群体感应分子3OC12HSL对小鼠生长、血液和肠道的影响

本研究旨在探讨群体感应分子3OC12HSL对小鼠生长、炎症因子及肠粘膜屏障的影响。采用高剂量盐酸林可霉素灌胃方法建立小鼠腹泻模型,对正常小鼠和腹泻模型小鼠分别灌胃生理盐水、二甲基亚砜(DMSO)、溶于DMSO的3OC12HSL溶液。结果显示,灌胃3OC12HSL降低正常小鼠和腹泻小鼠的增重,提高血清中D-乳酸、TNF-α含量,降低大肠长度及空肠和回肠绒毛长度(P<0.05);腹泻提高血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量,降低空肠及回肠绒毛长度(P<0.05);灌胃3OC12HSL和腹泻对回肠绒隐比有协同降低趋势,但差异不显著(P>0.05)。综上,3OC12HSL不利于小鼠的生长,腹泻可能加重3OC12HSL的影响。

外源枯草芽孢杆菌对青贮番茄秧中菌群及龙葵素的影响

为促进番茄秧的饲料化利用,本试验将新鲜番茄秧粉碎后分别添加麸皮以及麸皮和枯草芽孢杆菌混合物,塑料袋青贮,研究外源枯草芽孢杆菌对青贮新鲜番茄秧中土著菌群及龙葵素含量的影响。结果显示,枯草芽孢杆菌增加了青贮番茄秧中乳杆菌的含量,降低龙葵素含量及溶液pH值,但对体外培养液中龙葵素含量无影响。推测枯草芽孢杆菌可能通过植物乳杆菌等土著菌酸解龙葵素,建议番茄秧青贮时适量添加枯草芽孢杆菌。

群体感应分子3OC12HSL对猪回肠上皮细胞IPI-2I的影响

探讨群体感应分子3-氧代十二酰基高丝氨酸内酯(3OC12HSL)不同浓度和作用时间对猪回肠上皮细胞IPI-2I凋亡的影响及可能的作用机制。3OC12HSL浓度为0、50、100、200、400μmol/L,作用细胞时间分别为4、8、12、24 h。CCK-8法检测细胞活性,ELISA检测炎症因子水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测凋亡相关基因的mRNA表达水平。结果显示,200μmol/L 3OC12HSL作用8 h,显著抑制IPI-2I细胞活性,抑制效果呈时间和浓度依赖性;200μmol/L 3OC12HSL极显著升高促炎因子IL-6、IL-8、IL-1、TNF-α的浓度(P<0.01);100μmol/L 3OC12HSL作用12 h时,IPI-2I细胞凋亡而极显著提高(P<0.01);作用12 h后,100μmol/L 3OC12HSL显著提高细胞凋亡关键基因Bax表达水平(P<0.05),极显著提高Fas、Caspase8、Caspase3表达水平(P<0.01),400μmol/L 3OC12HSL显著降低Bcl-2表达(P<0.05)。结果表明一定浓度的3OC12HSL可降低细胞活性,诱导细胞炎症,引起细胞凋亡,不利于生猪健康。

F_1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究

为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性。本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪。对繁殖得到的F1代个体进行PCR、荧光定量PCR及Western blot检测,对屠宰的4头阳性猪采用绝对定量PCR进行转基因拷贝数鉴定,F1代个体达100kg左右时抽样屠宰进行肉质及抗氧化性能测定。结果表明,F1代阳性率为30.23%。阳性组CuZnSOD在5种组织中的RNA和蛋白水平上的表达量较阴性组均上调。本试验得到的标准曲线:ΔCt=-3.121 6lgN+17.281(R2=0.992 1,P<0.001),4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为25.89、80.61、106.69、83.03。肉质及抗氧化性能测定结果显示,阳性组肌肉滴水损失显著低于阴性组(P<0.05);阳性组肌肉T-SOD1d、T-SOD2d活性显著高于阴性组,MDA1d、MDA2d含量显著低于阴性组(P<0.05)。研究结果表明:CuZnSOD基因的过表达可以提高肌肉的抗氧化性能,降低滴水损失,进而改善肉质,同时,证明磁性纳米颗粒介导的精子载体法可以用于制备转基因动物。

