髓芯减压联合胶原基骨修复材料、VEGF对股骨头坏死家兔骨密度及生物力学的影响

目的探讨髓芯减压联合胶原基骨修复材料、血管内皮生长因子(VEGF)对股骨头坏死(ONFH)家兔模型的股骨头骨密度及生物力学的影响。方法30只家兔股骨头内注射无水乙醇建立ONFH模型,随机分为健康对照组(A组)、模型组(B组)、髓芯减压联合自体松质骨组(C组)、髓芯减压联合胶原基骨修复材料组(D组)及髓芯减压联合胶原基骨修复材料和VEGF组(E组),每组6只。治疗8周后,分别检测各组家兔股骨头的骨密度和生物力学参数(最大应力、弹性模量、刚度、最大载荷和能量吸收),HE染色观察股骨头形态。qRT-PCR检测各组家兔的股骨头组织中骨保护素(OPG)、血管内皮生长因子164(VEGF164)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和核因子κB受体活化因子(RANK)的mRNA水平。结果B组的骨密度较A组显著降低(P<0.05),E组的骨密度显著高于B组、C组和D组(P<0.05)。与A组相比,B组的空骨陷窝比率显著增高(P<0.05);与B组相比,C组、D组和E组的空骨陷窝比率均降低,以E组最低(P<0.05)。与A组相比,B组的股骨头生物力学参数显著降低(P<0.05);与B组相比,C组、D组和E组的股骨头生物力学参数均升高,以E组最高(P<0.05)。与B组、C组和D组相比,E组股骨头组织中OPG、VEGF164和VEGFR2的mRNA水平均升高(P<0.05),RANKL和RANK的mRNA水平均降低(P<0.05)。结论髓芯减压联合胶原基骨修复材料、VEGF可有效提高ONFH家兔股骨头的骨密度和强度,促进损伤区域的骨形成和血管生成,促进坏死性股骨头的修复。

自制式“镰刀状”小针刀微创治疗与开放手术治疗手指屈肌腱狭窄性腱鞘炎疗效的对比研究

目的对比自制式“镰刀状”小针刀微创治疗与开放手术治疗手指屈肌腱狭窄性腱鞘炎的疗效。方法选择我院2005年1月—2011年12月收治的手指屈肌腱狭窄性腱鞘炎患者268例（306指），Quinnell分级均为Ⅲ一Ⅳ级，根据患者意愿分为针刀组153例（175指）和手术组115例（131指）。针刀组行自制式“镰刀状”小针刀微创治疗，对滑车A1部进行切割松解；手术纽行开放手术治疗，对滑车A1部进行切除。结果针刀组手术时间为（2．0．4-0．5）rain。手术组为（15．0±3．0）min，针刀组手术时间少于手术组（t=52．667，P=0．000）。针刀组术后3h毛细血管充盈试验皮肤由白转红平均时间为（1．5±0．3）s，手术组为（1．5-i-0．2）s，两组间差异无统计学意义（t=0．000，P=1．000）。两组患者术后术指感觉均正常。268例患者（306指）均获随访，随访时间为1．0—3．5年，平均1．5年。两组患者均未出现切口红肿、渗液等并发症。针刀组术后1周有4例患者（4指）屈伸活动时仍存在扳机样感及顿挫感，经小针刀再次治疗后痊愈，3例患者（3指）症状无明显改善，行开放手术后治愈；手术组患者术指屈伸活动均正常。针刀组疗效评定优125例（150指）、良21例（18指）、差7例（7指）；手术组优98例（113指）、良17例（18指）、差0例，两组疗效间差异无统计学意义（u=5．515，P=0．063）。结论自制式“镰刀状”小针刀微创治疗手指屈肌腱狭窄性腱鞘炎具有创伤小、见效快、操作简单等优点，值得临床推广应用。

