肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用

目的:探讨丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用。 方法:采用ELISA和反转录-聚合酶链反应的方法检测了74例非霍奇金淋巴瘤患者外周血的抗-HCV抗体和HCVRNA;同时检测了110名健康献血员中抗-HCV抗体和HCVRNA。用ELISA方法检测了74例非霍奇金氏淋巴瘤患者和110名献血员。同时采用聚合酶链反应对于非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞中Bcl-2/J_H基因重排情况进行了检测。 结果:在74例非霍奇金氏淋巴瘤中的抗-HCV抗体阳性的为4例,阳性率为5.3％,HCVRNA阳性者为6例,阳性率为8.1％;110名健康献血员的抗-HCV抗体的阳性率为0.9％;HCVRNA阳性率为1.8％。非霍奇金淋巴瘤中的抗-HCV抗体阳性率较健康献血员显著增高,而HCVRNA的阳性率也较健康献血员有增高。经x^2检验P>0.05,无显著性差异。在74例非霍奇金淋巴瘤中HBsAg阳性者有3例(4％),而在献血员中为2名(1.7％)。在74例非霍奇金淋巴瘤中有18例外周血检测出Pcl-2/J_H基因重排,且转位均发生在Bcl-2的主要断裂点区域(MBR)。经x^2 test P<0.01,在非霍奇金淋巴瘤中Bcl-2/J_H基因重排和HCV感染有明显的相关性。 结论:HCV和HBV的感染与非霍奇金氏淋巴瘤的发生可能不存在一定的相关关系。

西安地区急性GBV.C/HGV感染者的分子流行病学及临床特征

目的:为了了解西安地区急性GBV-C/HGV感染者的分子流行病学及临床特征。 方法:连续收集急性病毒性肝炎病例458例,诊断符合上海会议标准。经EHSA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测HGVRNA,采用统一《急性病毒性肝炎调查表》,由专人负责进行临床和流行病学调查。所有数据用EPI软件处理。 结果:经ELISA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测有17例呈HGVRNA阳性,50为诊断不明患者。通过对17例HGVRNA阳性患者的流行病学分布所进行的分析表明HGV极易感染抵抗力较弱的儿童和老年人,26岁以下占88.23％,与同一人群同年龄乙肝、丙肝和丁肝患者相比,明显增多,经x^2检验有统计学意义(P<0.05)。而当HGV与HCV或HBV同时感染时,致病力增强,可以使各年龄段人群感染。同时我们可以看到HGVRNA阳性患者于冬春季有一明显的发病高峰,尤以冬季为明显。 结论:GBV-C/HGV并不是临床急性肝炎的主要致病因子。HGVRNA阳性患者在暴露因素、流行病学及临床特征等方面具有与其他各型肝炎相同或相似的特点。

陕西地区发现庚型肝炎病毒感染

陕西地区发现庚型肝炎病毒感染李如琳１徐德忠１阎永平１张景霞１董菁１谭文杰２夏宁邵２詹美云２（１第四军医大学流行病教研室西安７１００３３２中国预防医学科学院病毒学研究所）关键词庚型肝炎病毒套式ＰＣＲ中图号Ｒ５１２．６在我国病毒性肝炎患者中，约有１０％的...

从重症肝炎病人血清分离的丁型肝炎病毒核酶区的克隆与序列分析

从我国一例四川丁型肝炎病毒HDVRNA，丁型肝炎抗原均阳性的重症肝炎患者的血清中，用异硫氰酸胍法提取RNA经过逆转录PCR扩增后获得一长289bp的HDVcDNA片段，将PCR产物回收后直接克隆到PCRTMⅡ质粒，挑出阳性克隆并亚克隆入M13mp19的EcoRⅠ区位点，提取单链进行序列分析，结果显示与已知的中国河南、美国、日本、秘鲁和中国台湾5株HDVcDNA相同片段比较，同源性分别为对97.2％、93％、94％、79％、96％。

用逆转录套式PCR方法对西安地区HGV感染情况的调查

目的:为了了解庚型肝炎病毒(HGV)在我国的感染状况,得到一较好的HGV检测方法.方法:采用两对GBV-C(HGV)NS_3区引物,用逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-nested-PCR)和ELISA方法对67例非甲乙丙丁戊型急性肝炎患者血清进行了检测.结果:发现17例呈NGV RNA阳性,阳性率为25.4%,PCR与ELISA法进行抗-HGVIgG的检测的阳性符合率为18%,同时对HGV的检测方法进行讨论.结论:西安市急性肝炎患者中存在着一定程度的HGV感染.PCR特别是逆转录套式PCR方法在目前来说无疑是进行HGV检测特异性和灵敏度均较好的选择,可广泛用于临床和流行病学研究.