外源益生菌对塑料袋发酵全株青绿玉米霉变的影响

本试验旨在确定塑料袋发酵全株青绿玉米中霉变真菌的属性,研究添加益生菌(含有乳酸菌与枯草芽孢杆菌)对霉变的影响。将乳熟期全株青绿玉米粉碎后分为两部分,分别添加益生菌及不加菌,进行塑料袋厌氧发酵,后分别取霉变全株玉米及无霉斑正常全株玉米检测。结果显示,霉变真菌为假丝酵母、烟红曲霉和酿酒酵母,霉变增加烟红曲霉多样性,而加菌减少酿酒酵母多样性;霉变提高酵母含量、pH、丙二醛含量、NADH氧化酶活性等指标值(P<0. 01),减少乳酸菌含量及乳酸脱氢酶活性(P<0. 05);添加外源菌提高未霉变玉米中的乳酸菌含量,也提高霉变玉米中的酵母含量,降低霉变玉米的总抗氧化能力和乳酸脱氢酶活性(P<0. 05)。对于全株玉米的乳酸菌和酵母含量,霉变和加菌互作效应显著(P<0. 05)。因此建议添加外源菌预防玉米霉变时应考虑乳酸菌和酵母的互作。

生长育肥猪无抗饲养——异位发酵床养殖技术

一、品种选择依照当地免疫程序选择的健康生猪。二、猪舍建设1.建筑方向要求坐北朝南,东西走向。两栋猪舍之间的距离不宜小于7米,最好用绿化带隔离。2.猪舍的跨度宜采用2~12米,檐口高度一般不低于2.1米,双坡屋顶的坡度宜为1:3~1:4。3.屋顶采用遮光、隔热、防水的材料制作,应设置屋顶天窗或通气窗(孔),以利空气流通和除湿。

喷淋益生菌溶液对猪舍环境及猪行为的影响

本试验以喷水为对照,研究喷淋益生菌液对猪舍环境及生猪行为的影响。监测喷淋前及喷淋后0、0.5、1.0、1.5 h时舍内温湿度、有害气体、微生物含量等环境指标和猪走动、躺卧、圈友操纵等行为指标的变化。结果显示,与喷淋前相比,喷淋菌液和水后0 h时舍内湿度大幅增加,温度略有降低,氨气、硫化氢和甲烷的浓度以及细菌和真菌的含量显著降低,猪改躺卧为走动;与喷淋后0 h相比,喷淋后0.5 h及1.0 h时的湿度、氨气、硫化氢和甲烷的浓度、真菌的含量及0.5 h时猪走动次数皆降低;与喷水相比,喷淋菌液对温度、湿度及猪躺卧、走动及圈友操纵行为影响不显著,但显著降低舍内氨气、硫化氢、甲烷浓度及细菌和真菌含量。表明喷淋菌液有利于改善猪舍内环境,有益生猪健康。

青贮玉米汁与林可霉素对小鼠生长和生理生化指标的影响

本试验研究饮用青贮玉米汁对小鼠生长、肠道及血液等指标的影响,旨在促进减抗替抗及玉米资源的利用。144只小鼠随机均分为4组,分别饮用蒸馏水(对照)、5%和10%的玉米汁及60mg/L的抗生素(林可霉素)水溶液,测定其生长性能、排便指标、小肠推进指标、血清指标等。结果显示,和对照组相比,5%玉米汁处理组和抗生素组小鼠平均日增重显著升高(P<0.05),血清瘦素、雌激素含量显著降低(P<0.05);5%玉米汁处理组小肠重量与小肠长度的比值显著高于对照组和其他处理组(P<0.05),6h内排粪粒数、绒毛长度与隐窝深度比值均高于其他组。这表明饲喂5%的玉米汁可替代林可霉素。

猪Nrf2基因克隆、生物信息学分析及启动子区转录活性分析

旨在了解猪Nrf2基因的结构和功能,研究Nrf2基因的转录调控机制。本研究选取6头90 kg左右的健康大蒲莲猪为试验动物,采用cDNA末端快速克隆技术(RACE)和染色体步移技术获得大蒲莲猪Nrf2基因完整的cDNA序列和启动子区域,利用生物信息学软件分析Nrf2基因及其启动子区域的生物学特征。结果,Nrf2基因cDNA全长2 358 bp,包括87 bp的5′UTR,495 bp的3′UTR序列,CDS区大小为1 776 bp,编码591个氨基酸。对预测蛋白质序列进行生物信息学分析,蛋白分子量为66.402 7 ku,理论等电点(pI)为4.66,大部分二级结构为α-螺旋。采用染色体步移技术扩增得到5′侧翼序列2 091 bp的片段。Nrf2基因5′侧翼区经预测含有典型的TATA-box,不含CpG岛。构建不同长度启动子片段的pGL3-Basic表达载体,转染293T细胞后经双荧光素酶活性检测,提示在-903^-710 bp区域内可能存在正调控区或增强子,生物信息学预测其中含有多个转录因子结合位点,可能参与Nrf2基因转录调控。本研究成功获得了Nrf2基因完整的cDNA序列和启动子区域,并且发现-903^-710 bp为核心启动子,本研究为猪抗氧化应激的遗传改良提供一定理论基础。

浅议学前教育中的潜课程

浅议学前教育中的潜课程李川皓７０年代初，世界性“反理性文化运动”兴起，认为人类活动实际上在许多情况下是“非理性”的和偶发的，认为所谓的科学量化分析与推论，实际上并无法完全解释复杂而开放的人类世界。在这种文化哲学的背景下，传统教育受到了冲击。过去课程忽...

