安徽地区猪传染性胸膜肺炎流行病学调查

为了解安徽地区猪传染性胸膜肺炎(PCP)的流行情况,本研究采用ApxIV-ELISA试剂盒对1 288份猪血清样品中胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染抗体进行检测,并采用PCR方法对573份母猪鼻腔棉拭子样品和92份屠宰生猪肺脏样品的APP核酸检测。结果显示,APP感染抗体总阳性率为26.40%,母猪/后备母猪/公猪APP感染抗体阳性率(45.47%)高于哺乳仔猪(28.02%)、保育猪(6.16%)、育肥猪(7.20%);夏季(41.42%)高于春季(29.75%)、秋季(26.35%)、冬季(19.26%);淮北地区(30.73%)和江淮地区(28.57%)高于皖南地区(13.77%);中型猪场(47.16%)高于大型猪场(19.28%)和小型猪场及散养户(23.15%);屠宰生猪肺脏样品APP核酸阳性率(11.96%)高于母猪鼻腔棉拭子(1.92%)。ELISA试剂盒与PCR同步检测的符合率为49.77%。表明PCP在安徽地区普遍存在,为引起猪呼吸道疾病综合征的主要原因之一。本研究结果为PCP的有效防控提供了现地调查依据。

家蝇在动物疫病传播中的作用研究概况

家蝇体内外携带有成千上万种微生物,这些微生物包括致病性微生物和非致病性微生物,诸多研究发现家蝇携带的病原微生物包括细菌、病毒、支原体、衣原体、寄生虫等,数量可达百种;这些病原微生物对家蝇本身并无危害,但是对人和动物却危害严重,甚至可以引起畜禽的死亡。论文通过概述家蝇的特性、体内外携带病原体种类与数量、传播病原的方式及引起的疾病类型等方面,了解家蝇在动物疫病传播过程中的地位,明确家蝇在动物疫病传播过程中起到不容忽视的作用,同时揭示了在畜禽饲养过程中消灭苍蝇是非常重要的一项举措,也是减少动物疫病传播的重要手段之一。

猪流行性腹泻病毒N基因重组真核质粒构建及其表达

为探明猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因编码的蛋白对PEDV感染早期诊断的作用,根据PEDV CV777株N基因全序列设计一对特异性引物以扩增N基因,定向插入到pPM-CHis真核表达载体中构建重组表达质粒pPM-C-His-N,将重组质粒肌肉注射昆明系小鼠,以检测其在小鼠体内的表达水平;将pPM-C-His-N转染至Vero细胞,分别在基因水平和蛋白水平对N基因的表达进行检测,并采用间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测N蛋白在细胞中的表达分布情况。结果表明,重组质粒在基因水平和蛋白水平均成功表达,免疫小鼠血清中抗体的效价为1∶51 200,Western-blot结果显示,免疫血清能与重组N蛋白发生特异性反应,说明实验成功构建了重组真核表达质粒pPM-C-His-N,且在Vero细胞内检测到了绿色荧光,为PEDV诊断方法的建立及致病机制的研究奠定基础。

赭曲霉毒素A的毒性作用及致毒机理研究进展

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一类免疫抑制类真菌毒素,主要由曲霉属和青霉属等产毒真菌产生。OTA作为食品和饲料原料的一种常见污染物,在各种粮食作物及其副产品中广泛存在,可对肾脏、肝脏、免疫器官、生殖系统等造成损伤,对动物和人类健康造成严重威胁,给畜牧养殖业带来巨大的经济损失。广泛存在的OTA可诱发机体产生肾毒性、肝毒性、免疫毒性、癌变畸变等,但其具体致毒机制目前尚不完全清楚。本文就国内外OTA研究情况进行归纳总结,为深入研究OTA对动物机能的毒性机制提供依据,为合理有效防控OTA损伤及保障畜禽健康养殖提供参考。

羊绒与羊毛的PCR-RFLP识别方法

羊绒价格昂贵,在销售中时常出现掺假现象,最常见的是用羊毛,因此精确识别羊绒和羊毛纤维的方法非常重要。本试验采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)的技术方法,利用提取的羊绒和羊毛线粒体基因组,根据细胞色素b(Cytochrome b)基因已知的DNA序列设计引物,通过内切酶SspⅠ进行酶切,得到不同的片段长度,根据酶切图谱鉴别羊绒和羊毛样品,用来进行羊绒掺假试验的定性检测。

猪鼻腔棉拭子中胸膜肺炎放线杆菌检测与分离方法的优化

为提高APP亚临床感染的核酸检出率和细菌分离率,通过检测3种PCR的敏感性和特异性,运用3种PCR方法分别检测母猪鼻腔棉拭子中APP核酸;并同时使用4种选择性培养基分离母猪鼻腔棉拭子中APP。结果显示,3种PCR的最低检测限度均为102 CFU,且除APP外与其他细菌不发生反应;dsb E-PCR方法的App核酸检出率(23.7%)显著高于oml A-PCR(8.1%)和Apx IVA-PCR(14.8%),三者符合率较高,分别为84.4%(dsb E/oml A-PCR)、91.1%(dsb E/Apx IVA-PCR)和93.3%(oml A/Apx IVA-PCR);m PPLO的APP分离率(11.9%)显著高于TSA(0.7%)、CA(5.2%)和BA(2.2%),四者符合率较高,分别为88.9%(m PPLO/TSA)、93.3%(m PPLO/CA)、90.37%(m PPLO/BA)、95.6%(TSA/CA)、98.5%(TSA/BA)和97.0%(CA/BA);dsb E-PCR检测结果与m PPLO分离结果的符合率较高(88.1%)。说明dsb E-PCR和m PPLO的检测分离效率最高,可综合2种方法,完善APP检测分离操作程序,为APP亚临床感染的诊断和治疗以及疫苗免疫提供科学依据。