陕西株庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)RNA NS_3区cDNA(4248nt～4465nt)的扩增、克隆和序列分析

目的 了解陕西株庚型肝炎病毒 (HGV,RNA/ GBV-C)的核苷酸序列特点 .方法 从陕西省西安市两位非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎患者的血清中 ,应用反转录及套式 PCR技术 ,从血清中提取 RNA,经特异性的反转录引物 P4反转录成c DNA,以此为模板分别用 P3,P4及 P1 ,P2 两对引物进行PCR扩增 ,扩增到 2 18bp的 HGV RNA NS3区部分基因 ,将其克隆入 Pin Point TMXal- T载体 ,挑选阳性克隆并进行了序列分析 .结果 SG2 与 HGV的核苷酸同源性分别为 85 .6 4%与84.48% ;与 GBV- C的核苷酸同源性为 86 .2 1%与 84.48% ,其二者之间同源性为 97.13% ;二者与 HGV的氨基酸同源性分别为 98.2 8%和 93.10 % ,与 GBV- C的氨基酸同源性也为98.2 8% ,93.10 % ,二者之间的氨基酸同源性达 94.83% .结论 庚型肝炎病毒 NS3区核苷酸同源性较高 ,同义突变率也较高 ,可能是一个对其生存环境较为适应的病毒 .

西安和郑州地区丙型肝炎患者的HCV基因分型

目的 了解西安和郑州地区丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型 ,比较两地基因型分布的差异 .方法 采用限制性长度多态性分析 (RFL P)法对采自西安地区的 4 6份和郑州地区的 4 0份 HCVRNA阳性标本进行 HCV基因型分型研究 .结果 西安地区 4 6份标本中 ,2 5份 (5 4 .3% )为 1b型病毒 ,17份 (37.0 % )为 2 a型病毒 ,4份 (8.7% )为 1b/ 2 a混合型病毒 ;郑州地区 4 0份标本中 ,19份 (47.5 % )为 1b型 ,13份 (32 .5 % )为 2a型 ,3份 (7.5 % )为 1a型 ,4份 (10 .0 % )为 1b/ 2 a混合型病毒 ,1份 (2 .5 % )为 1a/ 1b混合型病毒 .结论 两地的优势株均为 HCV1b型 ,其次为 2 a型 ,郑州地区有

西安市459例急性病毒性肝炎住院患者血清学及流行病学调查

研究西安市急性散发性病毒性肝炎的分布情况.方法:以1993-10至1996-03连续收集的西安市散发性急性病毒性肝炎病例459例作为研究对象,进行血清学分型与流行病学研究.结果:甲肝(HA)占59.26%,乙肝(HB)占11.98%,丙肝(HC)占 6.10%,丁肝(HD)占3.70%,戊肝(HE)占4.36%,庚肝(HG)占3.70%,未能分型者占11.90%,结论;这表明在西安市急性病毒性肝炎中,HA为主要类型.此外,HA的发病年龄较其他各型肝炎为低,多发于秋冬季节,而其余各型肝炎则无明显的季节性.除HE外,各型肝炎均为男性多于女性.各型肝炎病毒的感染形式可以是单一型.亦可以是混合型或重叠型.

对现代具有指导意义的几个古代婴幼儿家庭教育原则

对现代具有指导意义的几个古代婴幼儿家庭教育原则李如琳经过几千年的历史发展，我国古代人民积累了许多成功的儿童教育经验，今天仍值得我们继承和借鉴。这些经验大致可以概括为以下几个基本原则：早教的原则；环境习染的原则；诚信无欺的原则；爱与教相结合的原则；均爱...

