利用UHPLC-ESI-MS/MS法测定川陈皮与其混伪品中的黄酮类成分

为研究区分川陈皮与其常见混伪品,采用UHPLC-MS/MS对川陈皮与其常见混伪品的黄酮类成分进行分析,并利用基于代谢物信息公共数据库对UHPLC-MS/MS检测的一级谱、二级谱数据进行定性分析,并采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以及聚类分析三种方法对化合物进行分析。依靠数据库共鉴定出228种黄酮类化合物,其中多酚12种、花青素21种、黄酮类132种、黄酮醇36种、黄烷酮20种、异黄酮7种,川陈皮中鉴定出特有化合物15种,混伪品中鉴定出特有化合物16种,通过PCA、OPLS-DA以及聚类分析均可将川陈皮与其混伪品准确地区分开来。结果表明基于UHPLC-ESI-MS/MS技术的代谢组分析方法可有效区分川陈皮与其混伪品,可以作为一种川陈皮与混伪品区分以及差异性评价的有效方法,并为其它中药材品种的真伪鉴别以及质量评控提供参考。

中药白及抑制酪氨酸酶及清除DPPH自由基的有效部位筛选及其制备工艺考察

目的:对白及不同提取物的抗氧化活性和对酪氨酸酶的抑制作用进行考察,筛选具有抗氧化及美白作用的功效部位,为白及的综合利用开发提供依据。方法:采用水、70%乙醇、70%乙醇提取后水提等提取方式分别对白及进行回流提取,酪氨酸酶抑制法及DPPH自由基清除试验对各提取部位进行相关活性比较。以酪氨酸酶抑制率及DPPH自由基的清除率为指标,对醇提浓度及具体制备工艺进行考察。结果:白及水提物具有促进酪氨酸酶活性作用(-96.78%),其作用随反应时间延长而减弱,白及醇提物对酪氨酸酶具有良好的抑制率(68.36%),而醇提后水提物对酪氨酸酶呈现出先抑制后促进的作用,而后促进作用减弱;白及醇提物与水提物具有一定的清除DPPH自由基能力,其中醇提物抗氧化能力较高,为37.13%,而醇提水提物有增强自由基活性作用(为-43.73%)。综上结果得出,白及醇提物对酪氨酸酶具有良好的抑制作用,对DPPH自由基具有一定的清除作用。因此对醇提部位进行提取浓度、用量及提取时间、次数的考察,结果以95%乙醇,用量为100倍,提取时间为2 h,共提取1次,所得提取物的酪氨酸酶抑制率及DPPH自由基清除率较高。结论:白及具有一定的抗氧化及美白功效,其中具体活性成分尚需进一步研究。

两基原中药决明子中蒽醌类成分含量比较研究

目的:研究比较两基原中药决明子中蒽醌类成分含量,分析不同基源决明子产生非等效泻下作用的物质基础差异。方法:采用一测多评(QAMS)法,以大黄素为内参物,同时测定决明子中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄酸、黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量;采用紫外分光光度法(UV)测定决明子中游离蒽醌、结合蒽醌及总蒽醌含量;采用SIMCA-P11.5对含量测定结果进行PLS数理统计分析。结果:总蒽醌、游离蒽醌及结合蒽醌在决明中含量分别为1.41%~2.29%、0.21%~0.62%、1.51%~1.93%,在小决明中分别为0.77%~1.34%、0.13%~0.52%、0.52%~1.16%;PLS分析7种蒽醌类成分的VIP分别为1.15、1.12、0.69、0.90、1.21、1.15、0.52。结论:建立的QAMS方法重现性良好,测定的10批次决明样品中3批次大黄酚含量不合格,10批次小决明中6批次橙黄决明素不合格,7批次大黄酚不合格,决明中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素、黄决明素含量均比小决明高;决明中总蒽醌、游离蒽醌及结合蒽醌含量均普遍高于小决明;决明中蒽醌类成分的差异主要由于大黄素、橙黄决明素、大黄酚、芦荟大黄素含量不同。

