桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠糖代谢机理的实验研究

目的通过观察桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠的体质量、饮水量,空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)等生化指标及对葡萄糖激酶(GK)表达的影响,初步探讨桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠糖代谢的机理。方法选用成年雄性豚鼠48只,每组8只:正常组,桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组,阴性对照组及阳性对照组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制作豚鼠糖尿病模型,灌胃桦褐孔菌水提取物,观察体质量和饮水量的变化,治疗8周后,心脏取血测定FBG、HbA1c,取肝脏,用Western blot测定葡萄糖激酶的表达。结果桦褐孔菌治疗组饮水量显著减少,体质量增加较明显,FBG和HbA1c水平明显下降,葡萄糖激酶的表达增高明显,并且表现为剂量梯度依赖。结论桦褐孔菌对糖尿病豚鼠饮水量的改善、体质量的增加、降低血糖及降低血红蛋白的糖基化程度具有较明显的效果,可能和通过增强葡萄糖激酶的表达,进而加强葡萄糖的分解代谢过程有关。

桦褐孔菌对糖尿病豚鼠脂类代谢机理的影响

目的通过观察桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等生化指标及对Ser/Thr激酶蛋白激酶B(PKB)、HMG CoA还原酶(HMG CoA reduc-tase)表达的影响,初步探讨桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠脂类代谢的机理。方法选用成年雄性豚鼠48只分组,每组8只:正常组,桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组,阴性对照组及阳性对照组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制作豚鼠糖尿病模型,灌胃桦褐孔菌水提取物,治疗8周后,心脏取血测定TC、TG、LDL-C和LDL-C,取肝脏和骨骼肌,用Western blot测定HMG CoA还原酶、PKB的表达。结果桦褐孔菌治疗TC、TG和LDL-C水平明显下降,HDL水平略有增高,HMGCoA还原酶的表达降低,PKB的表达增高明显,并且表现为剂量梯度依赖。结论桦褐孔菌对糖尿病豚鼠TC、TG、LDL水平的降低具有明显的效果,这种结果可能和桦褐孔菌增强PKB表达和的降低HMG CoA还原酶的表达,进而减少脂肪的分解和胆固醇的合成,一定程度上纠正脂类代谢紊乱相关。

桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠降低血糖血脂作用的研究

目的:通过桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠的糖、脂代谢指标等表达的影响,初步探讨桦褐孔菌水提取物治疗糖尿病的机理。方法:选用成年雄性豚鼠48只,每组8只,随机分为正常组、桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组、阴性对照组及阳性对照组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制作豚鼠糖尿病模型,灌胃桦褐孔菌水提取物,治疗前及治疗8周后,分别内眦静脉及心脏取血测定空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),取肝脏,蛋白质印迹法测定葡萄糖分解代谢关键酶葡萄糖激酶(GK,己糖激酶)及胆固醇合成关键酶羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMG CoA还原酶)的表达。结果:桦褐孔菌水提取物治疗组FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C和HDL-C水平明显下降,GK表达增高,HMGCoA还原酶的表达降低,并且表现剂量梯度依赖。结论:桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C和HDL-C水平的降低具有明显的效果,可能和桦褐孔菌水提取物通过增强GK的表达和降低HMG CoA还原酶的表达,促进葡萄糖的分解和减少胆固醇的合成过程相关。

固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)的表达调节

目的探讨SREBP1c对mGLUT1表达的影响。方法采用分子克隆技术,将SREBP1c和mGLUT1cDNA分别克隆到表达载体pSVsport和pGL3b上。SREBP1c与mGLUT1克隆载体同时或单独转染NIH3T3细胞,然后应用荧光素酶活性测定法、RTPCR及Northernblot等方法测定SREBP1c对mGLUT1的启动子活性调节及mRNA表达的影响。结果实验结果表明,SREBP1c可激活mGLUT1启动子的活性,并且可增加内源性mGLUT1的mRNA表达水平。结论SREBP1c可增强mGLUT1的表达,可能介导胰岛素对mGLUT1的调节过程。

桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠血糖、血脂水平及糖、脂代谢关键酶表达的影响

[目的]探讨桦褐孔菌水提取物对血糖、血脂水平及糖、脂代谢关键酶表达的影响,并探讨其作用机理.[方法]采用链脲佐菌素腹腔注射方法制作豚鼠糖尿病模型,灌胃给予不同剂量的桦褐孔菌水提取物,给药前及给药8周后分别检测豚鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、葡萄糖激酶(GK)及羟甲基戊二酸单酰(HMG)CoA还原酶水平.[结果]桦褐孔菌水提取物降低糖尿病豚鼠FBG,TC水平,增高GK表达,降低HMGCoA还原酶表达.[结论]桦褐孔菌水提取物具有降低糖尿病豚鼠FBG,TC水平的作用,其机制可能与增强GK表达及降低HMGCoA还原酶表达相关.

nm23与p53蛋白在胃癌及对应淋巴转移灶中的表达

为了探讨抗癌基因ｐ５３、癌转移抑制基因ｎｍ２３的表达产物在胃癌及其对应的淋巴转移灶和正常组织中的表达，应用抗鼠ｐ５３，ｎｍ２３Ｈ１单克隆抗体，用亲和素生物素过氧化物酶复合物法测定了这两种蛋白在上述组织中的表达．结果，在胃癌原发灶中ｎｍ２３蛋白阳性表达率为４１％，ｐ５３蛋白阳性表达率为５０％；在对应淋巴转移灶中ｎｍ２３蛋白阳性表达率为１１％，而ｐ５３蛋白阳性表达率为６７％．非癌组织中ｎｍ２３蛋白表达全部为阴性，ｐ５３蛋白阳性表达率为２／６．ｎｍ２３蛋白在胃癌原发灶中的阳性表达率显著高于非癌组织中的阳性表达率，胃癌原发灶中的阳性表达率显著高于转移灶中的ｎｍ２３蛋白阳性表达率，原发灶高分化胃癌中的ｎｍ２３蛋白阳性表达率显著高于低分化胃癌中的ｎｍ２３蛋白阳性表达率；ｐ５３蛋白在胃癌淋巴转移灶中的阳性表达率显著高于非癌组织中的阳性表达率．

延边朝鲜族新生儿血红蛋白Gγ/(Gγ+Aγ)比值测定

目的:血红蛋白γ链包括Gγ和Aγ,基因图谱分析发现新生儿常有γ链基因的异常。实验测定延边朝鲜族新生儿血红蛋白Gγ/(Gγ+Aγ)比值,对于研究人类遗传变异和基因调节具有重要意义。方法:实验于2005-12/2007-04在延边大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学教研室完成。①材料来源:97例朝鲜族新生儿脐带血由延边大学医院妇产科产室提供,产妇均签署知情同意书。②实验方法:新生儿脐带血取样后立即冷冻于液氮之中,EDTA-Na2抗凝,进行血红蛋白解链,每500μL脐带血与0.9%的NaCl溶液1000μL相混合稀释,离心去上清,分离血红蛋白。用酸性聚丙烯酰胺以凝胶电泳法分离血红蛋白中的Gγ和Aγ肽链,电压200V,电泳50min,电泳方向为正极到负极。电泳后凝胶用丽春红2R染色,乙酸脱色致本底无色。用UVP扫描凝胶成像分析系统对凝胶板上的Gγ和Aγ肽链进行扫描定量,测定血红蛋白中Gγ/(Gγ+Aγ)比值。结果:朝鲜族新生儿脐带血中的血红蛋白Gγ/(Gγ+Aγ)比值分布情况:1例处于30%～48%低Gγ区,占总例数的1.03%,平均值27.60%;96例处于50%～79%中间区,占总例数的98.97%,平均值(68.40±2.90)%,明显低于相关文献报道的新疆维吾尔族、广西壮族、北京市汉族、西藏藏族新生儿Gγ/(Gγ+Aγ)的整体均值(75.4±2.50)%,差异有显著性意义(P<0.05);未发现>80%高Gγ区者。结论:延边朝鲜族新生儿血红蛋白Gγ/(Gγ+Aγ)比值多分布于50%～79%中间区,其平均值与其他民族比较相对较低。

Troglitazone对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体和Ⅰ型葡萄糖载体mRNA表达的影响

