以腹部不适为表现的蛔虫感染1例

1临床资料患者,女,76岁,农民,家属陪同来吉林大学中日联医院体检中心体检,接诊医生经询问了解到患者因两天前出现腹痛,于当地医院就诊后,未见明显缓解,检查发现患者左侧腹部有压痛,无反跳痛,经胃肠结直肠外科医生会诊,以“腹痛待查”收入院。既往阑尾切除术后20年,富马酸喹硫平片服用史近10年。

siRNA沉默USP22基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨小干扰RNA(si RNA)沉默泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)对胶质瘤细胞增殖的影响和作用机制。方法合成USP22 si RNA及阴性对照si RNA(control si RNA),用脂质体Lipofectamine 2000转染至人胶质瘤U87和U251细胞,分别设为实验组和阴性对照组。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测两组胶质瘤细胞USP22 mRNA和蛋白表达水平的变化。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测USP22 si RNA对两组胶质瘤细胞的增殖抑制率。流式细胞术定量检测USP22 si RNA对胶质瘤细胞凋亡及细胞周期分布的影响。Western blot检测胶质瘤细胞凋亡蛋白和周期调控蛋白的表达。结果与阴性对照组比较,实验组胶质瘤细胞中USP22 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),凋亡率明显上升(P<0.05),细胞周期中G2/M期的细胞比例明显增高(P<0.05)。Western blot结果显示:细胞凋亡蛋白Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9表达明显下降(P<0.05);细胞周期蛋白CDK1、CDK2、Cyclin B1表达水平明显下降(P<0.05),Cyclin D1表达水平无明显变化(P>0.05)。结论 USP22基因在胶质瘤细胞的增殖中发挥重要作用,其机制可能为调节细胞凋亡和细胞周期。

siRNA沉默HOTAIR表达对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)基因对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法首先利用荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HOTAIR在人胶质瘤细胞A172和正常星形胶质细胞HA1800中的表达。然后合成si-HOTAIR,用Lipofectamine 2000转染至A172细胞,同时设立阴性对照(negative control,NC)和空白对照(Blank),qRT-PCR检测转染效率。分别采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell侵袭实验检测下调HOTAIR表达对人胶质瘤细胞A172增殖、周期及侵袭的影响。结果 qRT-PCR结果显示,HOTAIR mRNA在A172和HA1800中的相对表达量分别为1.12±0.08和2.67±0.03(P<0.01)。转染siHOTAIR 24h、48h及72h后,A172细胞中HOTAIR表达水平分别下降(38.27±3.52)%、(70.16±0.57)%和(81.54±0.41)%(P<0.01)。MTT结果显示转染si-HOTAIR 48h和72h后,A172细胞的增殖率分别下降(17.38±0.39)%(P<0.05)和(30.54±1.22)%(P<0.01)。流式细胞术显示下调HOTAIR表达能够阻滞A172细胞从G0/G1期向S期转换。Transwell实验结果显示si-HOTAIR组A172细胞穿膜细胞数为36.1±1.5,显著低于NC组的76.8±2.4(P<0.01),降低HOTAIR表达水平能够降低A172细胞的侵袭能力。结论下调HOTAIR表达能够抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭能力,HOTAIR有望成为胶质瘤基因治疗的潜在靶点。

微小RNA miR-148b-3p在人胶质瘤细胞中的表达及意义

目的检测微小RNA(microRNA,miR)-148b-3p在人胶质瘤细胞中的表达水平,并探讨其对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测胶质瘤细胞A172和正常星形胶质细胞HA1800中miR-148b-3p的表达水平。合成miR-148b-3p mimics及阴性对照(NC),用Lipofectamine 2000将miR-148b-3p mimics和NC转染至人胶质瘤细胞A172。分别采用噻唑蓝(MTT)法、Transwell实验、流式细胞术检测转染miR-148b-3p mimics对胶质瘤细胞A172增殖、侵袭及细胞周期的影响。结果 miR-148b-3p在胶质瘤细胞A172中的相对表达量为0.27±0.06,显著低于在正常星形胶质细胞HA1800中的相对表达量1.16±0.21(P<0.01)。MTT检测到miR-148b-3p mimics组A172细胞增殖率在转染后显著降低,转染24h、48h及72h后,细胞增殖率分别下降(12.33±0.46)%、(18.35±0.64)%和(30.54±1.22)%。Transwell实验结果显示miR-148b-3p mimics组A172细胞穿膜细胞数为23.1±1.8,显著低于NC组的87.1±4.6(P<0.01),miR-148b-3p mimics能够抑制A172细胞的侵袭能力。流式细胞术结果显示miR-148b-3p mimics显著阻滞A172细胞从G0/G1期向S期转换。结论 miR-148b-3p在胶质瘤细胞中低表达,miR-148b-3p在胶质瘤细胞中发挥抑制肿瘤增殖和侵袭的作用。