强直性脊柱炎患者并发骨质疏松及其骨密度和骨代谢生化指标变化情况

目的探讨强直性脊柱炎患者并发骨质疏松情况及其骨密度、骨代谢生化指标的变化。方法选取2010年6月—2012年6月河北医科大学第一医院收治的强直性脊柱炎患者120例为研究组,选取同期在我院进行健康体检的健康者80例为对照组。采用双能X线吸收法测定两组腰椎、股骨颈、股骨粗隆、Ward's三角区的骨密度;测定两组骨钙素(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型胶原羧基端前肽(CICP)、Ⅰ型胶原羧基端交联肽(CTX-Ⅰ)、尿脱氧胶原吡啶交联(D-Pyr)水平。采用Bath强直性脊柱炎病情活动指数(BASDAI)评估患者的病情活动度,采用Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)评估患者的功能情况。结果 120例强直性脊柱炎患者中,21例并发骨质疏松,发生率为17.5%;55例并发骨量减少,发生率为45.8%。研究组的腰椎、股骨颈、股骨粗隆、Ward's三角区的骨密度均较对照组降低(P<0.05)。研究组的BGP、PTH水平较对照组降低,CTX-Ⅰ、D-Pyr水平较对照组升高(P<0.05);BALP、CICP水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组的股骨颈、股骨粗隆的骨密度与BASDAI均呈负相关(r值分别为-0.29、-0.25,P<0.05);股骨颈、股骨粗隆、Ward's三角区的骨密度与BASFI均呈负相关(r值分别为-0.29、-0.27、-0.31,P<0.05)。结论强直性脊柱炎患者并发骨质疏松、骨量减少的发生率较高,存在骨密度降低、骨代谢异常情况;骨密度的降低影响了患者的病情进展和功能,应引起临床重视。

提高激素性股骨头坏死模型成活率的方法

背景:激素性股骨头坏死动物模型建立过程中动物的死亡成为影响实验结果的主要因素。目的:观察以脂多糖和地塞米松建立股骨头坏死模型,提高模型成功率的方法。方法:新西兰大白兔48只随机等分为模型组、庆大霉素组、庆大霉素+兰索拉唑组和对照组,前3组连续2 d经耳缘静脉注射脂多糖,再连续3 d,臀部肌肉注射地塞米松注射液建立股骨头坏死模型,庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组在建模成功后连续7 d以庆大霉素灌胃,同时庆大霉素+兰索拉唑组肌肉注射兰索拉唑注射液。对照组兔仅注射生理盐水。结果与结论:模型组、庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组均造模成功;其中庆大霉素+兰索拉唑组存活状况最好,3组动物死亡率分别是33.3%,25%,8.3%,模型组、庆大霉素组、庆大霉素组+兰索拉组和对照组兔的死亡数量差异有显著性意义(P<0.05)。提示在兔激素性股骨头坏死模型建立中,庆大霉素+兰索拉唑的使用,可以提高实验动物的生存率。

激素性股骨头坏死模型:不同构建技术分析

背景:良好的股骨头坏死动物模型的建立,有助于研究股骨头坏死的发病机制,为股骨头坏死的预防和治疗提供理论依据。目的:研究内毒素脂多糖联合地塞米松注射液诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法:新西兰大白兔36只随机分为模型组21只和对照组15只。模型组连续2 d每日经耳缘静脉注射内毒素脂多糖10μg/kg,再连续3 d,每日肌肉注射地塞米松注射液25 mg/kg;对照组注射同等剂量的生理盐水。结果与结论:模型组4周后X射线显示兔关节间隙增宽,密度增大,关节软骨下骨密度增高,股骨头变平,骨小梁模糊,软骨下骨与骨松质界限不清,在股骨头内出现斑块状高密度区域,股骨颈变短粗。双能量X射线骨密度测量仪进行股骨头局部骨密度测量,兔股骨头骨密度检测发现模型组股骨头骨密度、骨矿物质含量均显著低于对照组(P<0.05)。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝率均明显高于对照组。证实地塞米松联合脂多糖可有效建立激素性股骨头坏死模型。

自制“镰刀状”小针刀治疗小儿拇指屈肌腱狭窄性腱鞘炎

目的比较自制＂镰刀状＂小针刀微创及开放手术治疗小儿拇指屈肌腱狭窄性腱鞘炎的临床疗效。方法将Quinnell分级Ⅲ~Ⅳ级拇指屈肌腱狭窄性腱鞘炎患儿53例（58指）随机分为针刀组28例（31指）和手术组25例（27指）。针刀组术中对A1滑车部进行切割松解,手术组对A1滑车部进行切除。观察比较2组治疗效果。结果手术时间针刀组为（2±0.5）min,手术组为（18±5）min,针刀组明显短于手术组（P〈0.05）。患儿均获随访,随访时间1-3.5年,平均1.5年。针刀组术后有1指症状无明显改善,再行切开手术后痊愈。手术组均获得痊愈。术后6个月参照Quinnell分级标准评定疗效：针刀组优27指,良3指,差1指,优良率为97%。手术组优25指,良2指,优良率为100%。2组疗效比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论自制＂镰刀状＂小针刀微创治疗小儿拇指屈肌腱狭窄性腱鞘炎具有治愈率高、创伤小、费用低、操作简单等特点,值得推广应用。

