对美国白蛾几丁质脱乙酰酶(hccda5)基因原核表达影响因素的研究

为探究影响美国白蛾几丁质脱乙酰酶(hccda5)基因在原核细胞中表达的因素,以pMD19-T-hccda5重组质粒为模板,通过PCR技术获得hccda5基因全长,与载体连接并转化BL21(DE3)构建工程菌,探索载体、IPTG浓度、培养温度、诱导时间等条件对目的蛋白表达的影响。结果表明:pET28a-hccda5在16℃诱导过夜时,目的蛋白表达量大,载体种类对基因表达有一定影响;IPTG浓度和温度对目的基因表达基本无影响;诱导时间在不同温度条件下对基因表达影响不同。本研究成功构建了hccda5基因工程菌,实现了其在原核细胞中的表达,初步确定了影响其表达的因素,为真核基因在原核细胞中的表达提供了实验依据。

流动青少年社会融合研究述评

随着我国社会经济的迅速发展,大规模的人口迁移已成为人口发展的常态化特征。在此情形下,流动青少年社会融合已成为学术界的热点议题。流动青少年在社会融合过程中存在一定的生活、学习、心理问题及行为风险,相对而言也存在一些优势。他们的社会融合状况会受到微观系统、中观系统及宏观系统的影响,因此改善这些社会生态系统有利于流动青少年的健康成长。为了进一步完善相关研究,学术界还需要从转换研究视角、加强理论建构、拓展研究内容及丰富研究方法四个层面来探讨流动青少年的社会融合。

肝移植术后新发早期食管癌行ESD:2例报道并文献复习

肝移植术后新发恶性肿瘤日益增多,现分享我中心收治的2例肝移植术后早期食管癌患者的诊疗经验。分析并总结肝移植术后新发实体恶性肿瘤和新发食管癌的发病率、危险因素,以尽早识别高危人群,制定监测方案,实现新发食管癌的早诊早治。

美国白蛾hcapn3基因的克隆及HcAPN3蛋白与Cry1Ac结合特性分析

通过比对分析已知昆虫氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)氨基酸序列并结合本实验室的美国白蛾(Hyphantria cunea)中肠iTRAQ结果,设计了hcapn3基因特异引物,获得hcapn3基因片段。通过RACE-PCR技术获得美国白蛾中肠氨肽酶N基因(hcapn3)全长序列(GenBank登录号为KJ013598)。Blastp分析表明,获得的氨肽酶属于氨肽酶N3家族,命名为HcAPN3。序列分析显示HcAPN3包括952个氨基酸残基,具有典型的谷氨酸锌化氨肽酶(Gluzincin)结构域和羧基端(ERAP1_C)结构域。利用Bac to Bac表达系统在昆虫细胞中表达108kDa的HcAPN3蛋白。在原核表达系统中表达58kDa的Gluzincin结构域和49kDa ERAP1_C的结构域蛋白。Ligand Blot分析结果显示,HcAPN3蛋白及Gluzincin结构域可与Cry1Ac蛋白特异性结合,但ERAP1_C结构域未能与Cry1Ac结合。本研究首次克隆了美国白蛾氨肽酶基因并分析了HcAPN3与Cry1Ac的结合特性,为下一步功能研究提供基础。

甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶1(SeCDA1)在毕赤酵母中的表达与活性测定

利用RACE-PCR方法,扩增得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰基酶基因secda1。将secda1基因插入到载体p PIC9K多克隆位点,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到重组质粒p PIC9K-secda1。重组质粒经线性化后,电击转化缺陷性毕赤酵母GS115感受态细胞,构建含有目的基因的重组酵母菌株。经甲醇诱导表达,Western blot分析后表明secda1基因在毕赤酵母GS115中成功表达80 k Da蛋白。脱乙酰基酶活性测定结果显示重组蛋白酶活力为1.35 U/m L。利用RT-PCR对该基因进行m RNA水平上的表达分析,结果表明secda1在幼虫取食期的头、表皮、中肠、马氏管、脂肪体及蛹期虫体均有表达;本研究利用毕赤酵母成功表达具有酶活力的重组Se CDA1蛋白,为进一步明确Se CDA1蛋白的生理功能提供条件,并为以Se CDA1蛋白为靶标更有效地防治甜菜夜蛾提供理论依据。

美国白蛾几丁质脱乙酰酶1(HcCDA1)的克隆表达与酶活测定

利用RACE-PCR方法,扩增得到编码美国白蛾Hyphantria cunea Drury几丁质脱乙酰酶基因Hc CDA1。将该基因分别在大肠杆菌BL21和毕赤酵母细胞Pichia pastoris GS115表达。经诱导表达后,Western blot分析表明Hc CDA1在大肠杆菌中成功表达61.8 k D的蛋白,符合预期大小;在毕赤酵母GS115中成功表达80 k D蛋白。酶活性试验显示酵母细胞中表达的重组蛋白酶活力为1.685 U/m L。本研究利用毕赤酵母成功表达具有酶活力的重组Hc CDA1蛋白,为进一步明确该蛋白的生理功能提供条件。

