nm23-H_1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 PKA活性变化的实验研究

目的 探讨nm2 3 H1基因转染和forskolin对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981PKA活性的影响。方法 应用PKA通路特异激动剂forskolin对人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981、转基因细胞株L9981 nm 2 3 H1 pLXSN和空载体转染细胞株L9981 pLXSN共同培养 ,应用放免法检测forskolin处理后不同时间点三个细胞株PKA的活性变化。结果 ( 1)forskolin处理前L9981、L9981 pLXSN和L9981 nm2 3 H1 pLXSN的PKA活性经F检验有显著性差异 (P <0 .0 1) ;两两比较 :L9981 nm2 3 H1 pLXSN的PKA活性显著高于L9981和L9981 pLXSN(P <0 .0 1) ,而L9981与L9981 pLXSN之间比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )在同一作用时间 ( 3 0min)下 ,三个细胞株经不同浓度forskolin处理后PKA活性均显著升高 (P <0 .0 1) ,在forskolin浓度为 10 0 μmol/L时PKA活性最高 ,呈剂量依赖关系。 ( 3 )三个细胞株在同一浓度forskolin( 10 0μmol/L)处理下 ,PKA活性随作用时间升高 ,在forskolin作用时间为 3 0min时PKA的活性最高 ,呈时间依赖关系。结论 ( 1)nm2 3 H1基因转染能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性 ,nm2 3 H1作为一种肿瘤转移抑制基因的作用机理与PKA信号通路可能有一定联系 ;( 2 )forskolin能显著上调L9981细胞?

MTA1基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

背景与目的转移相关基因(metastasis-associated gene 1,MTA1)是近年来研究较深入的肿瘤浸润转移基因,在多种肿瘤细胞系中表达,与肿瘤的侵袭和转移密切相关。本研究目的是探讨MTA1基因的表达与非小细胞肺癌的浸润、转移关系。方法建立测定MTA1mRNA表达的巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)最适条件,在半定量水平测定42例非小细胞肺癌标本癌组织、癌旁组织、正常组织和淋巴结及20例肺良性疾病组织MTA1mRNA表达的相对水平,分析其与临床和组织病理学特征的关系。结果MTA1mRNA在非小细胞肺癌组织(1.50±0.26)及转移淋巴结(1.88±0.35)中的平均表达水平高于正常组织(1.02±0.17)和良性疾病组织(0.90±0.15)(P<0.01),癌组织中MTA1的表达(1.50±0.26)高于癌旁组织(1.09±0.16)(P<0.01),淋巴结转移组MTA1的表达(1.88±0.35)高于无淋巴结转移组(1.40±0.36)(P<0.01),非小细胞肺组织中MTA1mRNA高表达率与临床分期、T分期和N分期呈正相关关系。42例非小细胞肺癌组织中,19例MTA1mRNA高表达,占45.2%;19例有转移的淋巴结中,16例高表达占84.2%。MTA1在癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤类型无关(P>0.05)。结论MTA1mRNA过度表达与非小细胞肺癌浸润和转移密切相关。MTA1mRNA的过度表达可能是评价非小细胞肺癌的恶性程度、转移的潜在指标。

阻断Wnt-1信号通路对云南肺癌细胞株的影响

目的初步探讨个旧肺癌细胞株中是否存在功能性的Wnt-1信号通路的激活,以及阻断该信号通路后,观察个旧肺癌细胞株的增殖和生长情况.为云南肺癌研究提供新的切入点.为临床对肺癌的早期诊断、预后判断提供依据,为肺癌的分子病理分期和靶向治疗提供理论基础.方法应用免疫组织化学的方法检测个旧肺癌细胞株中Wnt-1蛋白的表达.以及按计划加入Wnt-1抗体,抑制Wnt-1蛋白和胞膜受体结合,引起Wnt通路下游蛋白的改变,从而阻断该信号通路的传导,应用MTT法检测肺癌细胞增殖和生长情况.结果 (1)Wnt-1蛋白阳性染色主要定位于细胞浆和细胞膜,为粗细不一的棕黄色颗粒.在肺癌组中的阳性表达率为75.40%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001);(2)Wnt-1抗体浓度为0.01 mg/m L时能极显著抑制细胞增殖和生长(P<0.01);0.005 mg/m L时能显著抑制细胞增殖和生长(P<0.05).而过于稀释抗体浓度组则不能抑制细胞增殖和生长.IC50计算结果显示抑制率50%的时候抗体浓度为0.003 mg/m L.结论 (1)个旧肺癌细胞株中存在功能性的Wnt-1信号通路;(2)Wnt-1抗体能极显著抑制个旧肺癌细胞增殖和生长,且与抗体浓度成正比;(3)抑制率50%的时候抗体的浓度0.003 mg/m L.

