根皮素对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的体外抗炎作用机制

目的:研究根皮素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞体外抗炎的作用机制,以全方位认识根皮素的抗炎作用机制并为临床开发新药提供理论依据。方法:CCK-8法检测根皮素对巨噬细胞增殖的影响,ELISA、实时荧光定量PCR、Western blot、荧光抗体技术(ICC-IF)分别检测TNF-α、IL-6、IL-1β、i NOS和COX-2及Akt/NF-κB、MAPK信号通路、NF-κBP65核移位。结果:CCK-8法显示根皮素药物浓度在1μg/ml~100μg/ml时其细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6、IL-1β、i NOS和COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38信号通路高表达(P<0.05、P<0.01、P<0.001);与模型组相比,不同剂量组含根皮素药物干预后,TNF-α、IL-6、IL-1β、i NOS、COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38表达下调(P<0.05、P<0.01、P<0.001)。结论:根皮素能明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的炎症因子释放及TNF-α、IL-6、IL-1β、i NOS和COX-2的m RNA及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38蛋白表达从而抑制炎症反应。