土拉弗朗西斯氏菌LAMP快速检测方法的应用

旨在应用环介导恒温扩增技术(LAMP)检测土拉弗朗西斯氏菌。针对土拉弗朗西斯氏的FopA基因设计LAMP引物,优化LAMP反应条件,并对其特异性、灵敏度进行评价。结果显示,(1)对12种细菌和蜱的DNA(含大量假单胞菌属细菌)进行LAMP扩增,仅土拉弗朗西斯氏菌发生了扩增反应;(2)土拉弗朗西斯氏菌纯培养物检出限为4.9×102 pg/mL;克隆株质粒检出限为10 copies/μL,低于普通PCR的最低检出值1×103 copies/μL;(3)土壤模拟样本检出限为44 CFU/g;(4)和进口荧光定量PCR试剂对比检测24份(8个稀释度)土拉弗朗西斯氏菌污染土壤样本,在灵敏度范围内,均能准确检测。LAMP技术检测土拉弗朗西斯氏菌特异性强、灵敏度高、高效,对土拉热的病原学诊断具有应用价值。

实时荧光环介导等温扩增技术检测土壤中的类鼻疽伯克霍尔德菌

目的结合荧光染料EvaGreen与环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)探索快速检测类鼻疽伯克霍尔德菌的可行性。方法根据类鼻疽伯克霍尔德菌filc基因片段设计了LAMP引物,利用荧光染料EvaGreen建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RealAmp),优化反应条件,扩增产物经电泳鉴定。通过类鼻疽伯克霍尔德菌和其他致病菌验证特异性,比较RealAmp与普通LAMP技术的敏感度,并测定人工污染土壤模拟样本的检出限。结果恒温63℃条件下,20～60 min即可完成RealAmp检测;利用该方法检测类鼻疽伯克霍尔德菌为阳性,其余致病菌如鼠疫杆菌、布鲁氏杆菌、大肠杆菌等13株参考菌株及蜱虫的DNA(含大量假单胞菌属细菌)呈扩增阴性;RealAmp技术检测类鼻疽伯克霍尔德菌核酸的灵敏度为10~2 CFU/mL,检测克隆株质粒的灵敏度可达10~1 copies/μL,比普通LAMP技术的灵敏度高10倍;人工污染土壤模拟样本RealAmp的检出限为4.4×10~1 CFU/g,且20 min左右即可判定结果;直接检测24份浓度为4.4×10~1 CFU/g～4.4×10~8 CFU/g的类鼻疽伯克霍尔德菌人工污染土壤样本,在检出限以上,检出率同荧光定量PCR一致。结论该方法特异性强、灵敏度高,且可实时监测类鼻疽伯克霍尔德菌,有望成为快速检测类鼻疽伯克霍尔德菌的有效方法,增强抵御生物恐怖战争的能力。

基于AE模型的县域生态敏感性评价——以甘肃省靖远县为例

为探究不同土地利用类型下各因子对县域尺度生态敏感性客观评价结果的非线性关系,以甘肃省靖远县为研究对象,构建基于土地利用类型的二阶指标体系,建立自编码器模型对其展开评价,并采用沙普利加性解释模型结果,分析各栅格敏感性首要影响因素,以此为基础划分敏感性分区。结果表明,1)极高、高敏感区主要分布在靖远县哈思山、崛吴山、南部沟壑区与沿河区域,占20.40%,中、低、不敏感区分别占40.10%、39.00%、0.50%。2)林地的敏感性等级极高,主要受NDVI影响;草、耕用地敏感性在较平缓区域(坡度<10°)受距水距离影响,在较陡峭区域(坡度>10°)受坡向和高程影响。AE模型评价结果能够探索出评价因子与敏感性更深层的关系并能更好地表现其地理空间的分异规律。