99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2在肺部包块显像方面的比较研究

目的研究99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2显像对肺癌的诊断及鉴别诊断方面的临床价值。方法用99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2分别对44例有病理诊断的肺部包块的病人进行SPECT显像。结果肺癌99mTc-N(NOEt)2的早晚期T/N比值差异有显著性。为判断良恶性的标准,99mTc-P53诊断的敏感性、特异性及准确性分别为91%,55%和81%,而99mTc-N(NOEt)2诊断的敏感性、特异性及准确性分别为88%,64%和81%。肺炎性假瘤对99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2都有比较高的摄取,二者比较无统计学意义。断层显像要优于平面显像。肺癌的大小不是决定肺99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2是否被浓聚的必然因素。在肺癌显像方面,99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2SPECT无显著性差异,二者与肺癌的不同TNM分期也无显著性差异。结论99mTc-P53和99mTc-N(NOEt)2对肺癌的显像有着良好的敏感性,但都相对缺乏特异性。

99mTc-tetrofosmin在肺部肿瘤显像方面的临床研究

目的研究99mTc-tetrofosm in显像对肺癌的诊断及鉴别诊断的临床价值.方法用99mTc-tet-rofosm in对44例有病理诊断的肺部包块的病人进行SPECT显像.结果肺癌对99mTc-tetrofosm in的早晚期T/N摄取比值差异有显著性.以晚期摄取比值为判断良恶性的标准,其诊断的敏感性、特异性及准确率分别为91%,55%和81%.肺癌的不同组织学类型之间差异无显著性(P>0.05).肺癌的大小不是决定肺99mTc-tetrofosm in是否被浓聚的必然因素.肺炎性假瘤对99mTc-tetrofosm in有比较高的摄取.结论99mTc-tetrofos-m in对肺癌的显像有良好的敏感性,但相对缺乏特异性.对其在肺癌的诊断及鉴别诊断方面值得作进一步的探讨.

C-12蛋白芯片检测宣威地区肺癌的临床意义

目的探讨C-12蛋白芯片对云南省宣威地区肺癌患者的诊断价值.方法 (1)应用C-12蛋白芯片检测系统分别检测实验组40例肺癌患者,对照组38例肺良性病变血清中12种肿瘤标志物(CA-199、NSE、CEA、CA-242、CA-125、CA-153、AFP、Feritin、free-PSA、PSA、β-HCG、HGH)的水平.分别计算出实验组和对照组血清C-12的阳性率及临床评价指标.结果实验组的C-12的阳性率为75%(30/40),显著高于对照组的36.84%(14/38),肺癌组中CEA、CA-199、CA-125、CA-242、CA-153血清水平显著高于肺良性病变组.C-12蛋白芯片检测的敏感度为75%(30/40),特异性为63.16%(24/38),准确度为69.23%(54/78).结论云南省宣威地区肺癌患者血清中CEA、CA242、CA125、CA153、CA199阳性率较高.C-12蛋白芯片检测对其有重要的辅助诊断价值.C-12蛋白芯片检测特异度较高,操作方便,费用低廉,可以用于该地区高危人群、住院患者的筛查.