Smad1在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞迁移能力的影响研究

目的:研究Smad1在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞迁移能力的影响。方法:提取收集的胃腺癌组织及对应的癌旁组织中的蛋白,Western blot检测Smad1的表达水平。以胃腺癌细胞HGC-27为研究对象,细胞转染过表达Smad1的载体(p-EGFP-C1/Smad1)和Smad1小干扰RNA(Smad1 siRNA),同时转染p-EGFP-C1和siRNA control为对照。细胞划痕实验检测细胞迁移能力。Western blot检测细胞中MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt的表达水平。Akt信号通路抑制剂LY294002(20μg/ml)作用于胃腺癌细胞HGC-27,MTT检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。Western blot检测MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt蛋白表达水平。结果:胃腺癌组织中Smad1的水平明显低于癌旁组织(P<0.01)。p-EGFP-C1/Smad1组细胞存活率和迁移率均明显低于p-EGFP-C1组(P<0.01)。Smad1 siRNA组细胞存活率和迁移率均明显高于siRNA control组(P<0.01)。p-EGFP-C1、p-EGFP-C1/Smad1、siRNA control、Smad1 siRNA组细胞中Akt蛋白表达水平没有变化。p-EGFP-C1/Smad1组细胞MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平明显低于p-EGFP-C1组(P<0.01)。Smad1 siRNA组细胞MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平明显高于siRNA control(P<0.01)。胃腺癌细胞与Akt信号通路抑制剂作用后细胞增殖和迁移趋势与p-EGFP-C1/Smad1组一致。结论:Smad1在胃腺癌组织中低表达。Smad1能够抑制胃腺癌细胞增殖和迁移,作用机制与Akt信号通路有关。

兔激素性股骨头坏死模型的研究

目的研究内毒素脂多糖(LPS)+地塞米松注射液诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法取新西兰大白兔36只随机分为模型组(n=21)和对照组(n=15)。模型组连续2 d每天经耳缘静脉注射内毒素脂多糖10μg/kg,再连续3 d每天臀部肌肉注射地塞米松注射液25 mg/kg;对照组注射同等剂量的生理盐水。结果 4周后,X线显示:模型组兔关节间隙增宽,密度增大,关节软骨下骨密度增高,股骨头变平,骨小梁模糊,软骨下骨与骨松质界限不清,在股骨头内出现斑块状高密度区域,股骨颈变短粗。双能量X线骨密度测量仪进行股骨头局部骨密度测量,兔股骨头骨密度检测发现模型组股骨头骨密度、骨矿物质含量,均显著低于对照组(P均<0.05)。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝率均明显高于对照组(P均<0.05)。结论地塞米松联合脂多糖可有效建立激素性股骨头坏死模型。

经伤椎椎弓根椎体内植骨与椎板植骨治疗胸腰段爆裂骨折的对照研究

目的评价胸腰椎爆裂骨折后路椎弓根钉棒系统内固定术+经椎弓根向伤椎自固化磷酸钙人工骨粉末型注射剂(ACPC)或后路椎弓根钉棒系统内固定术+伤椎及相邻节段椎板植入颗粒型磷酸钙人工骨(CCPC)的治疗效果。方法回顾性分析两种融合方式治疗的64例胸腰椎骨折患者的临床资料,其中A组(后路椎弓根钉棒系统内固定术+植入ACPC)34例,B组(后路椎弓根钉棒系统内固定术+伤椎及相邻节段椎板植入CCPC)30例。观察2组伤椎Cobb角以及矫正度丢失、手术时间、内固定失效率及术后腰背部疼痛情况变化。结果 2组患者均获随访。末次随访时A组Cobb角及矫正丢失度大于B组(P<0.05),A组手术时间和书中出血量与B组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),A组内固定失效率低于B组(P<0.05),术后腰背部疼痛率优于B组(P<0.05)。结论经椎弓根植骨并未增加手术时间及更多的创伤,但经椎弓根植骨增加了伤椎前中柱的稳定性,恢复了椎体的高度,加强了伤椎的抗压能力,减少了内固定因应力过大造成的断钉断棒,避免或减少了术后椎体塌陷而导致的迟发性胸腰背部疼痛等远期并发症,临床效果满意。