Bcl-x mRNA前体剪接转换寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨Bcl-x mRNA前体剪接转换寡核苷酸(Bcl-x splice-switching oligonucleotides,Bcl-x SSO)对胶质瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响。方法:设计靶向Bcl-x基因下游选择性5'端剪接位点的Bcl-x SSO,β-globin SSO作为阴性对照SSO。SSO经2'-甲氧乙基(2'-O-methoxyethyl,MOE)、全硫代磷酸化(phosphorothioate,PS)修饰。采用阳离子脂质体将不同的SSO转染至U251细胞。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测Bcl-x SSO对U251细胞的增殖抑制率。流式细胞术定量检测U251细胞的凋亡率。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS mRNA表达水平的影响,Western blot方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示Bcl-x SSO显著抑制U251细胞的增殖,且抑制作用呈剂量依赖性。流式细胞术检测Bcl-x SSO能够明显促进U251细胞凋亡。RT-PCR检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL mRNA表达水平下降,Bcl-xS mRNA表达水平升高。Western blot检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL蛋白表达水平下降,Bcl-xS蛋白表达水平升高。结论:在胶质瘤细胞U251中,Bcl-x SSO可特异性的作用于Bcl-x mRNA前体,调节其选择性剪接模式从Bcl-xL转换至Bcl-xS,进而促进U251细胞凋亡。

胶质瘤细胞中ADAR2 mRNA前体选择性剪接模式的分析

目的:比较胶质瘤细胞U87、U251、A172和正常星形胶质细胞HA1800中ADAR2 mRNA前体选择性剪接模式的差异。方法:RFPCR产物测序检测胶质瘤细胞和正常胶质细胞中GluR2 Q/R位点的A-to-I编辑水平。根据前期研究鉴定出的选择性剪接位点设计特异性引物,RT-PCR方法检测胶质瘤细胞U87、U251、A172和正常星形胶质细胞HA1800中不同剪接转录本的相对表达量,比较胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中ADAR2 mRNA前体剪接模式的差异。结果:胶质瘤细胞中GluR2 Q/R位点的A-to-I编辑水平明显下降。RT-PCR检测到在胶质瘤细胞中,Exon 1a(+)/1a(-)、Exon 2(+)/2(-)的比值在胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中无显著性差异。Exon 5a(+)/5a(-)的比值明显高于正常星形胶质细胞HA1800。结论:Exon 5a位点的剪接在胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中有显著性差异,Exon 5a(+)转录本的表达增加可能是导致胶质瘤细胞中ADAR2编辑活性下降的原因。

持续负压引流技术在四肢重症创伤患者中应用的护理研究

目的:探究持续负压引流技术在四肢重症创伤患者中应用的护理研究。方法:利用多年临床治疗及护理经验为患者制定合理的护理计划。结果:所有患者均对护理表示满意。结论:治疗四肢重症创伤患者时持续负压引流技术的效果显著,针对性护理也是其成功的重要保障。

姜黄素诱导人胶质瘤细胞A172凋亡及其对人c-myc癌基因产物表达的影响

姜黄素是从姜黄中提取的一种植物多酚,可通过多种途径发挥抗肿瘤作用,且能够通过血脑屏障[1].本研究旨在观察姜黄素对胶质瘤细胞株A172的凋亡诱导作用,并探讨其作用机制.一、材料与方法1.细胞培养：人胶质瘤细胞株A172和人星形胶质细胞HA 1800均购自中国科学院上海细胞所.培养于含10％灭活胎牛血清、青霉素100 IU/ml、链霉素100 mg/L的1640培养基中,在37℃、5％ CO2的培养箱中培养.