目的利用原核表达系统获取结核分枝杆菌MPT64蛋白,制备并鉴定MPT64蛋白多克隆抗体。方法提取结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA并以其为模板,PCR扩增获取目的基因MPT64,并插入蛋白表达载体PET-26b(+)。将纯化得到的MPT64蛋白免疫新西兰兔,...目的利用原核表达系统获取结核分枝杆菌MPT64蛋白,制备并鉴定MPT64蛋白多克隆抗体。方法提取结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA并以其为模板,PCR扩增获取目的基因MPT64,并插入蛋白表达载体PET-26b(+)。将纯化得到的MPT64蛋白免疫新西兰兔,最终制备得到MPT64多克隆抗体,通过免疫印迹法鉴定该抗体的特异性。结果成功获取结核分枝杆菌MPT64基因及其重组蛋白,分子量约为27 k D左右。免疫印迹实验证实,以该重组蛋白为免疫原制备得到的多克隆抗体可特异性识别来自于结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗所表达的MPT64蛋白。结论获得高特异性的结核分枝杆菌MPT64蛋白多克隆抗体,有助于结核分枝杆菌疫苗的研发。展开更多
文摘目的利用原核表达系统获取结核分枝杆菌MPT64蛋白,制备并鉴定MPT64蛋白多克隆抗体。方法提取结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA并以其为模板,PCR扩增获取目的基因MPT64,并插入蛋白表达载体PET-26b(+)。将纯化得到的MPT64蛋白免疫新西兰兔,最终制备得到MPT64多克隆抗体,通过免疫印迹法鉴定该抗体的特异性。结果成功获取结核分枝杆菌MPT64基因及其重组蛋白,分子量约为27 k D左右。免疫印迹实验证实,以该重组蛋白为免疫原制备得到的多克隆抗体可特异性识别来自于结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗所表达的MPT64蛋白。结论获得高特异性的结核分枝杆菌MPT64蛋白多克隆抗体,有助于结核分枝杆菌疫苗的研发。