氢氧化钙糊剂联合根管治疗术治疗牙髓炎或根尖的临床疗效观察

目的观察分析氢氧化钙糊剂联合根管治疗术治疗牙髓炎或根尖炎的临床治疗效果。方法选取2017年1月～2017年12月辽河油田总医院收治的牙髓炎或根尖炎患者98例进行研究,以随机数字表法分为对照组48例和观察组50例,两组患者均采用根管治疗术治疗,对照组采用氧化锌碘仿丁香油糊剂进行根管填充,观察组则采用氢氧化钙糊剂填充根管。对比两组患者的治疗效果。结果观察组患者的治疗总有效率比对照组高,治疗后的疼痛程度评分低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论氢氧化钙糊剂联合根管治疗术治疗牙髓炎或根尖炎,临床治疗效果显著,术后的疼痛程度比较轻。

根管治疗的慢性根尖周炎患者使用氢氧化钙糊剂进行根管消毒和充填的效果分析

目的对氢氧化钙糊剂在慢性根尖周炎根管治疗中根管消毒及充填效果进行探讨。方法选取我院2016年7月至2017年7月期间收治的慢性根尖周炎行根管治疗的114例患者,随机分为观察组与对照组,各57例,根管消毒与充填方面,对照组采用樟脑酚,观察组采用氢氧化钙糊剂,对两组应用效果进行对比。结果治疗总有效率方面,观察组(96.49%)明显高于对照组(84.21%),P<0.05;术后患牙细菌检出率方面,观察组(10.53%)明显低于对照组(28.07%),P<0.05。结论对慢性根尖周炎根管治疗中根管消毒及充填应用氢氧化钙糊剂,对治疗效果的实现具有促进作用,可有效对患牙内细菌进行灭杀,值得推广。

流动儿童社会融合影响因素的研究述评——以社会生态系统为视角

在社会主义市场经济的蓬勃发展下,人口流动的形势日益活跃。社会融合已然成为一个重要的研究领域。文章以社会生态系统观作为理论支撑,从微观系统、中观系统和宏观系统三个层面对流动儿童社会融合的影响因素进行梳理与分析。最后进行总结与展望,认为流动儿童社会融合是一个庞大的整体系统,各系统之间是相互影响、相互作用的;各个系统的力量大小不一,它们之间的保护因子与风险因子在不断地进行着较量,从而影响流动儿童社会融合的状况。因此,流动儿童社会融合系统之间的相互作用和补充机制值得进一步探讨。

牡蛎壳负载壳聚糖去除水中活性红152

以牡蛎壳(OS)为原料制备一种新型牡蛎壳负载壳聚糖(CCOS)吸附剂,并利用电镜扫描(SEM)、红外(FTIR)、X射线衍射(XRD)及热重(TG)分析等方法对吸附剂样品进行表征.同时,研究了吸附剂对活性红152(RR152)的吸附性能,考察了壳聚糖与牡蛎壳质量比、溶液pH值、吸附剂用量、活性红152起始浓度、吸附时间和温度对吸附的影响.结果表明,壳聚糖与牡蛎壳质量比为0.08,pH值为2时,活性红152的去除率达最大值;活性红152的去除率随着吸附剂用量的增加而增大,当吸附剂用量为0.3g时,活性红152的去除率达83.3%.吸附容量也随着起始浓度的增加而增大,并在150min达到吸附平衡.运用3种动力学模型对吸附过程进行拟合,结果表明,吸附过程可以很好地用准二级动力学方程描述.吸附等温线用Langmuir方程的拟合效果优于Freundlich和Tempkin方程,最大吸附容量在298.15、303.15、308.15和318.15K下分别为135.14、142.86、144.92、149.25mg·g-1.在热力学研究中,ΔG0<0、ΔH0>0、ΔS0>0,表明此吸附过程是自发、吸热和熵增加的过程.解吸实验表明,吸附剂用碱液处理再生后,可循环使用4次.

小麦生物育种:进展、机遇和挑战

小麦生产关乎国家的粮食安全。品种改良是保持和提高产量的关键。传统育种技术为保障小麦生产做出重要的贡献。小麦需求的不断增加,对育种提出了更高的要求。小麦生物育种技术的快速发展,为进一步提高育种效率提供了新的策略。本文总结了转基因、基因组编辑、基因克隆、分子标记辅助选择和全基因组选择等小麦生物育种技术的最新研究进展,以及生物育种与常规育种、快速育种相结合,在提高小麦育种效率方面的应用。

一次性与常规根管治疗术对急性牙髓炎的治疗价值对比

目的:探讨一次性与常规根管治疗术对急性牙髓炎的应用效果。方法:选择2016年12月～2017年12月本院收治的急性牙髓炎患者60例为研究对象,均分为两组,对照组为常规根管治疗术,观察组为一次性根管治疗术,对比两组治疗情况。结果:治疗后,两组的疼痛评分低于治疗前,观察组低于对照组,观察组的总有效率93.33%高于对照组的77.67%,统计学有意义(P<0.05)。结论:一次性与常规根管治疗术对急性牙髓炎均有一定程度疗效,两种方法进行比较,一次性根管治疗术的疗效更高,疼痛减轻更显著。