目的探讨Troglitazone对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)和I型葡萄糖载体(mGLUT1)mRNA表达的影响。方法采用分子克隆技术,将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)和维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT2和mGLUT1cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上。PPARγ与RXRα及mGLUT2与mGLUT1克隆载体转染NIH3T3细胞,处理或不处理Troglitazone,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹等方法测定Troglitazone对mGLUT2和mGLUT1重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响。结果Troglitazone可激活mGLUT2和mGLUT1重组体荧光素酶的活性,并且可增加mR-NA的表达水平。结论Troglitazone可增强mGLUT2和mGLUT1的表达,可能参与PPARγ对mGLUT2和mGLUT1的调节过程。

Troglitazone对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响

目的:探讨Troglitazone对小鼠I型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响。方法:采用分子克隆技术,将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)和维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT1 cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上。PPARγ与RXRα及mGLUT1克隆载体转染NIH 3T3细胞,处理或不处理Troglitazone,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹等方法测定Troglitazone对mGLUT1重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响。结果:Troglitazone可激活mGLUT1重组体荧光素酶的活性,并且可增加mGLUT1的mRNA表达水平。结论:Troglitazone可增强mGLUT1的表达,可能参与PPARγ对mGLUT1的调节过程。

山高粱水提物对大鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的 :研究山高粱水提物对 CCl4 所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法 :给动物灌胃给药 ,用 CCl4 造大鼠急性肝损伤模型 ,用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶 (aspartate transaminase,AL T)、丙氨酸转氨酶 (alaninetransaminase,AST)的活性 ;测定大鼠血清超氧化歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (glutathioneperioxidase,GSH- PX)的活性及丙二醛 (malondialdehyde,MDA)的含量。结果 :山高粱水提物显著降低因 CCl4 所致急性肝损伤大鼠血清 AL T的升高 ;对急性肝损伤大鼠血清 SOD,GSH- PX的活性有明显的升高作用及降低 MDA的含量 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :山高粱水提物对 CCl4 所致大鼠急性肝损伤有保护作用。

肝细胞核因子3对Ⅱ型葡萄糖载体启动子活性及蛋白表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子3(HNF3)对Ⅱ型葡萄糖载体(GLUT2)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术将HNF3cDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,GLUT2cDNA克隆到载体pGL3b上.通过CV-1细胞株的体外培养将HNF3转染CV-1培养细胞,应用荧光素酶活性测定和Western blot方法观察HNF3对GLUT2的启动子活性及蛋白质表达的影响.[结果]HNF3可增高GLUT2的荧光素酶活性及蛋白质表达水平.[结论]HNF3可能通过调节GLUT2的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.

肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1αcDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,以HNF-1α转染CV-1细胞,应用Northern blot方法测定HNF-1α对mGLUT1 mRNA表达的影响.[结果]HNF-1α可提高mGLUT1 mRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.

CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性及蛋白表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性和蛋白表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将SREBP-1c和其阴性表达体(ADDN)DNA序列重组到表达载体pSV-sport上.用SREBP-1c转染CV-1细胞,应用Northern Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA的表达及其稳定性的影响,应用Western Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体蛋白表达的影响.[结果]SREBP-1c可增加Ⅰ型葡萄糖载体的mRNA表达水平及稳定性,可提高Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达水平.[结论]SREBP-1c可增强Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达,可能通过调节Ⅰ型葡萄糖载体的表达水平而参与胰岛素对血糖的调节过程.

朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白γ链的相关研究

[目的]测定朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γ^G137（γ^G136＋γ^A136）比值，并分析其意义．[方法]采用血红蛋白解链、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离法和电泳光密度法测定160例延边朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γ^G137（γ^G136＋γ^A136）的比值[结果]1例（0．63％）γ^G137（γ^G136＋＋γ^A136）比值在20％～48％区间；其余159例（99．37％）比值在50％～80％区间，平均比值为66．40％±3．90％．[结论]朝鲜族新生儿血红蛋白γ^G137（γ^G136＋γ^A136）比值与国内其他民族间存在差异．

罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体mRNA表达的影响

[目的]探讨罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)mRNA表达的影响.[方法]采用分子克隆技术将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)、维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT2cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上.PPARγ,RXRα,mGLUT2克隆载体转染NIH3T3细胞,处理或不处理罗格列酮,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹方法等测定罗格列酮对mGLUT2重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响.[结果]罗格列酮可激活mGLUT2重组体荧光素酶的活性,亦可增加mRNA的表达水平.[结论]罗格列酮可增强mGLUT2的表达,可能参与PPARγ对mGLUT2的调节过程.