nm23-H1基因调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性和体外增殖侵袭力的实验研究

目的探讨nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌L9981细胞株PKA活性变化和细胞增殖和体外侵袭力影响。方法应用放免法检测人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981,转基因细胞株L9981-nm23-H1和空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA的活性,应用MTT法检测L9981,L9981-nm23-H1和L9981-pLXSN细胞株的体外增殖,改良的Boyden小实法检测L9981,L9981-pLXSN,L9981-nm23-H1这3个细胞株细胞体外侵袭力。结果(1)原代细胞株L9981的PKA活性为0.408±0.048(pmol/min/μg),空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA活性为0.476±0.05(7pmolmin/μg),转基因细胞株L9981-nm23-H1的PKA活性为1.939±0.06(2pmol/min/μg),经F检验,在3种细胞株中PKA活性有显著性差异(P<0.001)两两比较,L9981-nm23-H1的PKA的活性明显高于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间所显示PKA的活性并无统计学差异(P>0.05);(2)L9981细胞株的OD值为1.532±0.893,L9981-pXSN细胞株的OD值为1.435±0.542,L9981-nm23-H1细胞株的OD值为0.456±0.081,经F检验,L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1增殖力有非常显著性差异(P<0.001),两两比较,L9981-nm23-H1细胞增殖力显著低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间比较无显著性差异(P=0.121<0.05);(3)L9981细胞株穿越ECM胶的细胞数为151.75±3.304,L9981-pLXSN细胞株穿越ECM胶的细胞数为158.75±2.986,L9981-nm23-H1细胞株穿越ECM胶的细胞数为43.5±2.082,经F检验3个细胞株间的体外侵袭力有显著性差异,两两比较,L9981-nm23-H1细胞株体外侵袭力明显低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株间比较无显著性差异(P=0.271<0.05)。结论nm23-H1基因可以显著抑制人高转移大细胞肺癌的体外增殖力和侵袭力,显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株的PKA活性信号。

nm23-H1基因靶向调控人肺癌细胞PKA信号通路的实验研究

目的探讨nm-23H1基因靶向调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981PKA信号通路的分子机理。方法应用放免法、Westem blot法检测人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pLXSN和转基因细胞株L9981-nm23-H1中的PKA活性、CREB和p-CREB的表达水平。结果L9981-nm-23H1肺癌细胞株PKA活性[1.906±0.034μmol/(min.g)]显著高于L9981[0.441±0.021μmol/(min.g)]和L9981-pLXSN[0.443±0.059μmol/(min.g)]肺癌细胞株(P=0.000);而L9981与L9981-pLXSN肺癌细胞株间PKA活性比较无显著性差异(P=0.991);(2)L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株间CREB表达水平比较无显著性差异(P=0.774);L9981-nm23-H1肺癌细胞株p-CREB表达量显著高于L9981和L9981-pLXSN肺癌细胞株(P=0.000),而L9981与L9981-pLXSN肺癌细胞株间p-CREB表达量比较无显著性差异(P=0.126)。结论(1)nm23-H1基因转染能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株L9981PKA信号通路关键激酶的活性和表达量;(2)nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌侵袭转移表型的分子机理可能与其激活PKA信号传导有关。

MTT法检测乳腺癌原代细胞中SP细胞对化疗药物的敏感性

目的:探讨MTT法在筛选乳腺癌较敏感的药物及浓度和指导乳腺癌临床治疗中的作用。方法:乳腺癌原代细胞和乳腺癌细胞株MCF-7培养传代,利用HoechestDNA染色流式细胞仪分选SP细胞和非SP细胞。选SP细胞、MP细胞、PP细胞分别加入不同浓度的四种常规化疗药物观测SP细胞对药物敏感性。结果:不同药物对SP、MP和PP三种细胞的半抑制浓度IC50都呈现如下趋势:SP>>PP>MP。结论:SP细胞对不同药物都具有最低的敏感性,会将药物之间的差异放大,更适合用其检测药物毒性,药物毒性随着药物浓度的增加而增高,在具有相同效应的药物中,应选择低浓度,但因药物的作用机理不尽相同,患者身体基础状况及耐受程度不同,还应结合临床试验确定药物浓度。

