紫杉醇的生产研究

从化学合成、植物提取、微生物发酵三方面叙述了紫杉醇生产的思路和基本方法,对各种思路的可行性和方法的优劣势进行了比较和分析。目前进行紫杉醇工业化生产的传统方法为从红豆杉科植物中提取获得,较为有产业前景和优势的方法为红豆杉科植物细胞培养生产紫杉醇,采用微生物特有的育种技术筛选具有紫杉醇高产能力的内生菌进行发酵生产紫杉醇也是一个极其吸引人的研究领域。

几种促进剂的添加时间对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响

采用正交实验检测中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilger) Rehd.]细胞悬浮培养中水杨酸、硝酸银、氨基酸前体、D-果糖和硫酸镧的添加时间对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。这些促进剂的添加时间对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长没有明显的影响,但能明显促进紫杉醇的合成,当在细胞培养的第14d添加1.67mg/L硝酸银,第18d添加0.1mg/L水杨酸,第21d添加氨基酸前体,第21d添加10g/LD-果糖和2mg/L硫酸镧时对紫杉醇的促进作用最明显,在此最优组合处理时紫杉醇含量达到10.05mg/L,相对于最差组合处理时紫杉醇含量仅有1.77mg/L,紫杉醇含量提高5.7倍,这些因素的添加时间对紫杉醇合成的相互作用达不到显著水平。

红豆杉细胞悬浮培养中不同添加物对细胞生长和紫杉醇合成的影响

采用正交实验检测红豆杉〔Taxuschinensis (Pilger)Rehd .〕细胞悬浮培养中水杨酸、D 果糖、甘露醇和硫酸镧对细胞生长和紫杉醇 (taxol)积累的影响。添加 10g/LD 果糖 ,可使细胞的鲜重和干重明显增加 ;添加 6 0 g/L甘露醇使细胞的鲜重和干重明显减少 ;1mg/L水杨酸仅使细胞鲜重增加 ,对干重影响不明显 ;硫酸镧对细胞生长无明显影响。单独添加这 4种物质 ,紫杉醇含量均下降 ,同时添加 10 g/LD 果糖和 2mg/L硫酸镧 ,紫杉醇含量明显增加 ,比对照提高 12 7% ,这可能是它们协同促进作用的结果。

红豆杉细胞培养中紫杉醇高产细胞株的筛选及其稳定性分析

对中国红豆杉〔Taxus chinensis(Pilger)Rehd.〕、云南红豆杉(T. yunnanensis Cheng et L.K.Fu)和东北红豆杉(T. cuspidata Sieb.et Zucc.)不同部位的愈伤组织进行培养及分析比较。结果表明,中国红豆杉愈伤组织生长较快,其叶片诱导的愈伤组织紫杉醇含量较高,且紫杉醇含量与培养物的外观特征有明显相关性,颜色浅、块状或颗粒较明显的细胞团紫杉醇含量较高。运用细胞看护培养技术,从中国红豆杉愈伤组织中筛选出生长速率达0.52g.L-1.d-1、紫杉醇含量超过0.01%的细胞优株,经20次继代培养,其生长和紫杉醇含量均较稳定。

^(188)Re-HEDP 治疗前列腺癌的研究进展

^(188)Re-HEDP是一种放射性药物,用于治疗肿瘤骨转移患者,目前尚未上市。有大量临床研究显示^(188)Re-HEDP在前列腺癌骨转移患中的效果显著,能有效延长患者的生存期,同时减少骨痛,且不良反应少。本文结合国内外相关研究,对^(188)Re-HEDP在前列腺癌中的研究进展做一综述,为临床用药提供参考。