白术麸炒过程中单糖和二糖组成及含量变化规律研究

目的:研究白术麸炒过程中单糖和二糖组成及含量变化规律,为阐述白术炮制原理提供参考依据。方法:采用四川新荷花饮片公司稳定的炮制工艺制备白术炮制样品,炮制过程中每隔2 min取样一次,共炮制2批麸炒白术样品和不同时间点的蜜麸样品;采用二维红外成像仪测量炒制不同时间点的饮片温度;采用HPLC-ELSD检测白术和蜜麸样品中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量。结果:白术在麸炒过程中,随炮制时间延长,果糖、葡萄糖和蔗糖含量逐渐降低,当饮片温度达到150℃~160℃时,葡萄糖含量突然降为0;温度达到170℃~190℃时,果糖和蔗糖含量突然降为0;生品麦麸中不能检测出果糖、葡萄糖和蔗糖,蜜麸中果糖、葡萄糖和蔗糖含量在2 min之前急剧增加,之后开始下降,但始终比炮制前含量高;白术在炮制过程中会有甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖色谱峰的增加。结论:白术在麸炒过程中果糖、葡萄糖和蔗糖含量的变化与饮片温度具有相关性;辅料蜜麸对白术饮片中的单糖及二糖具有吸附作用;初步推断白术多糖与单糖之间存在转化关系。

白及粉品种近红外快速定性鉴别模型的建立

目的:采用近红外光谱技术建立白及粉的定性分析模型,为快速判别白及粉入药品种提供简便方法。方法:采集不同品种白及粉样品的近红外光谱图,采用聚类分析方法建立白及粉末鉴别模型,并进行模型的外部验证和内部验证。结果:在4 000~10 000 cm-1光谱范围内白及与其同属黄花白及、小白及的粉能够分别聚为一类,内部验证准确率达到100%,外部验证准确率达到90%。结论:采用近红外光谱技术鉴别白及粉准确、快速、简便,可为白及同属药材的鉴别提供快速鉴别方法。

白及与其混伪品ITS2序列二级结构比较与鉴别

目的:利用DNA条形码技术通过ITS2序列对白及及其混伪品进行快速、准确鉴别。方法:采用植物基因组DNA提取试剂盒提取白及及其混伪品基因组DNA,对全部收集样品的ITS2序列进行PCR扩增和测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA7.0软件进行数据分析计算物种种间种内Kimura2-parameter(K2P)遗传距离。采用最近距离法及基于ITS2序列构建Neighbor-joining(NJ)系统聚类树,结合ITS2序列二级结构相比对的方法鉴别分析。结果:K2P遗传距离及NJ聚类树均显示只能鉴别出白及属与其他科属物种,区分不开白及属内3个物种,结合ITS2二级结构进一步鉴定,可将白及属的各个种及其他科属混伪品准确地鉴别出来。结论:利用ITS2序列作为DNA条形码,结合ITS2序列的二级结构可以有效地鉴定白及及其混伪品。

决明子水煎剂降低营养性高脂血症大鼠血脂量效关系研究

目的:研究决明子水煎剂对营养性高脂血模型大鼠血清血脂和肝脏组织中脂质的量效关系,为药食同源中药决明子的安全、有效、合理使用提供参考。方法:采用高脂饲料喂养的方法建立营养性高脂血大鼠模型,分别给予0.315、0.945、1.575、3.15、6.3 g/kg 5个决明子水煎剂剂量,通过检测不同剂量决明子水煎剂对动物血清中甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、动脉粥样硬化指数(AI)5项指标及肝组织中TC、TG、丙二醛(MDA),总超氧化物歧化酶(T-SOD)项指标,经Graph Pad Prism 5.0软件拟合量效曲线,评价决明子水煎剂降低营养性高脂血症大鼠血脂量效关系,计算相关剂量阈参数。结果:决明子水煎剂对高脂血症大鼠血清血脂5项指标量效曲线呈良好的"S"型,剂量阈[D]20-[D]80和阈剂量[D]20多集中在0.599~4.108 g/kg范围内,肝脏组织中脂质4项指中有3项指标量效曲线呈良好的"S"型,剂量阈[D]20-[D]80和阈剂量[D]20多集中在0.639~1.795 g/kg范围内。结论:决明子水煎剂降低营养性高脂血模型大鼠血清血脂和肝脏组织中脂质量效曲线呈良好的"S"型,且其阈剂量均在0.599~0.639 g/kg,提示中剂量为有效剂量范围,折合成人体用量约为5.705~6.086 g,进一步验证后可为药食同源中药决明子的合理使用提供参考。