猪细小病毒病灭活疫苗佐剂筛选及配苗乳化工艺研究

为了筛选制备猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的佐剂,用注射用白油和法国赛比克公司生产的MontanideTMISA 206 VG佐剂(简称206佐剂)分别配制灭活疫苗,通过对两种疫苗的配苗乳化工艺、疫苗性状、无菌检验、安全检验、效力检验和免疫期等方面进行比较。结果显示:与注射用白油配制的疫苗相比,使用206佐剂配苗乳化工艺相对简单;制备疫苗剂型为水包油包水型,易注射,吸收良好;局部和全身均无不良反应,安全性良好;免疫后第7天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪产生HI抗体效价显著高于白油佐剂疫苗,免疫后第60天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪HI抗体效价达到峰值;免疫期为6个月。综上,确定206佐剂作为制备猪细小病毒病灭活疫苗的佐剂。

猪细小病毒病灭活疫苗纯化浓缩技术研究

为了研究采用中空纤维柱对猪细小病毒液进行浓缩是否可行,同时研究浓缩纯化后的疫苗安全性是否受到影响,采用0.45μm的中空纤维柱去除细胞碎片,然后用100 ku中空纤维浓缩纯化系统对猪细小病毒原液进行20倍浓缩纯化洗滤及重悬(最终相当于2倍浓缩),用病毒原液和2倍浓缩液分别配制疫苗,对两种疫苗的安全检验、效力检验进行比较。结果显示:上述两种疫苗免疫猪后,效力检验结果均符合规定,但2倍浓缩液配制的疫苗安全性明显优于原液制备的疫苗。说明采用中空纤维浓缩纯化系统对猪细小病毒进行浓缩工艺是可行的,且浓缩纯化后疫苗安全性明显提高。

猪细小病毒病灭活疫苗稳定性研究报告

为了研究猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的稳定性(保存期),将3批猪细小病毒病灭活疫苗实验室制品(批号为201401、201402和201403)于2~8℃保存3、6、9、12、18、24个月后分别进行性状、无菌性和效力等检验。结果显示:3批实验室制品在2~8℃保存24个月,性状、无菌性和效力等检验结果均符合标准。根据试验结果并确保猪细小病毒病灭活疫苗的质量,暂定产品2~8℃保存有效期为18个月。

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)抗体产生期和免疫持续期试验

以实验室制备的3批制品各经颈部皮下接种7日龄和21日龄SPF鸡,7日龄鸡于免疫后7、11、14、21、28d及1、2和3个月;21日龄鸡于免疫后7、11、14、21、28d及1、2、3、4和5个月时采血,分离血清,分别测定免疫鸡血清中鸡新城疫病毒、禽流感(H9亚型)病毒和禽腺病毒抗体效价。试验结果表明,实验室3批制品免疫7日龄SPF鸡后,免疫后11d鸡新城疫病毒、禽流感(H9亚型)产生抗体,21~28d时3种病毒抗体均达到抗体高峰,高峰期持续至免疫后1个月,免疫后3个月下降到有效保护标准以下。三联疫苗免疫21日龄SPF鸡,免疫后11d鸡新城疫病毒、禽流感(H9亚型)产生抗体,针对3种病毒的抗体在免疫后21~28d达到抗体高峰,高峰期持续至免疫后2个月,免疫后3个月开始下降,免疫后5个月下降到有效保护标准以下。因此,鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)免疫<2周龄的鸡免疫持续期为2个月,免疫>2周龄的鸡免疫持续期为4个月。

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)抗体效价与鸡攻毒保护相关性试验

实验室制备的三联灭活疫苗分别以不同免疫剂量免疫接种21日龄SPF鸡,免疫后21日,分别采血测定血清抗体效价,并根据抗体效价重新分组,进行攻毒保护试验。试验结果表明,三联灭活疫苗各组分抗体效价与攻毒保护均呈正相关,疫苗各组分抗体效价可代替动物效检试验。根据试验结果及我国兽药标准,将三联灭活疫苗血清标准确定为:新城疫病毒HI抗体效价的几何平均值应≥1:16;禽流感(H9亚型)病毒HI抗体效价的几何平均值应≥1:128;Ⅰ群4型禽腺病毒抗体效价应≥1:1。

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)子代通过母源疫苗获得被动免疫力的效力和免疫期试验

种鸡接种鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)(La Sota株+TJ株+HY株)三联灭活疫苗后,会经卵把母源抗体传递给子代鸡。子代鸡母源抗体的高低直接关系到子代鸡首次免疫的日龄及免疫程序。为了明确种鸡接种三联灭活疫苗后,子代鸡母源抗体的消长规律,进行了NDV、AIV(H9亚型)和FAV-4母源抗体对子代鸡的被动免疫试验。试验结果表明,子代鸡的母源抗体随着日龄的增大逐渐消退;并且随着免疫时间的延长,所产的种蛋孵化的子代鸡的母源抗体也逐渐降低。因此,在进行子代鸡的免疫时,应该根据种鸡免疫的时间进行灵活确定,在接种前应该进行母源抗体效价测定,确定在<4log2才能进行免疫接种;如果没有条件检测母源抗体效价,建议在10日龄以后接种,以避免母源抗体干扰免疫效果。

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La?Sota株+TJ株+HY株)经皮下和肌肉接种鸡的效力试验

以实验室试制的3批鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)经皮下和肌肉注射14和21日龄SPF鸡.免疫后21日,分别接种鸡新城疫、H9亚型禽流感和I群4型禽腺病毒强毒.结果表明,经肌肉和颈部皮下注射疫苗的14和21日龄鸡的攻毒保护率均为100%,攻毒对照组鸡100%死亡、发病或感染,健康对照组均100%健活或未感染.试验证明,鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)经皮下及肌肉途径注射鸡均能起到良好的预防效果,因此,确定疫苗的注射途径为肌肉或颈部皮下.

猪圆环病毒病的预防和治疗

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起的一种以猪为主要易感动物的综合类且防治难度较高的传染病。猪圆环病毒感染后,不但会引起圆环病的临床表现,而且还会与其他病原体如沙门氏菌、猪嗜血杆菌、猪细小病毒、猪肺炎支原体等发生混合感染,出现断奶仔猪多系统衰竭综合征、生殖障碍等多种症状。多种疾病的联合治疗难度大且缺少特效的药物,因此猪圆环病毒病主要以预防为主。如发生疫情,会对猪场乃至整个养殖业造成重大的经济损失。文章重点论述猪圆环病毒病原学、流行病学、临床症状、防治措施内容。