Tubastatin A Hcl对慢性支气管哮喘小鼠的治疗作用

目的探讨组蛋白去乙酰化酶6抑制剂(Tubastatin A Hcl)对慢性支气管哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和气道高反应的影响。方法将BALB/C小鼠分为正常组、哮喘组、地塞米松组和Tubastatin A Hcl组。测定气道阻力,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和分类细胞数,ELISA检测白细胞介素(IL)4、IL-5和转化生长因子(TGF)β1。HE、AB-PAS和Masson染色观察气道炎症、气道重塑。免疫组化和Western blotting测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1表达。结果药物治疗后气道阻力降低,BALF中IL-4、IL-5和TGF-β1表达下降,炎症细胞总数和嗜酸性粒细胞数减少;肺组织气道周围炎症减轻,杯状细胞化生降低,胶原沉积减少,且地塞米松治疗效果优于Tubastatin A Hcl。药物治疗后肺组织中α-SMA和TGF-β1表达下降,且Tubastatin A Hcl治疗效果略优于地塞米松。结论 Tubastatin A Hcl能够有效缓解慢性支气管哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和气道高反应,其抗炎效果略差于激素,但在抗气道重塑方面略优于激素治疗。

慢性哮喘小鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶8表达和活性增加

目的探讨组蛋白去乙酰化酶8(histone deacetylase 8, HDAC8)在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达和活性变化。方法 BALB/C小鼠分为正常组和哮喘组,12只/组。卵蛋白OVA致敏激发方法构建慢性哮喘模型。末次激发试验24h后,收集各组小鼠肺组织标本,免疫组织化学检测HDAC8在肺组织中的表达,Western blot分析HDAC8水平变化,荧光法检测HDAC8酶活性的变化。结果与正常小鼠相比,哮喘小鼠肺组织HDAC8水平和酶活性均显著升高;在正常小鼠肺组织细胞中HDAC8表达极少,哮喘致病时气道上皮细胞、上皮下炎症细胞、血管平滑肌细胞和肺泡腔炎症细胞中HDAC8呈明显阳性表达。结论哮喘致病时肺组织及其中炎性细胞内HDAC8表达表达水平和酶活性增高提示HDAC8可能参与哮喘气道炎症、气道重塑和气道高反应的发生。

HDAC8抑制剂PCI-34051对慢性支气管哮喘小鼠的治疗作用

目的探讨组蛋白去乙酰化酶8抑制剂PCI-34051对慢性哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和气道高反应的治疗作用。方法 BALB/C小鼠分为正常组、哮喘组、地塞米松组和PCI-34051组。测定气道阻力,BALF细胞计数和分类计数,ELISA检测IL-4、IL-5、TGF-β1和IFN-γ。HE染色观察气道炎症,AB-PAS和Masson染色测定气道重塑。Western blot测定α-SMA和TGF-β1表达。结果与哮喘组比,地塞米松组和PCI-34051组气道阻力降低,BALF中炎性细胞总数和嗜酸性粒细胞减少,IL-4、IL-5、TGF-β1表达下降。地塞米松组和PCI-34051组HE染色气道周围炎症减轻,气道平滑肌增厚减弱;AB-PAS染色杯状细胞化生减轻;Masson染色面积减少。Western blot发现地塞米松组和PCI-34051组TGF-β1表达下降,但α-SMA降低不明显。结论 PCI-34051能够缓解慢性哮喘气道炎症、气道高反应和气道重塑。

组蛋白去乙酰化酶6在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达形态

目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达形态变化。方法将BALB/C小鼠分为正常组和哮喘组,每组12只。应用卵蛋白致敏激发方法构建慢性哮喘模型。末次激发试验24 h后,收集各组小鼠肺组织标本。采用免疫组化方法检测HDAC6在肺组织中的表达定位,采用Western blotting定量分析肺组织中HDAC6表达水平的变化,采用比色法检测HDAC6酶活性的变化。结果与正常组相比,哮喘组小鼠肺组织HDAC6的表达水平和酶活性均显著升高(P<0.05);正常组小鼠肺组织结构细胞中HDAC6表达极少,哮喘组肺组织气道上皮细胞、气道血管周围炎症细胞、平滑肌细胞以及肺泡腔炎症细胞中HDAC6呈明显阳性表达。结论哮喘致病时肺组织中HDAC6的表达定位、表达水平和酶活性均发生不同程度改变。

百令胶囊对支气管哮喘小鼠的治疗效果

目的探讨百令胶囊对支气管哮喘小鼠气道炎症、气道高反应和气道重塑的治疗效果。方法将48只雌性Balb/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、支气管哮喘组、布地奈德组、低剂量百令胶囊组、中剂量百令胶囊组、高剂量百令胶囊组,每组8只。测定各组小鼠的气道阻力,计数小鼠肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数。HE、AB-PAS和Masson染色观察气道炎症、气道重塑。采用免疫组化染色评估各组小鼠肺组织内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平。结果与支气管哮喘组相比,布地奈德组、低剂量百令胶囊组、中剂量百令胶囊组、高剂量百令胶囊组小鼠气道高反应、BALF中炎症细胞总数均降低(P<0.05);肺组织气道周围炎症减轻,杯状细胞化生降低,胶原沉积减少;α-SMA表达水平降低。低剂量百令胶囊组、中剂量百令胶囊组、高剂量百令胶囊组与布地奈德组比较,气道反应性无统计学差异(P>0.05)。除气道反应性外,布地奈德组上述指标均优于低剂量百令胶囊组、中剂量百令胶囊组、高剂量百令胶囊组。结论百令胶囊可以抑制哮喘小鼠气道炎症、气道高反应和气道重塑。