癌细胞转移抑制基因nm23及其表达产物二磷酸核苷激酶的研究进展

癌细胞转移抑制基因ｎｍ２３及其表达产物二磷酸核苷激酶的研究进展李天洙尹宗柱延边大学医学院肿瘤生物化学研究室关键词肿瘤转移；抑制，遗传；核苷二磷酸激酶类中图法分类号Ｒ７３３７肿瘤转移是引起大多数肿瘤患者死亡的主要因素．癌细胞的转移是一个十分复杂的过程...

草苁蓉甲醇提取物对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝脏癌前病变的抑制作用

目的：探讨草苁蓉（ＢＲ）对大鼠肝脏化学致癌作用的抑制效应。方法：按ＳｏｌｔＦａｒｂｅｒ氏方法复制大鼠肝脏癌前病变模型，用免疫组织化学方法观察了在肝脏癌前病变组和ＢＲ处理组及正常对照组大鼠肝脏中胎盘型谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴＰ），突变型Ｐ５３蛋白及Ｐ２１蛋白的表达水平。结果：发现５００ｍｇ／ｋｇ剂量的ＢＲ甲醇提取物对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发Ｆ３４４大鼠肝脏ＧＳＴＰ阳性灶的形成有抑制作用，而且其突变型Ｐ５３蛋白及ｒａｓ基因产物ｐ２１蛋白的表达水平显著低于癌前病变组，并在ＢＲ处理后，在肝脏化学致癌初期由于癌前病变的形成所增高的γＧＴ活力明显下降。结论：提示ＢＲ对ＤＥＮ诱发大鼠肝脏癌前病变有抑制作用。

漏芦提取物抗炎、镇痛、耐缺氧及抗疲劳作用的研究

目的:探讨漏芦提取物抗炎、镇痛、耐缺氧及抗疲劳作用。方法:160只小鼠随机分为4组:对照组,漏芦大、中、小剂量组,漏芦提取物以灌胃的方式给药,对照组以等体积生理盐水灌胃。采用二甲苯致小鼠耳壳肿胀的方法,测定耳片的重量;用冰醋酸致小鼠的扭体次数,测定小鼠的扭体反应次数;采用常压耐氧法记录小鼠耐缺氧时间;采用比色分析法测定游泳45min后小鼠肝糖原及血清乳酸含量。结果:漏芦提取物对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀有抑制作用,能减少冰醋酸所致小鼠的扭体次数,延长缺氧情况下的存活时间,小鼠游泳45min后肝糖原的含量明显增加、乳酸含量明显减少,与对照组比较均有显著性差异。结论:漏芦提取物具有一定的抗炎、镇痛、耐缺氧及抗疲劳作用。

小青龙汤对油酸致豚鼠急性肺损伤低氧血症的预防作用

目的:探讨血栓素A2(TXA2)在油酸致豚鼠急性肺损伤中的作用,同时观察小青龙汤对急性肺损伤低氧血症的预防作用。方法:给豚鼠静脉注射油酸制造急性肺损伤动物模型。15只豚鼠随机分为油酸对照组(OA组)、生理盐水对照组(NS组)、小青龙汤治疗组(TR组),用于观察血浆和支气管肺泡灌洗液(BALF)中血栓素B2(TXB2,TXA2的稳定代谢产物)和6-酮-前列腺素F1a(6-ketoPGF1a,前列环素的稳定代谢产物)的变化。12只豚鼠随机分为血气-油酸对照组(BOA)和血气-小青龙汤治疗组(BTR),用于观察小青龙汤对油酸致豚鼠急性肺损伤低氧血症的影响。结果:BOA组与BTR组比较,血气指标中PaO2有明显下降(P<0.01)。OA组较NS组血浆中TXB2的含量有所升高,而TR组较OA组有所下降。OA组与NS组比较,BALF中TXB2含量明显升高(P<0.01),并且TXB2/6-ketoPGF1a比值明显升高(P<0.05)。TR组与OA组比较,BALF中TXB2含量及TXB2/6-ketoPGF1a比值均明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论:在油酸致豚鼠急性肺损伤动物模型中TXA2是与低氧血症有密切关系的一种重要介质。小青龙汤对急性肺损伤具有一定的预防作用,其机制可能是通过抑制TXA2的生成改善低氧血症。建议小青龙汤能够成为预防急性呼吸窘迫症/急性肺损伤的候补药物。