HPLC法测定红豆杉细胞培养物中的α-萘乙酸

建立高效液相色谱法检测红豆杉细胞培养物中萘乙酸残留的方法。细胞培养液直接用二氯甲烷萃取,鲜细胞用99%乙醇浸提后,再用二氯甲烷萃取,分别得到回收率均达到87%以上的萘乙酸试样,色谱分离采用Nova-pak C18柱,柱温30℃,紫外检测波长为281 nm,进样体积5μL,外标法定量。结果显示萘乙酸的质量在0.001～0.125 ug(R=0.9998)范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,萘乙酸在细胞培养液中的检出限为0.02 mg/L,在鲜细胞中的检出限为0.2 mg/kg。本方法简便快速、灵敏度高,可监测红豆杉细胞培养生产紫杉醇过程中萘乙酸的残留。

HPLC法测定红豆杉中紫杉醇及同系物的含量

建立了HPLC法测定红豆杉枝叶中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ（简称10-DABⅢ）、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱和紫杉醇的含量。采用二种流动相系统分别测定南方红豆杉枝叶中四种成分，以较大极性的甲醇-水（43：57）流动相系统测定10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ和巴卡亭Ⅲ，以乙腈-水-甲醇（27：44：29）为流动相测定三尖杉宁碱和紫杉醇，采用Nova—Pak C18反相柱，流速为1mL／min，柱温35℃，紫外检测波长为227nm。10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱和紫杉醇的线性范围（n=5）分别为0．01～0．5μg（r=0．9998），0．01～1μg（r=0．9999），0．015～0．5μg（r：0．9990），0．01～0．5μg（r=0．9992）；样品用丙酮和水浸提，体积比为60：40，回收丙酮后，用二氯甲烷萃取得到上述四种成分。本实验方法操作简便，结果准确，重现性好，可作为不同地区红豆杉的质量控制方法之一。

应用电导率监测红豆杉细胞悬浮培养中细胞生长与紫杉醇的累积

对中国红豆杉细胞悬浮培养过程中细胞生长和紫杉醇累积及培养液的电导率变化规律进行了研究,实验表明,细胞悬浮培养过程中随着细胞生物量与紫杉醇含量的增加,培养液的电导率逐渐下降,细胞生长和紫杉醇累积曲线与培养液的电导率曲线恰成镜像相关,当生物量达到最高时电导率达到并稳定于最低;紫杉醇累积的高峰滞后于细胞生物量的高峰2 ~3 d;电导率可作为红豆杉细胞培养中确定生物量和紫杉醇累积高峰期的监测指标。

巧妙提高紫杉醇产量——光学氧传感器InPro 6880i在生产紫杉醇中的应用

紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取的化合物，也是目前惟一可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物，它的问世被誉为国际抗癌药物的三大成就之一。但其在树皮中含量仅有0．01％～0．06％，目前主要通过化学合成和植物细胞组织培养等途径获得，本文介绍了光学氧传感器InPro 6880i在植物细胞培养生产紫杉醇中的应用。

巧妙提高紫杉醇产量：光学氧传感器InPro 6880i在生产紫杉醇中的应用

紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取的化合物，也是目前惟一可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物．它的问世被誉为国际抗癌药物的三大成就之一。但其在树皮中含量仅有0．01％～0．06％，目前主要通过化学合成和植物细胞组织培养等途径获得，本文介绍了光学氧传感器InPro 6880i在植物细胞培养生产紫杉醇中的应用。

促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响

目的研究中国红豆杉Taxus chinensis细胞悬浮培养中蔗糖、柠檬酸三铵、水杨酸和氨基酸前体组合对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。方法采用L9(34)设计试验,考察了第9天添加蔗糖(10、16、22 g/L)、柠檬酸三铵(0、154、1 540 mg/L),第21天添加蔗糖(20、260、g/L)和不同时间组合添加水杨酸及氨基酸前体4个因素对红豆杉细胞悬浮培养和紫杉醇合成的影响。结果当在细胞培养的第0天添加1.67 mg/L硝酸银,第9天添加10 g/L蔗糖,第9天添加1 540 mg/L柠檬酸三铵,紫杉醇达到最高,在此最优组合处理时紫杉醇质量浓度达到39.2 mg/L,相对于最差组合处理的(2.1 mg/L)时提高18.7倍。结论促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长和紫杉醇的合成都有很明显的影响。