老年上气道咳嗽综合征诊治进展

上气道咳嗽综合征(UACS)又称鼻后滴流综合征,是指由于鼻部疾病引起分泌物倒流鼻后和咽喉等部位,直接或间接刺激咳嗽感受器,导致以咳嗽为主要表现的临床综合征[1]。2006年,美国咳嗽诊治指南建议用UACS替代鼻后滴流综合征[2]。UACS是引起慢性咳嗽最常见的病因之一,其基础疾病以鼻炎、鼻窦炎为主。

慢性哮喘小鼠肺组织中组蛋白乙酰化修饰位点H2BK16ac表达增强

目的探讨组蛋白乙酰化修饰位点H2BK16a在慢性哮喘模型小鼠肺组织中的表达变化。方法BALB/C小鼠分为正常组和慢性哮喘组,应用卵蛋白致敏和激发方法构建慢性哮喘模型,HE染色观察气道炎症浸润,AB-PAS染色观察气道杯状细胞增生,Masson染色观察上皮下胶原沉积,免疫组织化学染色观察H2BK16ac在肺组织中的表达分布,Western blot检测肺组织中H2BK16ac水平。结果慢性哮喘小鼠气道血管周围可见大量炎症细胞浸润、气道纤毛柱状上皮细胞中的杯状细胞增生、黏液腺化生、上皮下胶原沉积,表明构建慢性哮喘模型成功。免疫组织化学染色和Western blot检测显示,正常小鼠肺组织中H2BK16ac的表达极少;慢性哮喘小鼠肺组织中H2BK16ac的表达水平显著升高,在气道纤毛柱状上皮细胞、气道血管周围炎症细胞、血管平滑肌细胞、肺泡腔炎症细胞中H2BK16ac均呈明显阳性表达。结论肺组织中乙酰化修饰位点H2BK16ac的高表达可能与慢性哮喘的发生密切相关。

组蛋白去乙酰化酶8抑制剂PCI-34051抑制哮喘小鼠气道旁血管生成和VEGF/ERK信号通路活性

目的探讨组蛋白去乙酰化酶8(HDAC8)抑制剂PCI-34051对支气管哮喘小鼠气道旁血管生成的治疗作用。方法BALB/C小鼠随机分作正常对照组、单纯哮喘组、地塞米松组和PCI-34051组,每组6只。应用卵白蛋白致敏和激发方法构建哮喘小鼠模型,HE染色观察气道炎症浸润水平,Masson染色观察气道壁周围胶原沉积水平,AB-PAS染色观察气道杯状细胞增生水平。免疫荧光双重染色观察α-SMA/CD31在肺组织中的表达分布,免疫组织化学染色观察VEGF、p-ERK1/2在肺组织中的表达分布,Western blot检测肺组织中VEGF、p-ERK1/2表达水平。结果卵白蛋白所致哮喘组小鼠气道周围可见大量炎症细胞浸润,α-SMA、CD31、VEGF和p-ERK1/2表达上调;地塞米松和PCI-34051处理显著抑制上述变化。结论HDAC8特异性抑制剂PCI-34051能缓解哮喘气道旁新生血管形成,其机制与抑制VEGF/ERK信号通路有关。

TubastatinAHcl对急性支气管哮喘小鼠气管炎症的干预作用

目的探讨组蛋白脱乙酰基酶6（HDAC6）抑制剂Tubastatin A Hcl对急性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气管炎症的干预作用。方法48只BALB／C小鼠按随机数字表法随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和Tubastatin A Hcl组各12只。测定各组小鼠气管反应性，计数其支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和分类细胞数以及白细胞介素（IL）-4、IL-5和γ干扰素（IFN-γ）水平。取各组小鼠肺组织分别通过HE染色观察气管炎症浸润、AB-PAS染色观察气管上皮杯状细胞化生、Masson染色观察肺组织胶原沉积情况。结果Tubastatin A Hcl组气管反应性显著低于哮喘组[（4．18±0．94）比（6．02±0．47），P〈0．05]；Tubastatin A Hcl组BALF中炎症细胞总数[（57．0±5．7）×10^4／ml比（87．0±5．6）×10^4／m1]、嗜酸性粒细胞数[（6．8±1．7）×10^4／ml比（12．3±3．5）×10^4／m1]、IL-4[（19．3±2．7）比（26．2±3．2）ng／ml]水平均显著低于哮喘组（均P〈0．05），IL-5低于哮喘组、IFN-γ水平高于哮喘组但差异均无统计学意义（均P〉0．05）；Tubastatin A Hcl组肺组织气管血管周围炎症细胞浸润程度、炎症细胞数[（9．80±2．42）比（20．67±7．53）个]、炎症评分[（2．20±0．70）比（3．60±0．68）分]、杯状细胞化生百分比[（50．46±5．03）％比（71．06±5．38）％]均显著低于哮喘组（均P〈0．05），胶原沉积面积低于哮喘组但差异无统计学意义（P〉0．05）。但上述结果地塞米松组均略优于TubastatinAHcl组但差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论Tubastatin A Hcl能够有效缓解急性期哮喘气管炎症水平，但其抗炎作用有限，效果并不如地塞米松显著。

