人参皂苷Rg1对Aβ1-42诱导的BV-2细胞中NLRP3炎性小体激活的抑制作用

目的:探索人参皂苷Rg1对BV-2细胞中Nod样受体家族中含3个吡啶域的受体(NLRP3)炎性小体激活的抑制作用。方法:将BV-2细胞分成正常对照组、β-淀粉样蛋白(Aβ)组和人参皂苷Rg1组。CCK8法确定人参皂苷Rg1作用浓度。正常对照组不作处理;Aβ组加入β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42);人参皂苷Rg1组加入Aβ1-42和人参皂苷Rg1。培养24 h后,采用CCK8法检测细胞活力。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法测量NLRP3炎性小体相关mRNA表达。采用ELISA法测量上清液中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)的水平。结果:Aβ组的细胞活力显著低于正常对照组,人参皂苷Rg1组的细胞活力高于Aβ组(均P<0.05)。Aβ组NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA水平均显著高于正常对照组,而人参皂苷Rg1组NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA水平均低于Aβ组(均P<0.05)。Aβ组上清液中的IL-1β和IL-18浓度显著高于正常对照组,人参皂苷Rg1组细胞上清液中的IL-1β和IL-18浓度低于Aβ组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1能提高AD神经炎症细胞模型的活性,抑制炎症因子产生,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体激活有关。

早老素1-V97L转基因小鼠的繁殖与基因型鉴定的研究

目的:为成功繁殖与鉴定早老素(PSEN1-V97L)转基因小鼠用予提供研究阿尔茨海默病(Alzhimer's Desease,AD)的动物模型。方法:将PSEN1-V97L错义突变的雄鼠和C57BL/6雌鼠进行繁殖交配,得到杂合子和野生型2种基因型小鼠,出生后20天左右取小鼠尾巴进行基因组DNA提取并用2种不同试剂的不同反应体系进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序以确定PSEN1-V97L小鼠。结果:PSEN1-V97L转基因小鼠的PCR扩增产物在494 bp处可见目标条带,测序结果可见97号密码子发生GTG→TTG错义突变。结论:成功进行PSEN1-V97L小鼠的繁育和基因型鉴定,为进一步研究AD提供了实验动物模型。