超临界流体色谱对吴茱萸中吲哚类生物碱的快速分析

建立了超临界流体色谱快速分析吴茱萸中吲哚类生物碱的方法。以标准品混合物和复杂样品为对象比较4种色谱柱的分离效果,进行色谱柱的筛选;考察了进样体积、改性剂、添加剂、温度和背压对保留行为的影响。结果表明,进样体积对峰形影响显著;添加剂对保留时间和色谱峰形影响有限;改变改性剂能使保留时间显著改变;降低温度,升高背压,保留时间减小。经过优化,确定采用Waters ACQUITY UPC2 BEH色谱柱,以甲醇为改性剂,在35℃柱温和2.07×107 Pa背压条件下,15 min内完成复杂样品的分析。同时采用超高效液相色谱完成复杂样品的快速分析。结果表明,超临界流体色谱可用于天然产物的高效快速分析,同时该方法与超高效液相色谱在分离选择上的差异有助于天然产物分析方法的拓展。

大血藤总黄酮分离纯化工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化大血藤总黄酮的工艺条件。方法:以芦丁为对照品,考察大孔吸附树脂对大血藤总黄酮的富集纯化工艺。结果:采用DA201型大孔吸附树脂,上样吸附后,用纯化水和30%乙醇除杂,再用5BV、50%乙醇洗脱,可得到总黄酮含量为69.78%的大血藤提取物。结论:DA201型大孔吸附树脂在确定的工艺条件下,具有工艺简单、稳定、可靠的特点,能得到总黄酮纯度较高的大血藤提取物。

纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)涂覆型手性固定相的制备研究与分离应用

以C_8硅烷修饰的大孔硅胶作基质,涂覆制备了纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)手性固定相,研究了涂覆溶剂体系对固定相选择性的影响。实验选择氯仿或二氯甲烷作溶剂,分别添加N,N’-二甲基甲酰胺、苯酚、硝基苯、苯甲酸甲酯、苯乙酮涂覆制备了多个手性固定相,并以7种不同结构的手性化合物对固定相进行评价。结果表明,添加剂的种类与添加量对固定相的装柱柱效、保留以及选择性均会产生一定的影响。添加与纤维素酯等质量的苯甲酸甲酯制得的固定相性能较佳,其对于西孟坦中间体和酮咯酸消旋体具有良好的对映体拆分能力,具备工业制备分离的应用潜力。

大孔硅胶的制备及其在多糖衍生物手性固定相上的应用

为制备孔径为100 nm的大孔硅胶,考察了热液法和焙烧法对球形硅胶(粒径5μm,孔径10 nm)的扩孔效果。采用热液法扩孔时,在水溶液中加入22 g/L氟化钠,可以有效增强扩孔效果,在高压釜内160℃加热48 h便可扩孔至100 nm,但孔径不均匀。采用焙烧法扩孔时,通过调节焙烧温度、时间以及复盐LiCl-NaCl的加入量可以方便地控制扩孔速度与效果;在每10 g硅胶中加入1. 125 g LiCl·H2O和0. 75 g NaCl,于500℃焙烧3~5 h,可得到100 nm大孔硅胶;该方法简单、高效,扩孔后的硅胶孔径分布均匀,表面形态与商品化的Fuji-1000硅胶相似。将两种扩孔方式得到的硅胶经氨基修饰后,涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)制得了相应的手性固定相。结果表明,采用焙烧法扩孔得到的硅胶制备的固定相明显具有较好的分离选择性及分离度。

高效液相制备色谱降低B组分含量的林可霉素纯化工艺

为降低林可霉素B组分,本研究考察了高效液相制备色谱处理盐酸林可霉素工段中盐酸反萃液的工艺。通过对填料的筛选,上样液pH、上样量及洗脱条件的考察,确定了最终的色谱纯化工艺:LK-1为填料,上样液pH8.0,上样量10%,1倍柱体积水洗除组分B,3倍柱体积丙酮解析组分A。将丙酮解析液用盐酸调至pH2,结晶析出产品。纯化后,样品中B组分含量由约3%降低至0.5%以下。色谱分离收率大于90%,分离周期小于1h,该工艺应用于生产可高效地降低林可霉素B组分。