症状缓解、住院时间、治疗效果、死亡率、死亡率等方面的差异是否有统计学意义。并分析在治疗前后, SOD、 MDA含量、胆碱酯酶、 SOD含量、 MDA含量结果,分析有无出现恶心、呕吐、腹痛等不良反应。结果:观察组的总有效率为96.00%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的住院死亡率无统计学意义(P>0.05)。观察组与对照组比较,胆碱酯酶和 SOD含量明显增高, MDA含量明显降低(P<0.05);不良反应:观察组1例有轻度的恶心、呕吐各有1例、针刺处疼痛2例、8.00%;对照组2例出现胃肠道不适、腹痛、大便频等症状,2例出现头晕、心悸、胸闷等症状,8.00%出现明显的副作用。不良反应的发生率在两组之间没有统计学意义(P>0.05)。两组病人经对症处理后,症状有明显改善。观察组患者症状缓解时间、止血时间、住院时间明显低于对照组(P<0.05);观察组的止血时间(25.16±2.45)比对照组(30.21±2.01)小时(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:奥曲肽对肝硬化上消化道出血有明显的治疗作用,并能加快出血的速度。而且副作用小,能更好地提高病人的预后,是一种安全、有效的方法。

大黄酸调节Ras/ERK信号通路对肝细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨大黄酸调节大鼠肉瘤蛋白(Ras)/胞外信号调控激酶(ERK)信号通路对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用不同浓度(0、12.50、25、50、100、150、200 mol/L)大黄酸处理HepG2细胞,检测细胞活性,筛选最佳大黄酸浓度。将细胞分为对照组、大黄酸低、中、高浓度组、大黄酸高浓度+Ras/ERK激活剂组(大黄酸高浓度+ML-099组),分别检测各组细胞集落形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数和Ras、p-ERK、ERK蛋白表达。结果:大黄酸以浓度和时间依赖性降低HepG2细胞活性(P<0.05),选用25、50、100 mol/L处理HepG2细胞24 h用于后续实验;与对照组比较,大黄酸低、中、高浓度组细胞集落形成数、G0/G1细胞比例、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数和原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Ras、p-ERK/ERK蛋白表达呈浓度依赖性降低,S期和G2/M细胞比例、p53蛋白表达呈浓度依赖性增加(P<0.05);与大黄酸高浓度组比较,大黄酸高浓度+ML-099组细胞集落形成数、G0/G1细胞比例、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数和c-Myc、CyclinD1、Ras、p-ERK/ERK蛋白表达显著增加,S期和G2/M细胞比例、p53蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:大黄酸可能通过抑制Ras/ERK信号通路抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭。

FOLFOX4与1-D-甲基色氨酸联合治疗对荷胃癌615小鼠细胞毒性淋巴细胞的影响

目的研究FOLFOX4化疗方案与1-D-甲基色氨酸（1-methyl—D—tryptophan，1-D—MT）联合应用对荷胃癌小鼠的免疫耐受的影响。方法用脂质体转染法，将IDO—peDNA3．1质粒和pcDNA3．1（＋）质粒稳定转染MFC细胞，设定空白对照组；用RT—PCR和Westernblot法检测吲哚胺2，3-双加氧酶（indoleamine-2，3-dioxygenase，IDO）mRNA和蛋白表达；建立荷胃癌615小鼠模型，分别给予生理盐水、FOLFOX4、1．D．MT和FOLFOX4＋1-D—MT治疗。利用抑瘤率检测小鼠成瘤情况，流式细胞术检测各组小鼠脾脏中细胞毒性淋巴细胞（cytotoxicity Tlymphocyte，CTL）数量的变化，RT—PCR检测颗粒酶B（granzymeBGZMB）mRNA表达量的变化。结果（1）与MFC和空质粒生理盐水组相比，IDO生理盐水组肿瘤体积大，生长快，差异有统计学意义（P〈0．05）；与IDO生理盐水组比较，FOLFOX4组、1-D—MT组和联合组肿瘤体积均变小，重量减轻，其抑瘤率分别为83．5％±0．4％、81．8％±0．4％、95．7％±0．8％，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）给予生理盐水的IDO阴性对照组CTL及GZMBmRNA含量（22．1％±4．2％、0．370±0．019）较MFC组（46．9％±4．1％、0．450±0．017）、空质粒组（47．6％±4．8％、0．450±0．018）明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；联合组（64．5％±2．5％、0．660±0．019）和1-D—MT组（55．3％±2．5％、0．560±0．015）与FOLFOX4组（34．2％±3．2％、0．330±0．012）相比，CTL及GZMBmRNA含量明显升高（P〈0．05），且联合治疗组较1—D—MT组升高更明显，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。结论FOLFOX4与1-D—MT联合应用提高CTL细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，降低肿瘤的免疫逃逸能力。

1-甲基色氨酸与5-氟尿嘧啶联合干预对荷胃癌小鼠髓源性抑制细胞的影响

目的 研究1-甲基色氨酸（1-methyl tryptophan,1-MT）和5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）对荷胃癌小鼠髓源性抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells,MDSC）的影响.方法 将稳定转染IDO-pcDNA3.1（＋）质粒和空质粒以及未转染的小鼠前胃癌细胞种植于小鼠皮下,建立荷胃癌移植瘤小鼠模型,分别给予生理盐水、1-MT、5-FU和1-MT＋ 5-FU治疗.取小鼠脾脏及肿瘤组织,用流式细胞术和免疫荧光法检测组织中MDSC的数量.结果 （1）移植瘤中有MDSC的表达.（2）胃癌小鼠体内MDSC（49.8％±1.1％）较正常小鼠（1.2％±0.3％）明显增加（P＜0.05）.（3）与正常小鼠相比,联合用药组MDSC（18.5％±0.5％）的数量明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 1-MT与5-FU联合应用使荷胃癌移植瘤小鼠脾脏及肿瘤部位的MDSC数量减少,改善肿瘤微环境.