电视胸腔镜在肺癌手术治疗中的应用

目的 探讨电视胸腔镜在肺癌完全性及姑息性手术治疗中的作用。方法 2 0 0 2年 2月至 2 0 0 3年 8月采用电视辅助胸腔镜手术 (VATS)治疗肺癌 43例。其中ⅠA期 5例 ,ⅠB期 14例 ,ⅡA期 1例 ,ⅡB期4例 ,ⅢA期 7例 ,T4 ⅢB期 6例 ,Ⅳ期 6例。ⅢA期术前临床评估为N0 ,术后病理查见N2 转移。ⅢB期病例中 3例为恶性胸水 ,3例为术中发现胸腔种植转移。Ⅳ期病例中 2例为晚期肺癌伴恶性心包积液 ,心脏压塞 ;1例为孤立脑转移瘤切除术后 ;3例为对侧或同侧肺孤立性转移。主要手术方式 :肺叶切除 3 6例 ,肺楔形切除5例 ,心包开窗 2例。其中 2例同期行对侧孤立性肺转移瘤楔形切除 ;恶性胸水行胸膜种植结节切除、烧灼 ,胸膜粘连术。行纵隔淋巴结清扫 3 6例。结果 无围术期死亡 ,无支气管胸膜瘘发生 ,肺部感染 5例 ,切口液化 2例。 3例恶性胸水均得到控制。 2例心包开窗引流患者分别于术后 4个月、8个月死亡。其余患者目前仍存活。除 2例心包开窗引流患者 ,外科术后住院时间为 5～ 15天 ,平均 7.4天。结论 VATS适合早期肺癌的完全性切除手术治疗 ,对偶然性N2 肺癌手术中行纵隔淋巴结清扫是可行的。对肺癌需同期双侧开胸手术者VATS具有显著优势。VATS对恶性胸水。

食管鳞癌中人表皮生长因子受体Her-2/neu蛋白的过表达及预后意义

目的分析食管鳞癌中Her-2/neu蛋白过表达的临床病理意义及其对预后的影响,探讨以Her-2/neu单抗对过表达Her-2/neu蛋白的食管鳞癌患者进行靶向治疗的可行性。方法应用Hercep Test试剂盒,对94例外科切除、病理诊断为食管鳞癌的标本中Her-2/neu蛋白的表达水平进行检测,并分析Her-2/neu蛋白的过表达与临床病理特征的关系以及与患者预后的关系。结果HER-2/neu蛋白在癌旁组织及正常食管组织中的表达为阴性,在94例食管鳞癌中的过表达率为20.2%(19/94),其过表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位、组织学分化程度、临床分期均无明显相关性(P>0.05),而与肿瘤浸润深度(T分期)以及淋巴结转移(N分期)具有一定的相关性,在T3+T4期的肿瘤组织中的过表达率明显高于T1+T2期的肿瘤组织中的过表达率(30.0%vs.13.0%),差异有统计学意义(χ2=4.136,P=0.039);在N1期肿瘤组织中的过表达率明显高于在N0期肿瘤组织中的过表达率(26.8%vs.10.6%),差异有统计学意义(χ2=3.711,P=0.045);生存分析显示HER-2/neu蛋白过表达组的总生存率低于非过表达组,差异有统计学意义(χ2=6.258,P=0.017),而两组的无瘤生存率差异无统计学意义(χ2=0.258,P=0.605);Cox模型多因素分析显示HER-2/neu基因过表达是影响患者总生存率的有意义的预后因素之一。结论HER-2/neu基因过表达与食管鳞癌的浸润转移及预后密切相关,HER-2/neu蛋白过表达检测可作为判断食管鳞癌生物学行为和预测预后的参考指标之一,并为HER-2/neu过表达的病例应用HER-2/neu单克隆抗体进行靶向治疗提供依据。

肺癌MDT联合PBL+CBL模式在临床教学中的应用

目的探讨肺癌MDT联合CBL+PBL模式教学的应用效果。方法将2020年5月至2021年5月进行胸外科住院医师规范化培训的医师随机分为对照组与实验组,各24人,对照组采用传统讲授模式LBL教学法,实验组采用MDT联合PBL+CBL教学模式。结果对照组较实验组学员理论成绩、病例分析及临床技能操作评分比较:差异有统计学意义[(80.039±5.744±5.744)分vs(84.001±6.474)分,P<0.05;(77.708±5.599)分vs(82.250±6.081)分,P<0.05;(76.041±5.568)分vs(84.208±6.199)分,P<0.05]。问卷调查显示:实验组较对照组在在教学满意度方面差异有统计学意义(P<0.05);同样在提高自学能力、学习兴趣、理解能力、实践能力、思维能力等方面的差异也均有统计学意义(P<0.05)。结论在针对肺癌的临床教学中,MDT联合PBL+CBL模式在实际教学活动中取得了良好效果。

