TPGS修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物载药胶束制剂的冻干保护剂筛选及稳定性研究

目的优选载紫杉醇(PTX)聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物胶束(PTX/TPGS-CR胶束)制剂的冻干保护剂,并对该制剂的稳定性进行初步评价。方法以PTX/TPGS-CR胶束制剂的外观、复溶性、粒径、多分散系数、载药量及包封率作为指标,以不同浓度甘露醇、葡萄糖、乳糖、蔗糖作为冻干保护剂单用和复合使用,对制剂冻干效果进行评价,筛选最佳冻干保护剂;并对添加了最佳冻干保护剂的PTX/TPGS-CR胶束冻干制剂复溶后3 d稳定性及冻干制剂室温放置6个月稳定性进行考察。结果0.4%蔗糖作为冻干保护剂的PTX/TPGS-CR胶束制剂具有良好的外观及复溶性、较小的粒径与多分散系数、较高的载药量和包封率;复溶后3 d内稳定性良好。在室温环境下储存6个月,制剂的外观、粒径及多分散系数、包封率及载药量均无明显变化。结论选取0.4%蔗糖作为PTX/TPGS-CR胶束的冻干保护剂,复溶及常温下储存6个月均较稳定。

“林木救生丹”类祖方治疗心脑血管类疾病30例疗效观察

应用“林木救生丹”合“天德心太安”两个方剂为基础，调治各种类型心脑血管疾病３０例，获得比较满意的疗效。

载紫杉醇的大黄酸偶联物胶束在荷瘤小鼠体内药效学研究

目的 研究载紫杉醇(paclitaxel, PTX)的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物胶束(PTX/TPGS-CR胶束)在荷瘤小鼠体内的药效学。方法 测定PTX/TPGS-CR胶束的pH值及渗透压。采用Balb/c小鼠建立4T1皮下移植瘤模型,以Taxol^(■)作为阳性对照,以肿瘤生长曲线、抑瘤率等为主要考察指标,通过观察小鼠的体质量变化、脏器指数、病理组织HE染色切片,测定各组肿瘤组织样品P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达情况,考察PTX/TPGS-CR胶束的安全性和有效性。结果 PTX/TPGS-CR胶束溶液的pH值与0.9%氯化钠注射液的pH值相近(5.0~7.0),渗透压为736.6~757.2 kPa。Taxol^(■)和PTX/TPGS-CR胶束低、中、高剂量组的抑瘤率分别为29.91%、20.87%、41.06%及41.84%。PTX/TPGS-CR胶束制剂的抑瘤效果优于同剂量Taxol^(■)(P<0.05),且对抑瘤效果显示剂量依赖性特征。给药期间,同等剂量下PTX/TPGS-CR胶束组小鼠体质量、器官未受到明显的影响,证明其安全性良好;肿瘤组织P-gp表达结果显示TPGS-CR胶束具有抑制P-gp表达的作用。结论 PTX/TPGS-CR胶束制剂是一种高效、低毒的纳米制剂;其具有良好的抑瘤效果,能降低PTX的毒副作用;并能通过抑制P-gp表达从而提高肿瘤细胞对PTX的敏感性,有利于肿瘤的治疗。

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像研究

目的探究载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像情况。方法将环境响应型荧光探针P4/P2与药物PTX共载于mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束中,制备(P4+PTX)/CRmP胶束。以MCF-7细胞为细胞模型,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析该胶束被MCF-7细胞摄取的情况;以H22皮下移植瘤小鼠为模型,在体和离体成像分析该胶束在体内的分布情况。结果(P4+PTX)/CRmP胶束以完整的胶束形式被MCF-7细胞内吞摄入,分布于细胞质。(P2+PTX)/CRmP胶束在荷瘤小鼠的肝脏和肿瘤部位较多聚集,并于实验时间内在肿瘤部位不断累积。结论该胶束以完整的胶束形式被肿瘤细胞摄取,在体内有一定的肝靶向性和肿瘤靶向性。

基于UPLC-MS/MS的大黄酸偶联物载药胶束在大鼠及比格犬体内药动学研究

目的建立准确可靠的大鼠、比格犬体内紫杉醇(paclitaxel,PTX)血药浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)含量测定方法,对大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注泰素Ⓡ(TaxolⓇ)注射液和载紫杉醇的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitosan,CMCS)-大黄酸(rhein,Rh)偶联物(PTX/TPGS-CR)纳米胶束后的药动学进行研究。方法测定PTX/TPGS-CR胶束与0.9%氯化钠注射液、质量分数5%葡萄糖注射液输液配伍稳定性。血浆样品采用甲基叔丁基醚进行提取,通过UPLC-MS/MS分析测定大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注PTX/TPGS-CR胶束和TaxolⓇ后血浆样品中的药物浓度,绘制药-时曲线并计算药动学参数。结果PTX/TPGS-CR胶束在0.9%氯化钠注射液复溶后8 h内粒径均无明显变化,无沉淀现象,粒径和多分散系数(polydispersity,PDI)较小。PTX/TPGS-CR胶束在大鼠和比格犬体内均符合三室模型分布。在大鼠体内,PTX/TPGS-CR胶束与TaxolⓇ的生物半衰期(biological half-life,t1/2)分别是70.93、4.98 h。与TaxolⓇ相比,PTX/TPGS-CR胶束的t1/2、平均滞留时间(mean residence time,MRT)明显延长,药-时曲线下面积(area under the cure,AUC)显著增加,分布更广且清除率(clearance,CL)更低,初步验证了PTX/TPGS-CR胶束在体内的长循环特征,并且能够提高PTX的生物利用度;在比格犬体内药动学结果显示,PTX/TPGS-CR胶束与TaxolⓇ的t1/2分别是113.09、30.37 h,MRT0-∞分别为145.02、35.78 h,PTX/TPGS-CR胶束也能延长PTX在比格犬体内的t1/2和MRT。结论PTX/TPGS-CR胶束能明显改善PTX在体内的药动学特征。