水溶性番茄浓缩物经自噬途径调控血小板的氧化损伤

【目的】过度氧化应激可促进血小板氧化损伤,从而加快心血管疾病的发生发展。水溶性番茄浓缩物(Fruitflow)具有抑制血小板聚集、活化的作用,但是否通过自噬减轻血小板氧化损伤仍未见报道。本研究拟通过体外实验探讨Fruitflow对过氧化氢(H_(2)O_(2))导致的血小板氧化损伤的影响及其潜在机制。【方法】用不同剂量的Fruitflow(0、20、40、80 mg/L)与纯化血小板预孵育30 min,随后加入H_(2)O_(2)共孵育60 min。用流式细胞术测定线粒体膜电位(ΔΨm)去极化的水平;用酶标仪测定活性氧(ROS)生成水平;用Western blot测定p53、phospho-p53、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达水平。【结果】Fruitflow显著减轻H_(2)O_(2)导致的血小板ΔΨm去极化(P<0.05),ROS生成和p53磷酸化(P<0.05)。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)可以显著逆转Fruitflow对H_(2)O_(2)处理血小板ROS生成的抑制作用(P<0.05)。Fruitflow可以降低静息血小板p62的表达、升高LC3Ⅱ/Ⅰ的比例(P<0.05),也显著升高H_(2)O_(2)处理的血小板LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平(P<0.05)。此外,3-MA显著逆转Fruitflow降低H_(2)O_(2)处理的血小板ΔΨm去极化的作用(P<0.05)。【结论】Fruitflow可在体外通过促进血小板自噬,显著减轻H_(2)O_(2)导致的血小板氧化损伤。