转染nm23-H_1基因靶向阻断人大细胞肺癌细胞株L9981 Wnt信号传导通路

目的 探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L9981、空载L9981 pLXSN三株人高转移大细胞肺癌细胞为研究对象 ,应用Westernblot检测比较各株肺癌细胞胞浆、胞核中Wnt信号传导通路关键激酶GSK 3 β和 β 连环蛋白表达的变化。结果 ①GSK 3 β在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 63 41± 5 41)显著高于L9981( 373 6± 2 98)和L9981 pLXSN( 3 613± 3 83 ) (P <0 .0 0 1) ;②GSK 3 β在L9981 nm2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 4 3 5 6± 490 )显著高于L9981( 65 7± 5 7)和L9981 pLXSN ( 70 5± 75 ) (P <0 .0 0 1) ;③β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 3 64 9± 118)显著高于L9981( 14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN ( 13 5 0± 5 5 )(P <0 .0 0 1) ;④β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 2 945± 68)与L9981( 2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN( 2 65 2± 5 3 )比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;⑤L9981与L9981 pLXSN两者间GSK 3 β和β 连环蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核的?

nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的影响及作用机理

背景与目的nm23-H1基因已被证明是一个肿瘤转移抑制基因,但其相关作用机理仍不明确。本研究通过比较nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生物学行为的变化,探讨nm23-H1基因影响人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的可能机理。方法应用细胞体外增殖活性检测(MTT法)和体外侵袭力检测(改良Boyden小室法)技术分别检测nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株体外增殖活性和侵袭力的变化;同时加入PKC特异抑制剂Calphostin C作用后,再次观察三株细胞株抑制剂作用前后细胞侵袭力、增殖力的变化。结果nm23-H1基因缺失的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-pLXSN体外侵袭力和增殖活性明显高于转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1肺癌细胞株(P<0.001);L9981和L9981-pLXSN细胞间体外侵袭力和增殖活性则无统计学差异(P>0.05)。用PKC抑制剂Calphostin C处理L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株后,细胞体外侵袭力和增殖活性下降(P<0.001),而转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1细胞体外侵袭力和增殖活性仍低于L9981和L9981-pLXSN(P<0.001),L9981和L9981-pLXSN细胞间则无统计学差异(P>0.05)。结论nm23-H1基因可明显抑制L9981肺癌细胞株的细胞增殖力和侵袭力。nm23-H1基因对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的生物学行为的影响可能与其抑制PKC信号传导有关。

nm23-H_1基因转染能上调人肺癌细胞株L9981中GSK-3β激酶活性

目的 探讨转移抑制基因nm2 3 H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导激酶GSK 3 β的表达量和活性的影响 ,为全面阐明nm2 3 H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法 将稳定转染nm 2 3 H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 nm2 3 H1、原代细胞株L9981和空载体转染细胞株L9981 pLXSN培养传代 ,应用Westernblot分别检测应用 2 0mmol/LLiCl处理前后三个肺癌细胞株胞浆、胞核中GSK 3 β的表达水平 ,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞浆和胞核中的GSK 3 β激酶活性。 结果 ( 1)L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核中GSK 3 β蛋白表达量分别为( 63 41± 5 41)和 ( 4 3 5 6± 490 )IOD ,L9981 pLXSN分别为 ( 3 613± 3 83 )和 ( 70 5± 75 )IOD ,L9981分别为 ( 373 6± 2 98)和 ( 65 7± 5 7)IOD。三个细胞株间胞浆和胞核中GSK 3 β表达量均有非常显著差异 (P <0 .0 1) ;两两比较 :L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β表达水平均显著高于L9981 pLXSN和L9981(P <0 .0 1) ,而后两者之间比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β激酶活性分别为 ( 2 895 5±2 5 0 9)和 ( 92 47± 92 4)CPM ,L9981 pLXSN分别为 ( 112 41±

