‘玛瑙红’樱桃生长素响应因子CpARF7基因克隆及表达分析

以‘玛瑙红’樱桃根系为试材,采用RT-PCR技术,克隆了‘玛瑙红’樱桃CpARF7基因,并对其进行生物信息学分析和表达分析,以期为进一步研究‘玛瑙红’樱桃CpARF7基因调控及生长发育提供参考依据。结果表明:CpARF7的开放阅读框为3498 bp,编码1165个氨基酸,包含B3、Auxin-resp和AUXIAA 3个结构域,是结构域完整的ARF转录因子;系统进化树分析表明CpARF7与甜樱桃同源蛋白的亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,CpARF7基因在不同组织中均有表达,且在根、花芽、成熟果实组织中的表达量最高;200 mg·L^(-1)IAA处理下,CpARF7在花芽中的转录水平受到诱导,6、24 h时最高;而在200 mg·L^(-1)ABA处理下,花芽中CpARF7转录水平受到抑制。推测CpARF7可能是与‘玛瑙红’樱桃根系、花芽、果实生长发育相关的转录因子,参与调控‘玛瑙红’樱桃IAA、ABA激素信号转导的过程。

樱桃查尔酮合成酶CpCHS2基因的克隆及序列分析

查尔酮合成酶基因是类黄酮生物合成的关键基因,本文通过巢氏PCR,从‘玛瑙红’樱桃的根系组织中克隆获得一个1176 bp的查尔酮合成酶基因的cDNA序列,编码391个氨基酸,命名为CpCHS2(基因登录号:MT112906)。该基因编码的蛋白分子量为42.68 kD,等电点为5.76,属疏水性蛋白且不具有跨膜区,主要定位在细胞质中,二级结构中α-螺旋、β-折叠为蛋白质最大量的结构原件。系统进化树分析表明,CpCHS2和同属蔷薇科的红叶李及碧桃的亲缘关系最近,并在进化上高度保守。

西藏虎头兰花香成分分析

以盛花期的西藏虎头兰花为试材,采用手动固相微萃取(SPME)结合气相色谱一质谱联用(GC-MS)技术测定其一天内不同时间及不同花器官释放的花香成分及其相对含量。一天中三个时间点10∶00、14∶00和18∶00的西藏虎头兰花香分别鉴定出88种、87种和83种化合物,在花器官花瓣、唇瓣和合蕊柱中分别鉴定出72种、66种和62种化合物;包括醛类、醇类、酮类、酯类、萜烯类、烷烃类、醚类、呋喃类、酚类和芳香族十类化合物。全花花香成分主要是α-蒎烯,松萜和对甲酚;花瓣主要花香成分α-蒎烯,松萜和β-蒎烯;唇瓣主要花香成分对甲酚、α-蒎烯,松萜;合蕊柱主要花香成分对甲酚、己醛、1-己醇。结果表明,西藏虎头兰一天内不同时间段花香成分种类逐渐减少;花器官花香成分从合蕊柱向花瓣种类逐渐增加,说明其主要香气释放部位为花瓣;在不同时间段及花器官中,萜烯类物质、醇类物质和酯类物质无论种类数量还是相对含量都占有很大比重,说明萜烯类物质、醇类物质和酯类物质是西藏虎头兰花香的主要组成成分。

中国樱桃‘玛瑙红’CpCHS1基因的克隆与表达分析

以‘玛瑙红’樱桃根系组织为试材,采用PCR(RT-PCR)技术对CpCHS1基因进行克隆,并对其序列进行生物信息学分析及表达分析,研究了该基因在植株不同组织中及在逆境处理下的表达情况,以期为后续深入解析该基因在逆境胁迫中功能提供参考依据。结果表明:‘玛瑙红’樱桃CpCHS1全长1227 bp,编码408个氨基酸。相对分子质量为44.6 kD,理论等电点(pI)为6.53;无跨膜结构域,且为稳定的亲水性蛋白;蛋白信号肽预测为非分泌蛋白;二级结构包括α-螺旋及无规则卷曲等;多序列比对表明,CpCHS1与水蜜桃(Prunus persica)亲缘关系最近,相似度为100%。荧光定量PCR结果表明,CpCHS1在根中的表达量最高,其次是果、叶;在干旱、高盐、低温和高温等胁迫处理下CpCHS1表达量出现显著变化。综上所述,‘玛瑙红’樱桃CpCHS1在根系中表达量最高,且在胁迫处理下显著响应逆境胁迫,推测CpCHS1可能与植株抗性有着密切联系。