体外诱导小鼠胚胎干细胞血管形成

目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞向内皮细胞分化的条件,模拟体内血管生成和血管新生过程,为研究新血管的形成提供一种新思路。方法体外培养小鼠胚胎干细胞诱导形成胚胎小体,将11d的胚胎小体种植到胶原中诱发出芽性血管新生;通过免疫组织化学染色方法检测胚胎小体及其出芽向内皮细胞和功能血管的分化。结果胚胎干细胞在体外能自发形成胚胎小体,其内部含有血管样结构,并伴有平滑肌的分化;种植到胶原中的胚胎小体能再现出芽性血管新生。结论胚胎干细胞在体外不但能定向分化成内皮细胞,还能再现体内血管生成、血管新生及动脉生成过程。

体外诱导小鼠胚胎干细胞血管形成

目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞向内皮细胞分化的条件,模拟体内血管生成和血管新生过程,为研究新血管的形成提供一种新思路。方法体外培养小鼠胚胎干细胞诱导形成胚胎小体,将11 d的胚胎小体种植到胶原中诱发出芽性血管新生;通过免疫组织化学染色方法检测胚胎小体及其出芽向内皮细胞和功能血管的分化。结果胚胎干细胞在体外能自发形成胚胎小体,其内部含有血管样结构,并伴有平滑肌的分化;种植到胶原中的胚胎小体能再现出芽性血管新生。结论胚胎干细胞存体外不但能定向分化成内皮细胞,还能再现体内血管生成、血管新生及动脉生成过程。

血小板内皮细胞黏附分子的剪接体在胚胎干细胞血管形成过程中的表达

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律。方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生。分别利用免疫组织化学、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应等方法检测胚胎干细胞及其分化过程中PECAM1、Oct4及胚胎阶段特异性抗原(SSEA)1的表达。应用克隆分析的方法检测不同的PECAM1剪接体在EB形成和出芽性血管新生过程中的表达分布。

小鼠胚胎干细胞在单层粘附培养中向神经细胞的分化

目的 :探讨小鼠胚胎干 (ES)细胞在无血清培养基中以单层粘附培养方式向神经分化的方法。方法 :比较ES细胞在不同培养基中的生长情况 ,分析ES细胞在不同时间分化形成神经细胞的比例。结果 :( 1 )DMEM F1 2和Neurobasal B2 7的 1∶1混合培养基最适合ES的生长。 ( 2 )单层粘附的ES细胞表达神经细胞粘附分子 (NCAM)的比例随时间增长而增加 ,而nestin的表达先增加后下降。 ( 3)ES细胞可在两周分化为神经胶质及神经元 ,形成神经网络。结论 :小鼠ES细胞可在单层粘附培养中获得向神经的高效分化。

改良三维条件下人胚胎干细胞向内皮细胞的分化及功能

目的建立一种改良的三维分化无血清方法,对人胚胎干细胞(hESCs)向内皮细胞进行分化,并对这种方法得到的人胚胎干细胞来源内皮细胞(hESC-ECs)进行功能检测。方法在低附着培养皿中培养未分化的H9 hESCs12 d,使其形成类胚体(EBs),12 d后将已形成的EBs收集起来,用浓度为1.5 mg/ml的Ⅰ型鼠尾胶原重悬,加入六孔板中,在37℃待胶原凝固后加入EGM-2培养基培养3 d,获得出芽类胚体后用0.25%胶原酶Ⅰ和0.56 U/ml LiberaseBlendzyme消化芽生类胚体各20 min,采用流式技术分选出其中CD31阳性的细胞,并用乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)摄取实验和成管实验验证这部分细胞的内皮细胞功能。结果建立了一种基于胶原培养环境的三维分化方法,采用这种方法能够将hESCs向内皮细胞分化的效率提高到18%,最终获得的hESC-ECs具有和人脐带静脉内皮细胞(HU-VECs)相似的细胞表面标志物,并在乙酰化LDL吞噬实验和血管新生实验中表现出良好的内皮细胞功能。结论建立的改良三维分化方法能够明显提高hESCs向内皮细胞的分化效率,是一种简单高效的分化方法,同时无血清培养方法为将来hESC-ECs的临床应用提供了可能。

1553B总线系统的技术指标分析

介绍了一个试飞成功的１５５３Ｂ总线系统的构成和信息传输控制机制，对该总线系统的主要技术指标，进行了较详细的分析，并评价了该总线系统的性能及其应用前景。

脐血血管内皮祖细胞的分离和诱导分化

目的从脐血中分离内皮祖细胞 ,诱导其向内皮细胞分化 ,研究内皮祖细胞的生物学特性和诱导分化条件。方法从新鲜脐血中纯化的CD133+ 细胞接种于添加了VEGF、bFGF、IGF-1的M199培养液中 ,观察梭形贴壁细胞的出现时间和特异性细胞标志。结果培养3～4d可观察到梭形贴壁细胞 ,14d左右可形成索条状结构 ,贴壁细胞表达血管内皮细胞特异性标志VE_cadherin,vWF ,UEA -1和VEGFR -2。结论脐血中含有内皮祖细胞 ,在一定的条件下 ,可分化为内皮样细胞。

