一种人源性穿膜肽融合蛋白中连接肽的引入及其在HeLa细胞中的穿膜活性

p14ARF(alternate reading frame)是一种人肿瘤抑制因子,其N端1-22位氨基酸可以携带药物蛋白进入细胞发挥药理作用,记为ARF。在示踪蛋白EGFP和ARF间引入了二肽(linker 2)、柔性七肽(linker 7F)和刚性七肽(linker 7S),研究其对融合蛋白EGFP-ARF穿膜活性的影响。实验结果显示引入七肽(linker 7)的融合蛋白,其荧光强度高于linker 2的融合蛋白。激光共聚焦观察表明,引入linker 7F的融合蛋白比引入linker 2的融合蛋白的穿膜效率高5倍左右,比引入linker 7S的融合蛋白高3.8倍左右。结果表明连接肽的形式对融合蛋白的结构和功能都有显著影响,为ARF作为药物运输载体的研究提供了依据。