nm23-H_1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中β-catenin表达的影响

目的 探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法 以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和转染空载体的L9981 pLXSN三株肺癌细胞株为研究对象 ,应用WesternBlot检测比较各细胞株胞浆、胞核中 β catenin和磷酸化 β catenin表达水平的变化 ,以确定nm 2 3 H1基因转染是否能调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化 β catenin表达。 结果 ①β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (IOD) (3 64 9± 118)显著高于L9981(14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN(13 5 0± 5 5 )细胞株 (P <0 .0 0 1) ;②β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞核中表达量 (2 945± 68)与L9981(2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN(2 65 2± 5 3 )细胞株比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;③磷酸化β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (3 12 3± 10 2 )显著低于L9981(4 3 62± 13 1)和L9981 pLXSN (4 5 0 0±117)细胞株 (P <0 .0 0 1) ;④磷酸化 β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞核中表达量 (5 13 6± 112 )显著高于L9981(2 666± 116)和L9981 pLXSN(2

nm23-H_1基因转染前后人肺癌细胞中PKC转位的研究

目的 探讨nm2 3 H1转染和蛋白激酶C(PKC)特异抑制剂CalphostinC对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981细胞PKC信号转导通路的作用 ,以及nm2 3 H1基因对PKC激活转位的影响。方法 应用激光扫描共聚焦显微镜观察nm 2 3 H1基因转染前后和CalphostinC处理转基因细胞株L9981 nm2 3 H1前后PKC在不同的亚细胞区域的定位情况。结果 ( 1)原代细胞株L9981和空载体细胞株L9981 pLXSN中PKC α、PKC βⅡ主要位于胞核及核周 ,处于激活状态 ;转染nm 2 3 H1基因后的人肺癌细胞株L9981 nm2 3 H1中PKC α、PKC βⅡ主要位于胞浆 ,处于未激活状态。 ( 2 )CalphostinC作用后所有细胞中的PKC均主要位于胞浆中 ,处于未激活状态。结论 ( 1)nm2 3 H1基因可使L9981细胞株中PKC从胞核向胞浆转位 ,从而抑制PKC信号转导。 ( 2 )CalphostinC可使L9981、L9981 pLXSN细胞株中PKC从胞核向胞浆转位 ,从而抑制PKC信号转导。

非小细胞肺癌EGFR-TKIs靶向治疗获得性耐药机制及治疗方案研究进展

近年来,非小细胞肺癌(NSCLC)的发病率和病死率居高不下,临床多采用手术治疗为主,联合化疗、放疗的综合治疗,但对晚期丧失手术机会的患者,靶向治疗带来新的治疗方案,已成为NSCLC精准医学的新方向。靶向药物的应用可显著改善敏感突变的NSCLC患者人群生存质量,但几乎所有靶向药物治疗的NSCLC患者最终均不可避免出现获得性耐药现象,甚至加重病情。本文对EGFR-TKIs获得性耐药机制和耐药后应对策略的相关研究进行综述,以期为耐药后的进一步治疗提供参考。

PKCα在不同转移潜能的人肺癌细胞株中的分布和激活转位变化

背景与目的PKC是信号转导通路中发挥关键作用的蛋白激酶之一,继往对其在细胞增殖方面的作用研究较多,而对PKC在影响肿瘤的侵袭与转移方面的研究相对较少,这方面的作用机理也不清楚。本研究通过检测不同转移潜能的人高转移大细胞肺癌细胞株中PKCα亚型在胞内的分布和激活转位情况,以探讨PKC在肺癌侵袭转移中的分子机制。方法应用Western blot方法、激光扫描共聚焦显微镜观察PKC抑制剂Calphostin C处理前后具有不同转移潜能的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981(原代细胞株)、L9981-PLXSN(空载体细胞株)和L9981-nm23-H1(转基因细胞株)中PKCα在不同的亚细胞区域的分布、定位和激活转位变化。结果L9981和L9981-PLXSN中PKCα主要分布在胞膜,其胞浆蛋白含量明显较L9981-nm23-H1细胞株低(P<0.001);L9981-nm23-H1细胞中PKCα主要分布在胞浆,其胞膜蛋白含量明显较L9981和L9981-PLXSN细胞低(P=0.001);激光扫描共聚焦显微镜观察L9981和L9981-PLXSN细胞中PKCα主要定位于胞核及核周,处于活性状态;L9981-nm23-H1细胞中PKCα主要定位于胞浆,处于激活转位前状态;PKC特异抑制剂Calphostin C作用后所有细胞中的PKCα均主要位于胞浆中,处于未激活状态。结论PKC亚型的胞内分布和激活转位变化同肺癌细胞的侵袭和转移潜能密切相关。