亮氨酸脑啡肽、胆囊收缩素在海洛因戒断、复吸大鼠脑VTA、NAc区神经元的表达

目的:观察海洛因戒断、复吸大鼠脑VTA、NAc内亮氨酸脑啡肽(leucine-enkephalin,Leu-Enk)和胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的变化,探讨CCK和内源性阿片肽在海洛因戒断、脱毒和复吸过程中的作用及其相互关系。方法:正常雄性SD大鼠63只,随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组。实验组大鼠又分海洛因戒断组、美沙酮脱毒组和海洛因复吸组。取实验各组及对照组大鼠脑组织,定位VTA和NAc,用免疫组化SABC法显示VTA,NAc区Leu-Enk,CCK阳性细胞并用图像分析法测定平均光密度值。结果:(1)Leu-Enk在实验各组大鼠VTA和NAc内的表达与对照组比较均显著降低(P<0.05)。(2)与对照组比较,海洛因戒断、复吸组大鼠VTA和NAc中CCK阳性细胞免疫反应增强,差异有显著性(P<0.05);经美沙酮脱毒后恢复正常。结论:海洛因戒断造成的机体应激及阿片类药物均抑制了VTA和NAc中Leu-Enk的分泌;CCK分泌增加,参与了对脑神经的保护。

适量饮用贵州某食用白酒对Ⅰ型糖尿病小鼠胰岛β细胞的影响

目的:探讨摄入贵州某食用白酒对Ⅰ型糖尿病小鼠胰岛β细胞可能的影响及相关机制。方法:正常雄性C57BL/6J小鼠通过灌胃饮酒及注射链脲佐菌素建立单纯饮酒、糖尿病、糖尿病饮酒模型,测空腹血糖,通过免疫组织化学、real-time PCR、图像分析及形态计量法观察胰岛β细胞分泌胰岛素及胰岛素mRNA表达的改变。结果:糖尿病组及糖尿病饮酒组小鼠空腹血糖升高,达到小鼠糖尿病成模标准。单纯饮酒组小鼠血糖、β细胞平均光密度、面数密度、胰岛素mRNA相对表达量无明显变化。糖尿病组及糖尿病饮酒组β细胞平均光密度值短暂升高,面数密度与胰岛素mRNA相对表达量逐渐降低。结论:在本实验设定的时程和剂量内,单纯饮用该白酒对胰岛β细胞无明显影响。适量饮用该白酒并未加重Ⅰ型糖尿病小鼠胰岛β细胞的损伤。

1型糖尿病小鼠模型构建及胰岛B细胞中胰岛素表达

目的:构建1型糖尿病(T1DM)小鼠模型,研究T1DM小鼠胰岛B细胞表达胰岛素(Ins)及血清Ins水平的变化。方法:正常雄性C57BL/6J小鼠104只,随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组;模型的诱导采用连续多次小剂量链脲佐菌素给药法(MLDSTZ)制作T1DM小鼠模型;分别于注射后第3、7、10、14、21及28天检测小鼠的空腹血糖、体重,取血清及胰腺组织,应用免疫组织化学SABC单染法观察胰岛B细胞Ins表达,图像分析、形态计量法检测Ins阳性细胞平均灰度值、计算面数密度(NA),酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Ins水平。结果:与正常及盐水对照组比较,实验组小鼠第10天以后出现明显的多饮、多尿、活动减少等典型糖尿病(DM)表现,空腹血糖水平从实验第14天开始明显升高,以第28天组最高,差异有统计学意义(P<0.01);实验组小鼠胰岛面积有所减小。胰岛Ins阳性细胞在实验第10、14及21天组染色加深,免疫反应强度增强,平均灰度值降低,差异有统计学意义(P<0.01);NA从第7天开始减小,呈逐渐下降趋势,与正常及盐水对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);实验组小鼠与对照组相比,血清Ins浓度从实验第7天后均处于较低水平。结论:T1DM模型小鼠胰岛面积减小,胰岛B细胞数量减少,合成和分泌Ins总量减少且表达下调,血清Ins水平下降。

胰岛CD68、CD22阳性细胞表达及血清IL-12、IL-4水平的改变对1型糖尿病小鼠的影响

目的探讨1型糖尿病(T1DM)小鼠胰岛表达CD68、CD22的改变,血清白介素-12(IL-12)、白介素-4(IL-4)水平的变化及可能的机制。方法正常雄性C57BL/6J小鼠104只,随机分为正常对照组、盐水对照组及实验组。小剂量多次注射链脲佐菌素(MLD-STZ)建立1型糖尿病小鼠模型,分别于第3、7、10、14、21、28天测空腹血糖,取胰尾组织及血清,通过免疫组化SABC法、酶联免疫吸附法(ELISA)及形态计量法进行研究。结果与正常及盐水对照组相比较,实验组小鼠胰岛数目减少,胰岛面积减小。实验组小鼠胰岛CD68阳性细胞的面数密度(NA)于第3天起明显高于正常对照组和盐水对照组(P<0.01),但第10天的NA在实验组相对较低。实验组胰岛CD22阳性细胞的NA值于第3天即高于正常对照组和盐水对照组(P<0.01),至第7天最高。血清ELISA结果显示,实验组小鼠血清IL-12水平自第7天开始增高(P<0.05);而血清IL-4水平与正常及盐水对照组相比有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CD68及CD22阳性细胞在T1DM早期即浸润胰岛,有可能通过抗原递呈等作用促进了T1DM的发生。实验组小鼠血清IL-12增高,IL-4减少,提示Th1/Th2细胞失衡,推测是引发T1DM的重要因素之一。