骨性肿瘤中微血管数量和形态与肿瘤分化增殖的相关性研究

目的分析骨肿瘤中的微血管数量(microvessel quantity,MVQ)和形态,研究新生血管和骨肿瘤增殖的关系。方法选择骨肉瘤患者90例,对成骨性肿瘤中CD34和IV型胶原蛋白(collagen IV,CoIV)阳性血管计数及形态进行分析。结果 CD34阳性的MVQ随着骨肉瘤的组织分级指标的级别升高而显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);CoIV阳性的MVQ随着组织分级级别升高而显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。随着增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和p53表达的阳性细胞数逐渐升高,CD34阳性的MVQ显著增加,CoIV阳性的MVQ则显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。另外核分裂>10/10 HPF、发生瘤转移的肿瘤组织中,CD34阳性的MVQ显著高于核分裂<10/10 HPF和未发生瘤转移的肿瘤组织,但CoIV阳性的MVQ则显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对骨肿瘤血管形态、CD34阳性的MVQ和CoIV阳性的MVQ的分析有助于进一步判断骨肿瘤的恶性程度,给治疗和预后的评估提供参考。

过表达kisspeptin抑制MKN-45胃腺癌细胞的增殖和迁移

目的探讨肿瘤转移抑制因子kisspeptin(KISS-1)在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法实时定量PCR和Western blot法分别检测50例胃腺癌组织和对应的癌旁组织中kisspeptin的mRNA和蛋白水平。分别将kisspeptin小干扰RNA(kisspeptin-siRNA)和对照小RNA(control-siRNA)、kisspeptin过表达载体(p EGFP-N1-kisspeptin)和对照空载体(p EGFP-N1)转染至MKN-45胃腺癌细胞中,培养48 h后,Western blot法检测细胞中kisspeptin、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、β联蛋白(β-catenin)、C-myc蛋白水平,MTT法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535作用于胃腺癌细胞后,MTT法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 Kisspeptin在胃腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织。与空载体组相比,过表达kisspeptin后,MKN-45细胞存活率和迁移率、MMP-9、MMP-2、β-catenin、C-myc水平均明显降低;与control-siRNA组细胞相比,敲低kisspeptin水平后,细胞存活率和迁移率、MMP-9、MMP-2、β-catenin、C-myc水平明显增加。FH535处理后的胃腺癌细胞增殖、迁移趋势与过表达kisspeptin细胞一致。结论Kisspeptin在胃腺癌组织中低表达,kisspeptin通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃腺癌细胞增殖迁移能力。

Kiss-1在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌MKN-45细胞增殖、迁移能力的影响

目的探讨肿瘤抑制因子(Kiss)-1在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法 qRT-PCR检测50例胃腺癌组织和对应的癌旁组织中Kiss-1水平。分别将Kiss-1小干扰RNA(siRNA Kiss-1)和对照小RNA(siRNA control)、Kiss-1过表达载体(p EGFP-N1-Kiss-1)和对照空载体(p EGFP-N1)转染至胃腺癌细胞株(MKN-45)中,培养48 h后,Western印迹检测细胞中Kiss-1、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、β-连环蛋白(β-catenin)、C-myc蛋白水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535作用胃腺癌细胞后,检测细胞增殖和凋亡情况。结果 Kiss-1在胃腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。p EGFP-N1-Kiss-1组细胞存活率和迁移率显著低于p EGFP-N1组,siRNA Kiss-1组显著高于siRNA control组(P<0.01)。p EGFP-N1-Kiss-1组细胞中MMP-9、MMP-2、β-catenin、C-myc水平显著低于p EGFP-N1组,siRNA Kiss-1组显著高于siRNA control组(P<0.01)。抑制剂作用后的胃腺癌细胞增殖迁移趋势与p EGFP-N1-Kiss-1组一致。结论 Kiss-1在胃腺癌组织中低表达,Kiss-1通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃腺癌细胞增殖迁移能力。