红景天苷对香烟烟雾诱导的慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌功能影响的研究

目的研究红景天苷对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期模型大鼠骨骼肌的影响。方法取Wistar大鼠48只,随机分为6组:对照组,对照+红景天苷高剂量组,模型组,模型+红景天苷低、中、高剂量组,每组8只。采用单纯熏烟法复制大鼠COPD模型。红景天连续治疗16周后观察各组大鼠肺功能、肺组织结构,比较肌肉力量、体重及肌肉重量,观察腓肠肌超微结构,测定腓肠肌线粒体复合体Ⅳ(又称细胞色素C氧化酶)活性及线粒体复合体Ⅴ(又称F1F0-ATP合酶)活性。结果模型组肺功能显著低于对照组,差异有显著性意义,P<0.001;应用红景天苷后,FEV0.2/FVC及PEF较模型组改善,以高剂量组改善最为明显,差异有统计学意义,P<0.001。模型组肺泡腔增大、肺泡壁断裂、肺泡间隔增宽、平均肺泡数较对照组减少,应用红景天苷后,较模型组病理形态明显改善,以高剂量组改善明显。应用红景天苷后,大鼠体重、肌肉重量及肌力较模型组增加,差异有统计学意义(中剂量组,P<0.05,高剂量组,P<0.001)。模型组大鼠腓肠肌细胞线粒体较对照组明显肿胀变性,膜模糊不清,部分破裂,嵴破坏甚至消失,线粒体数量减少甚至消失,形成空泡化,应用红景天苷后由低至高剂量组上述表现逐渐减轻。应用红景天苷后,大鼠腓肠肌组织线粒体细胞色素C氧化酶、ATP合酶活性较模型组逐渐升高,差异均有统计学意义,P<0.001。结论红景天苷可明显改善COPD模型大鼠肺功能、肌力、体重及肌肉重量,改善腓肠肌线粒体结构,剂量依赖性地升高腓肠肌线粒体细胞色素C氧化酶、ATP合酶活性,从而改善COPD的预后。

急性期和慢性期哮喘小鼠模型在哮喘致病过程中的对比研究

【摘要】目的比较卵清蛋白（ovalbumin，OVA）诱导的急性期和慢性期哮喘小鼠模型在气道炎症、气道重塑和气道高反应方面的差异，明确在哮喘致病过程中肺组织的病理变化。方法48只BALB／c小鼠随机分为急性组和慢性组，其中急性组包括正常对照组（A1组）和急性哮喘组（A2组），慢性组包括正常对照组（B1组）和慢性哮喘组（B2组）。OVA致敏和激发方法分别构建急性早期哮喘模型和慢性期哮喘模型后，测定气道阻力，BALF细胞计数和分类计数，酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测IL-4、IL-5、转化生长因子-β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）、血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）和r干扰素（interferon-γ，IFN-γ）。HE染色观察气道炎症，A昏PAs和Masson染色测定气道重塑。结果与正常小鼠相比，A2组和B2组小鼠气道阻力均明显升高，但B2组小鼠气道阻力在基础值即发生明显改变。相比于慢性组哮喘小鼠，急性组哮喘小鼠BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数，IL-4、IL-5和IFN-γ水平，肺组织气道血管周围炎症细胞聚集，以及气道黏液分泌水平等炎症性改变更为明显。相比于A2组，B2组哮喘小鼠BALF中TGF-α，和VEGF水平，气道平滑肌增厚，上皮下胶原沉积，上皮下纤维化等改变更为显著。结论在急性早期哮喘中主要是以炎症性改变为主，但在哮喘早期即开始出现轻度的重塑性改变；而在慢性期哮喘中虽然存在炎症性改变，但影响哮喘症状的因素却主要以器质性改变为主。

支气管哮喘气道血管再生与重塑的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是一种以气道炎症、气道重塑及气道高反应性为主要病理改变的慢性炎症性疾病,其中气道血管再生与重塑是气道重塑的重要特征。哮喘气道血管改变主要表现为单位面积血管数目和大小增加、血流量增加、血管扩张和渗漏。血管再生与重塑的过程受众多因素的影响,在哮喘气道中促血管生成因子和抗血管生成因子之间的平衡调节仍需要进一步研究。本综述将总结影响哮喘气道血管网络形成的因素,以及目前对哮喘气道血管改变的治疗情况,为未来哮喘治疗提供新途径和新依据。