7049A铝合金锻件T6状态热处理工艺制度研究

采用正交设计试验,研究了7049A铝合金锻件淬火温度、时效温度及时间等工艺参数对其性能的影响,制定了T6状态的热处理工艺制度,为工业化生产提供了依据。

抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的采用扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)的合成多肽为免疫原制备鼠源单克隆抗体,并用4种埃博拉流行株核蛋白基因的真核表达蛋白对制备的单克隆抗体进行特异性分析。方法用人工合成的扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白多肽免疫动物,进行细胞融合后筛选阳性杂交瘤细胞。构建埃博拉病毒4种亚型的真核表达载体转染HEK293T细胞以表达目的蛋白,再以真核表达蛋白为抗原,用免疫印迹方法分析扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的特异性。结果完成了抗扎伊尔型单克隆抗体的制备,共得到能分泌抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞12株,小鼠腹水抗体效价介于1∶104~1∶105,其中3株杂交瘤细胞株分泌的抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体与其他3种亚型无交叉反应,抗体效价高、特异性好。结论成功制备抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体,为建立快速检测埃博拉病毒的方法奠定基础。

不同电子束辐照处理对传统镇巴腊肉品质的影响

为研究电子束辐照对传统镇巴腊肉品质的影响,对不同剂量(0~8 kGy)电子束辐照处理的腊肉进行测定。结果表明:电子束辐照处理能减少腊肉中的菌落总数,随着辐照剂量的增大,腊肉的硬度降低,过氧化值、蛋白羰基含量逐渐增加,过氧化值、蛋白羰基含量在8 kGy剂量下达到最高,分别为0.047 g/100 mg、3.84 nmol/mg;2 kGy剂量组的腊肉在有效降低菌落总数的同时,也较好维持了腊肉的色泽、质构、脂肪及蛋白氧化程度,品质较优;电子鼻测定结果表明,2 kGy剂量组与对照组腊肉的总体风味较为接近,与感官评价结果一致。综合考虑,2 kGy是电子束辐照传统镇巴腊肉的适宜剂量。

花青素共价交联大豆蛋白对其表面疏水性及功能性的影响

为了研究在不同共价交联条件(生物酶法和化学碱法)下,花青素对大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)的表面疏水性与功能特性的影响。采用荧光探针表征SPI交联花青素后表面疏水性的变化,采用起泡性、乳化性、粒径分析及ζ-电位分析等指标研究花青素对SPI功能性质的影响。结果表明,SPI与花青素共价交联后其表面疏水性显著下降(p<0.05),且添加的花青素浓度与SPI的表面疏水性成反比。尤其是花青素浓度为0.05%时,相较于SPI,酶法和碱法交联的花青素-SPI共价复合物(LC3和AC3)表面疏水性分别减少了87.71%和82.71%;花青素的添加使SPI的起泡性能和乳化性能得以改善,当添加相同浓度的花青素时,生物酶法比化学碱法的改善效果更明显;SPI与花青素交联后提高了ζ-电位的绝对值,使溶液液滴粒径分布更加均匀,溶液的稳定性更强,尤其LC3的ζ-电位绝对值比SPI和AC3分别高了64.35%和10.98%。

东风水电站岩溶洞穴的勘探与防渗帷幕线路的选择

一、前言东风水电站位于乌江上游可溶岩峡谷区,岩溶发育。这是影响电站能否兴建的关键性问题。为此,必须查明岩溶的发育规律及其相互关系,以便确定相应的处理方案。

我国肉鸡加工业的现状与发展建议

近年来,我国肉鸡产业飞速发展,规模不断扩大,稳居世界生产量第二位,同时由于鸡肉高蛋白、低脂肪、低胆固醇及低热量的营养特性深受消费者喜爱,成为了继猪肉之后我国消费量为第二大的品类。但由于我国肉鸡加工行业起步较晚,产业化程度不高,与世界先进水平还有一定差距,在生产与加工方面还存在一些问题。为了促进我国肉鸡生产加工产业的进步,本文主要概述了我国肉鸡生产及鸡肉加工产品现状,分析了鸡肉加工新技术研究趋势,并对我国肉鸡加工业存在的问题及发展方向进行了分析和总结。