饲喂青绿全株玉米对育肥猪肉质特性及抗氧化性的影响

为研究饲喂青绿全株玉米对育肥猪肉质特性及抗氧化性的影响,试验选取健康无病、体重相近的杜长大三元杂交保育仔猪32头,随机分为4个组,每组8个重复(单栏饲养)。对照组全程饲喂标准全价日粮,试验1组、试验2组和试验3组分别按生长期20%、30%、40%,育肥期40%、50%、60%比例的青绿全株玉米替代全价日粮进行饲养,至平均约100 kg体重时,每组抽样屠宰6头,进行胴体和肉质性能测定。研究结果表明:各组试验猪在肉色、大理石纹、肌肉pH值、拿破率、烹饪损失以及肌肉中干物质、粗蛋白、肌内脂肪、粗灰分含量等肉质性状方面差异不显著(P>0.05);但在剪切力、失水率和滴水损失等肉质性状方面差异显著(P<0.05)。与对照组相比,试验1组的肌肉剪切力值降低(即嫩度提高)7.41%(P<0.05),试验1组、2组和3组的肌肉失水率分别降低6.63%(P<0.05)、5.75%和1.50%(p>0.05),滴水损失分别降低5.58%(P<0.05)、1.21%和1.70%(P>0.05)。此外,与对照组相比,试验1组、2组和3组的肌肉T-SOD活性分别提高5.90%(P<0.05)、2.18%和-3.43%(P>0.05),MDA含量分别降低21.62%(P<0.05)、10.81%和18.92%(P>0.05)。本试验研究证明,从保持和改善肉质的角度,生长育肥猪饲喂青绿全株玉米是可行的,但饲喂比例宜控制在生长期20%-30%、育肥期40%~50%。

西藏藏猪血液生化指标及宰后肌肉抗氧化性能研究

为掌握西藏藏猪血液的生化指标及其抗氧化性能,并进一步探讨宰后肌肉抗氧化性能的变化,本研究对国家级保护区内的3个西藏藏猪群体进行了血液和肌肉的测定。结果表明,在3个西藏藏猪群体的血液指标中,只有AST、ALP、TP、CK、GLU和LDH存在显著差异(P<0.01),其他生化指标均差异不显著;而且血液和宰后肌肉的抗氧化性能指标均差异不显著。但随存放时长的增加,西藏藏猪屠宰后肌肉SOD和T-AOC含量均逐渐下降;但是,肌肉中MDA的含量则呈现升高趋势。结果提示,西藏藏猪不但对高海拔低氧具有适应特性,而且宰后肌肉还具有独特的抗氧化性能和猪肉品质,研究结果为西藏藏猪遗传资源的保护利用提供了理论依据。

实时荧光定量PCR法检测转基因猪外源基因整合拷贝数

以GFP转基因猪为研究对象,以转铁蛋白受体基因为内参基因,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR建立针对外源基因GFP和内参基因的双标准曲线和方程。对转基因猪基因组DNA中外源基因和内参基因的拷贝数同时定量检测,外源基因与内参基因起始模板拷贝数的比值即为外源基因在转基因猪中的整合拷贝数。同时,利用Southern-blot进行验证分析。结果显示:实时荧光定量PCR法检测2头转基因阳性猪外源基因拷贝数分别为3和2,2头转基因阴性猪外源基因拷贝数均为0,结果同Southern-blot检测一致。结果表明:实时荧光定量PCR法高通量、灵敏、方便,可以更好的用于转基因猪外源基因整合拷贝数的检测。

基于生成对抗网络学习被遮挡特征的目标检测方法

实际生活中目标间存在的遮挡会造成待检测目标的特征缺失,进而使得检测准确度降低.鉴于此,提出一种用于被遮挡特征学习的生成对抗网络(generative adversarial networks for learning occluded features,GANLOF).被遮挡特征学习网络分为被遮挡特征生成器、鉴别器两个部分.首先对数据集生成随机遮挡,作为模型的输入;然后利用生成器恢复被遮挡图片的池化特征,通过鉴别器区分恢复后的被遮挡池化特征与无遮挡图片池化特征,同时使用检测损失监督生成器,使恢复的被遮挡特征更准确.所提出被遮挡特征学习网络可以作为组件插入到任意的两阶段检测网络中.与Faster RCNN等已有模型相比,所提出模型在PASCAL VOC2007和KITTI数据集上的mAP (mean average precision)指标均有不同程度的提升.