干细胞修复肾脏的旁分泌／内分泌机制

干细胞在肾损伤之后的修复中发挥着重要作用^[1]。肾脏损伤的动物模型表明,坏死细胞的更替依赖于残存的已分化细胞再次进入细胞周期^[2-3],或依赖于骨髓来源的^[4-5]或肾脏器官特异性干/祖细胞^[6-7]的修复作用。只有很少的骨髓细胞归巢到肾脏并替换受损的上皮细胞,因此,旁分泌或内分泌可能对肾脏修复有更大的帮助^[8-9]。本文主要对干细胞修复肾脏的旁分泌/内分泌机制综述如下。

体外分离培养的心脏干细胞具有间充质干细胞的特性

近年来,已报道从成年的小鼠中分离得到心脏干细胞(Cardiac Stem.Cells CSCs),并且应用于心脏病的治疗.但是心脏干细胞特征尚未完全阐述.通过体外分离成年小鼠的心肌组织,进行培养,分离得到半悬浮状态的具有干细胞特性的细胞;利用流式细胞仪检测分离得到的心脏干细胞的表面分子表达情况;并且通过调整培养条件诱导其体外分化.研究结果显示成功分离得到的心脏干细胞,表达干细胞标志分子Sca-1,以及间充质干细胞标志分子(CD29、CD90、CD44和CD106);体外分化研究显示心脏干细胞可以分化成心肌细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞和成骨细胞.心脏干细胞具有间充质干细胞的特性,具有多向分化潜能,在心脏损伤的治疗中具有重要意义.

分子影像在干细胞治疗中的应用

背景:目前干细胞治疗的研究已能够持续广泛地观察不同种类的干细胞,但是还没有任何一种单独的成像模式能够全面评价干细胞治疗的效果。目的:介绍追踪干细胞治疗的不同细胞标记方法、成像技术,对分子影像学与干细胞治疗未来的临床应用做一展望。方法:由第一作者检索2005年1月至2012年12月PubMed数据库有关分子影像学用于追踪干细胞治疗,细胞的标记方法和成像技术的应用,干细胞治疗理想的成像模式,以及不同干细胞进行分子影像学跟踪的进展相关文献,英文检索词为"Molecular imaging,Stem cell therapy,Cell transplantation,Regenerative medicine",计算机初检得到269篇文献,根据纳入标准保留20篇进一步归纳总结。结果与结论:目前,为了持续追踪移植细胞的生存能力和生物学功能,大多数细胞治疗需在不同时期处死动物进行免疫组织化学分析,不仅操作复杂而且浪费了大量的实验资源。分子影像学运用影像技术显示组织、细胞和亚细胞水平的特定分子,反映活体状态下分子水平变化,非侵入性的对参与生理和病理过程的分子进行定性或定量的可视化观察,增加了干细胞治疗的可行性,帮助阐明治疗过程中新的生物学机制。

成体肾脏干/祖细胞参与急性肾脏损伤的修复

人类肾脏对于缺血和毒性损伤均非常敏感,肾小管坏死和炎症反应的激发均将导致急性肾脏损伤。尽管肾小管在遭遇损伤后有一定的再生能力,但在多数情况下肾脏的修复能力无法满足再生的需要。成体肾脏干/祖细胞可能通过分化并最终融合入肾组织的方式参与肾脏修复,或者由旁分泌因子诱导、促进肾脏的修复和再生。上皮细胞可暂时获得祖细胞的表型而进一步增殖,最终取代损伤的肾小管细胞。

分子影像在干细胞治疗缺血性心脏病中的应用

目前,干细胞应用于临床治疗缺血性心脏疾病已取得了一定的疗效。然而干细胞移植后的的动态变化难以被量化,同时干细胞在体内的过程及其作用机理尚不清楚。分子影像作为一门新兴交叉学科,能够在分子水平上对人体内部生理或病理过程进行无损伤的、实时的成像,为干细胞治疗缺血性心脏病提供了一种有效的监测手段。

加强对农村工业的计划管理

农村经济在贯彻“以计划经济为主、市场调节为辅”的原则的过程中,如何加强对农村工业的计划管理,是一个急需注意的问题。所谓农村工业,系指分布在农村,由农村集体经济单位、国营农场或劳动者个体所进行的工业生产活动。我国农村工业的主体是农村集体工业,即社队工业,而国营农场和劳动者个体兴办的工业,相对说来是比较少的。