我国肉鸡加工业研究

肉鸡作为一种高蛋白、低脂肪、低能量和低胆固醇的肉制品,在我国拥有很大的消费市场。但由于我国肉鸡加工行业起步较晚,因此在工艺和技术上还有很大的进步空间。从我国肉鸡的加工产业着手分析,介绍了肉鸡的宰前管理、初加工以及深加工;此外,还介绍了肉鸡加工的新技术和肉鸡副产品的开发与利用,并对我国肉鸡加工业未来发展趋势进行了展望。

祝贺信

值此校庆三十周年之际,让我们向母校——长江工程大学、向我们敬爱的林一山校长,向培育了我们、付出了辛勤劳动的老师们以衷心的祝贺和感谢,向遍布在祖国各地、正为祖国的“四化”做出贡献的学友们表达我们深深的怀念之情.

无人机倾斜摄影在老旧小区改造设计中的应用研究

随着社会的发展,老旧小区建筑物出现配套功能不完善,公共设施落后,存在大量消防、燃气、电路隐患等问题。因此进行老旧小区改造提升十分有必要,同时也是实施城市景观改善主要内容之一。本文以西安市某高校老旧学生公寓改造为案例,具体介绍了无人机倾斜摄影技术在老旧小区改造中的应用方法。总结了目前老旧小区改造中遇到的部分难以解决的问题,提出尝试使用无人机倾斜摄影技术解决这些问题的新思路。

北京市丰台区孕妇妊娠期运动知识认知情况的调查

目的：了解丰台区孕妇对妊娠期运动的认知情况，通过护理干预后提高孕妇对妊娠期运动重要性的认知，增强孕妇的自我保健意识，为进一步指导孕妇孕期进行科学健康运动提供依据。方法采用便利抽样的方法，选取2013年6-7月在北京市丰台区妇幼保健院产科门诊建档的孕晚期（≥28周）孕妇117名，采用自行设计的妊娠期运动相关知识问卷对孕妇认知情况进行调查。结果117名孕妇妊娠期运动知识得分为0-15分，平均（8．99±1．41）分，平均正确认知率为60．3％；仅13．68％的孕妇经过正规的孕期运动相关知识培训，86．32％的孕妇表示没有参加过相关知识的培训。结论应重视低文化程度孕妇的培训，考虑孕妇的学习与接受能力，进行弹性教学，以取得更好的教学效果。

两步PCR介导的Red重组技术快速敲除鼠疫耶尔森菌sRNA及染色体大片段

【目的】利用Red同源重组系统,通过二步PCR法建立一种适合鼠疫耶尔森菌s RNA和大片段染色体基因敲除的方法。【方法】第一步PCR先扩增出目的基因的上、下游同源臂(600–1000 bp)及卡那抗性盒,再以上、下游同源臂及卡那抗性盒等摩尔混合物为模板,通过融合PCR获得含上下游同源臂及卡那抗性盒的线性突变盒,再将此突变盒的PCR产物电转到含有pKD46质粒的鼠疫201菌株,在阿拉伯糖的诱导下,p KD46质粒表达Red重组酶,促使卡那抗性盒替换目的基因,最后对获得的重组克隆进行PCR鉴定。【结果】本研究通过两步PCR法构建600–1000 bp的同源臂,提高了同源重组效率,并将鼠疫菌sRNA RyhB1(108 bp)和RyhB2(106 bp)和染色体大片段47-2(10.4 kb)、47-3(21.6 kb)、47-3a(9.2 kb)及47-3b(6.1 kb)成功敲除。【结论】基于Red重组系统构建的二步法突变技术,是一种简单、高效的精确修饰鼠疫菌s RNA及大片段染色体的方法,适合于鼠疫菌全基因组的基因敲除,为鼠疫菌基因表达与调控、致病和毒力等研究提供有力的工具。