1株中国人HCV-2a型基因组部分cDNA序列的种系发生树分析

用反转录套式PCR(RT -PCR)法从陕西地区 1例NANB型肝炎患者血清中扩增出部分E区的cDNA片段 ,克隆于PGEM -T载体中用全自动序列分析仪进行双向测序 ,测得的序列以及已发表的同一分离株 5′NRC、C区序列 ,分别同Genbank中注册的 3 6株已知基因型的HCV相应区段的序列比较 ,构建种系发生树。结果 5′NCR区相应序列构建的种系发生树表明该分离株为 2型 ,而用C区和E区构建的种系发生树均表明该分离株为 2a型。提示该分离株为 2a型 ;对同一病原体来说 ,其基因区段的变异度不同 ,则种系发生树分析的结果不完全相同 ,变异度大的结果较准确。

Bcl-2/J_H基因重排与非霍奇金淋巴瘤的相关性及其相关因素

目的 :建立Bcl 2 /JH 基因重排的检测方法 ,调查分析Bcl 2 /JH 基因重排与非霍奇金淋巴瘤的相关性及其相关因素 .方法 :收集西安市非霍奇金淋巴瘤患者 74例的外周血单个核细胞 ,提取DNA后用PCR检测Bcl 2 /JH 基因重排 .根据Bcl 2 /JH 基因重排结果将患者分为重排组和非重排组 ,调查重排的可能危险因素 ,进行统计学处理 ;采用PCR检测了 74例非霍奇金患者血清中的HCVRNA .同时检测了献血员的HCVRNA和Bcl 2 /JH 基因重排 .结果 :74例非霍奇金淋巴瘤中有 1 8例外周血检测出Bcl 2 /JH 基因重排 ,且转位均发生在Bcl 2的主要断裂点区域 (MBR) ,HCVRNA阳性者为 6例 ,阳性率为 8.1 % .1 1 0例献血员中检测出 1例Bcl 2 /JH 基因重排 ,2例HCVRNA阳性 ,阳性率为 1 .8% .在非霍奇金淋巴瘤中Bcl 2 /JH 基因重排和HCV感染、农业暴露史有统计学关联(P <0 .0 1 ) .而与吸烟、肿瘤家族史没有关联 (P >0 .0 1 ) .结论 :Bcl 2 /JH 基因重排与非霍奇金淋巴瘤的发生具有一定的病因学联系 ;HCV感染与非霍奇金淋巴瘤Bcl 2 /JH

西安市急性病毒性庚型肝炎危险因素的病例对照研究

为了探讨庚型肝炎的危险因素，调查了西安市五家医院的急性散发性病毒性庚型肝炎患者１７例以及按年龄、性别等齐同原则配比的医院对照６８例，进行１∶４配比病例对照研究。结果发现：无论是单因素分析还是多因素条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，输血史、住院史都是庚型肝炎重要的危险因素。手术史也可能与庚型肝炎感染有关，而肝炎接触史、不洁饮食史、注射史、针灸史等因素则未发现与庚型肝炎的传播有关。

我国部分地区丙型肝炎病毒5′端部分基因序列的比较

目的 :测定我国部分地区丙型肝炎病毒 (HCV)分离株的 5′端部分cDNA序列 ,研究其基因型以及变异特点 ,为丙型肝炎的治疗和预后判断提供参考依据。方法 :用反转录套式聚合酶链反应 (RT -nPCR)法和 5′NCR区引物对我国部分地区 9株HCVRNA阳性血清进行扩增 ,扩增产物为 2 56bp ,将其纯化连接到PGEM -T载体上 ,然后进行测序 ,并与已发表的 50株HCV全序列的相应序列比较 ,并用种系发生法分析。结果 :该 9株HCV5′NCR核苷酸序列的同源性为93.0 %～ 99.6% ,其中 7株之间的同源性为 98.8%～ 99.6% ,另两株为 99.6%。同其它 50株同源性比较结果提示 ,7株属 1b型 ,2株属 2a型 ,种系发生法分析也支持这一结果。变异分析结果表明 ,同一亚型的核苷酸变异特点相似。结论 :该 9株HCV分离株分属 1b型和 2a型 ,该区同源性较高 ,但同一亚型的核苷酸变异特点相似。

HSV-TK2重组TNF-α融合基因表达载体的构建及在肝细胞癌细胞中的瞬时表达

目的：构建双特异性细胞因子融合基因表达载体及在肝细胞癌细胞中瞬时表达。方法：应用PCR方法对各目的基因进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序后，以逆转录病毒载体pLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因TK-TNF-α，并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRl和BamHl位点间，成功地构建表达载体pEGFP-TK-TNF-α仅，并在该载体转染人肝细胞癌细胞HCC9204后观察融合蛋白表达情况。结果：酶切鉴定证实TK-TNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRl和BamHl位点问，并在转染人肝细胞癌细胞7901中观察到TK-TNF-α融合基因绿色荧光蛋白的表达。结论：pEGFP-TK-TNF-α表达载体便于观察转染细胞中融合蛋白的表达情况及蛋白定位，为双特异细胞因子基因疗法提供有利条件。