借鉴乡镇企业 搞活城市企业

十一届三中全会以来,我国城乡企业的活力都在增强。但是,如果我们把城市企业,特别是全民企业与乡镇企业相比较,两种企业的经济活力强弱呈现出明显的差异。借鉴活力较强的乡镇企业的经验,对搞活城市企业是有益的。本文主要结合江苏经济实践,对城乡企业的经济活力进行比较,分析全民企业与乡镇企业内部构造与外部环境的差异,提出一些搞活城市企业的粗浅看法。

航空电子综合仿真试验中的多RT模拟器技术

本文简要地介绍了在航空电子系统综合化仿真试验中应用的2种多远程终端模拟器技术,并对其性能和应用前景进行了简要说明。

分子影像学方法示踪胚胎干细胞移植治疗急性肝损伤

背景:胚胎干细胞具有多向分化潜能,已被用于急性肝损伤的治疗,但其在体内治疗过程中的增殖迁移情况尚不清楚。目的:利用分子影像技术监测移植胚胎干细胞在急性肝损伤修复过程中的行为。方法:利用慢病毒载体,将萤火虫荧光素酶、红色荧光蛋白以及单纯疱疹病毒胸苷激酶三融合基因转入小鼠胚胎干细胞(D3)中,筛选得到稳定整合3个报告基因的D3胚胎干细胞系。将上述胚胎干细胞或分化了6 d的拟胚体细胞通过脾脏注射到急性肝损伤SV129模型小鼠体内,利用生物发光成像技术监测移植的细胞。结果与结论:RT-PCR结果显示,三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞Oct-4和Nanog的表达。利用小动物活体成像系统可以观察到移植细胞从脾脏迁移到肝脏的过程。移植的胚胎干细胞和拟胚体细胞都在肝脏处形成畸胎瘤,由于单纯疱疹病毒胸苷激酶同时也是自杀基因,可以与更昔洛韦作用诱导转基因细胞死亡,通过注射更昔洛韦来抑制畸胎瘤的生长并逐步将其杀死。组织学分析显示,畸胎瘤里包含来自于3个胚层的组织。提示三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞的多向分化潜能,且胚胎干细胞用于细胞治疗有潜在的成瘤风险,影响了对肝损伤的修复,治疗策略有待进一步改进,并需要实时监控其在体内的行为。

mTOR信号通路在人子宫肌和子宫肌瘤组织中的活性研究

目的:检测哺乳动物雷帕霉素靶分子(m TOR)信号通路中相关蛋白在人子宫肌和子宫肌瘤组织中的表达。方法:收集22例子宫肌和与之配对的子宫肌瘤组织,采用Western blot法和Real-time PCR法检测tuberin、hamartin、p-S6K、p-4EBP1和p-Akt表达。结果:与子宫肌比较,子宫肌瘤中tuberin、S6K和4EBP1呈高表达,hamartin表达不升高,p-S6K和p-4EBP1表达降低,Akt和p-Akt表达无显著变化。结论:Tuberin在子宫肌瘤中高表达;m TOR信号通路在子宫肌瘤中受到抑制。

木瓜“酸味”与有机酸成分的相关性研究

目的 研究木瓜酸味与有机酸成分的相关性。方法 采用电位滴定法测定木瓜中总有机酸的含量;采用液相色谱-质谱联用技术测定12种有机酸含量;运用电子舌技术测定20批木瓜样品水提液和10种有机酸的味觉信息值,采用皮尔逊相关性分析法分析木瓜酸味值与有机酸成分的相关性。结果 不同来源木瓜有机酸含量和味觉信息值有明显差异。有机酸仅有柠檬酸、苹果酸等呈现酸味。木瓜酸味值与总有机酸含量呈正相关,与苹果酸、柠檬酸、莽草酸含量呈显著性正相关,与富马酸、绿原酸、奎宁酸和原儿茶酸含量呈正相关。结论 对木瓜酸味起主要作用的有机酸为苹果酸、奎宁酸、柠檬酸、莽草酸和绿原酸。

牡丹皮药材-饮片-配方颗粒中5种重金属的含量及溶出特性研究

通过原子吸收光谱法、原子荧光光谱法分别测定牡丹皮药材、饮片、配方颗粒及不同提取物中铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铜(Cu)5种重金属的含量。结果表明,所有牡丹皮样品中5种重金属含量均在《中国药典》和《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定的标准限下,且5种重金属的含量高低顺序为Cu>As>Pb>Cd>Hg。牡丹皮药材中Pb、Cu含量高于饮片及配方颗粒中的含量,而Cd、Hg、As 3种元素含量则低于饮片或配方颗粒中的含量。3种提取物中检测出的重金属含量高低为As>Cd>Hg,均未检测出Pb、Cu,牡丹皮水提液、醇提液中As的溶出率最高,分别为86.67%、70.00%,其次是Hg在水提液中的溶出率为60.91%。方法简便快速、灵敏度高、干扰较少、结果可靠。研究结果可为进一步控制牡丹皮药材中重金属含量提供参考,为保证牡丹皮药材品质及用药安全性评价提供依据。