某食用白酒对大鼠血糖、胰岛素和胰高血糖素表达的影响

目的:探讨某品牌食用白酒对大鼠空腹血糖、胰岛B细胞表达胰岛素(Ins)、A细胞表达胰高血糖素(Glu)的影响。方法:正常成年雄性SD大鼠40只,随机分为实验组(EG)和正常对照组(NCG);实验组30只又分为4周组(4 w)及12周组(12 w),每周组均分为低剂量组(L组)、中剂量组(M组)及高剂量组(H组),各实验组均有5只作正常对照;实验组大鼠予相应剂量食用白酒灌胃,每日11∶00 am及5∶00 pm各灌胃1次,正常对照组不予处理;分别于第4 w末及第12 w末测空腹血糖,采用免疫组化SABC法、图像分析及形态计量法计数各组大鼠胰岛Ins阳性细胞和Glu阳性细胞、平均光密度值及面数密度值。结果:各实验组大鼠空腹血糖水平与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);各实验组Ins阳性细胞和Glu阳性细胞的分布、数量及免疫染色强度与正常对照组比较未见明显变化;与正常组比较,各实验组Ins阳性细胞、Glu阳性细胞平均光密度值差异无统计学意义(P>0.05),Ins阳性细胞、Glu阳性细胞的面数密度(NA)差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:某品牌食用白酒灌胃,在本实验设定的剂量和时程内,大鼠血糖未见明显异常,对胰岛B细胞表达Ins及NA、胰岛A细胞表达Glu和NA无明显影响。

1型糖尿病小鼠胰岛胰岛淀粉样多肽和生长抑素阳性细胞表达的改变

目的探讨1型糖尿病(T1DM)小鼠胰岛表达胰岛淀粉样多肽(IAPP)、生长抑素(SS)的改变及可能的机制。方法取正常C57BL/6J小鼠,小剂量多次注射链脲菌素(STZ)建立1型糖尿病小鼠模型,分别于第3、7、10、14、21、28天取胰尾组织,通过免疫组织化学SABC法、激光扫描共焦显微镜免疫荧光检测法及图像分析、形态计量法进行研究。结果 1.IAPP阳性细胞面数密度(NA)自第3天开始减少(P<0.05),平均吸光度自第7天开始增高,与正常及生理盐水对照组比较差异具有显著性(P<0.05);2.1型糖尿病组小鼠胰岛SS阳性细胞NA自第3天开始增加(P<0.05),平均吸光度自第7天开始增高(P<0.05);3.免疫荧光双染法显示,小鼠胰岛IAPP和SS在部分细胞有共表达。结论 1型糖尿病小鼠胰岛IAPP阳性细胞数目减少,表达增强;SS阳性细胞数量及表达均上调;IAPP和SS在部分细胞有共表达。提示IAPP阳性细胞和SS阳性细胞均参与了1型糖尿病的病变过程。

某食用白酒对大鼠睾丸间质细胞内表皮生长因子、嗜铬颗粒素A的表达及血清睾酮水平的影响

摘要目的：探讨不同时长、不同剂量的贵州某品牌54°食用白酒对大鼠睾丸间质细胞内表皮生长因子（EGF）、嗜铬颗粒素A（CgA）的表达及血清睾酮水平的变化。方法：正常成年雄性SD大鼠，随机分为正常对照组及实验组。采集血清，取睾丸组织。采用免疫组织化学SABC法、图像分析、免疫印迹、化学发光法检测。结果：免疫组织化学显示，EGF、CgA阳性产物存在于睾丸间质细胞胞质内；不同时间点实验组各剂量组EGF及CgA免疫染色强度及平均光密度无明显改变。免疫印迹结果显示，实验组各剂量组EGF蛋白表达水平均无明显改变。各实验组的血清睾酮水平与正常对照组比较未见明显异常，差异无统计学意义。结论：在本实验设定的剂量和时长内，用该品牌54°食用白酒灌胃对睾丸间质细胞内EGF、CgA的表达及血清睾酮水平无明显影响。

饮用某白酒对大鼠肾上腺髓质细胞DβH、NET表达的影响

研究摄入某白酒后,不同剂量和不同时长对大鼠肾上腺髓质细胞内多巴胺-β-羟化酶(DβH)、去甲肾上腺素转运蛋白(NET)表达的影响。将健康成年雄性SD大鼠120只,随机分为正常对照组(NCG)及实验组(EG),实验组又分为4周组(4W)、8周组(8W)、12周组(12W)、16周组(16W)、20周组(20W)5个时间点,其中每个时间点又分为3个剂量组,即低剂量组(0.8 m L/kg·d)、中剂量组(1.6 m L/kg·d)、高剂量组(2.4 m L/kg·d)。实验组大鼠予以54%vol董香型白酒灌胃,每日2次,正常对照组不予处理。分别于4 W、8 W、12 W、16 W、20 W时取材,采用免疫组化SABC法、蛋白免疫印迹法检测肾上腺髓质中DβH、NET的表达。结果表明,正常组及各实验组肾上腺髓质细胞DβH、NET阳性产物呈棕黄色或棕褐色细颗粒状,分布于肾上腺髓质细胞胞质中,各组髓质细胞阳性产物定位及免疫染色强度未见明显差异。Western-blotting显示第4 W组、第8 W组、第12 W组、第16 W组及第20 W组DβH、NET表达水平与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在本实验设定的剂量和时长内用该食用白酒灌胃后对大鼠肾上腺髓质细胞内DβH、NET的表达无明显影响。