基于碳纳米管的三维多孔骨组织工程支架材料研究

目的探讨碳纳米管地三维多孔骨组织工程支架材料制备方法及具体临床效果。方法首先制备CNTs/PLA/CHI碳纳米管(CNTs)/聚乳酸(PLA)/甲壳素(CHI)三维多孔支架材料,然后对材料亲水性表征及动物实验效果进行观察。应用SPSS 20.0统计软件分析。结果(1)甲壳素纤维的亲水性理想,可将复合材料的亲水性显著改善。对于本研究所使用的几种材料,唯有聚乳酸(PLA)/碳纤维(CF)复合材料亲水性最佳。与未含碳纳米管的对照组比较,加入少量的碳纳米管地low组的亲水性要显著降低,然而随着复合材料中所加入的碳纳米管(CNTs)逐渐增多,材料亲水性也稍增强。但是材料亲水性与是否交联无显著关系。当CNTs添加至PLA/CF复合材料中,会使得复合材料亲水性显著下降。当CNTs水平逐渐增大时,复合材料的亲水性能则出现一定的增强。(2)经X线片检查,各组术后骨缺损移植地人工骨材料均未发生移位以及断裂现象。在第4周时,实验组桡骨缺损区域能够发现存在非常明显的骨生成影像,呈现云雾状,且均匀分布于骨缺损区域,骨密度水平非常低,存在大量孔隙;第8周时,经X线检查,显示植入体已与缺损断端骨性愈合,骨缺损部位的骨密度水平显著增大,新骨阴影非常显著,有成骨出现,但皮质骨连续性较差;第12周时,实验组CNTs中剂量组以及高剂量组均显示,植入体已与骨缺损部位断端骨性愈合,皮质骨连续性比较理想,髓腔畅通性较好。4种不同含量的CNTs复合材料组中,随着CNTs含量逐渐增多,骨缺损愈合程度逐渐加大。(3)随着CNTs含量的逐渐增加,骨密度水平显著增大,低含量组、中等含量组与高含量组骨密度均分别显著高于对照组(低含量:4周:P<0.01;中等含量:4周:P<0.01,8周:P<0.01,12周:P<0.01;高含量:4周:P<0.01,8周:P<0.01,12周:P<0.01),同组各时间节点骨密度水平两两均存在差异,有统计学意义(低含量:4周比8周:P<0.01,4周比12周:P<0.01,8周比12周:P<0.01;中等含量:4周比8周:P<0.01,4周比12周:P<0.01,8周比12周:P<0.01;高含量:4周比8周:P<0.01,4周比12周:P<0.01,8周比12周:P<0.01)。结论碳纳米管可有效促进新骨生成.

Nup88在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

为探讨核孔蛋白88(nucleoporin 88,Nup88)在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响研究,用Western blotting检测收集胃腺癌组织中的Nup88。通过细胞转染siRNA Nup88和siRNA control抑制胃腺癌细胞中Nup88的表达。MTT检测转染后细胞增殖情况。流式细胞术检测转染后细胞凋亡情况。Western blotting检测细胞中NOTCH信号通路相关蛋白NICD1、NICD2、HES1和Cleaved Caspase-3水平。胃腺癌细胞与NOTCH信号通路抑制剂S2188作用后,检测细胞增殖和凋亡情况。结果显示Nup88在胃腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。siRNA Nup88组细胞中Nup88水平明显低于siRNA control组(P<0.01)。siRNA Nup88组细胞存活率明显低于siRNA control组(P<0.01)。siRNA Nup88组细胞凋亡率明显高于siRNA control组(P<0.01)。siRNA Nup88组细胞中NICD1、NICD2、HES1水平明显低于siRNA control组(P<0.01)。siRNA Nup88组细胞中Cleaved Caspase-3水平明显高于siRNA control组(P<0.01)。抑制剂作用后的细胞增殖凋亡趋势与siRNA Nup88组一致。由此,Nup88在胃腺癌组织中表达上调。沉默Nup88后胃腺癌细胞增殖受到抑制,凋亡增多,作用机制与NOTCH信号通路有关。