基因芯片技术在乙肝病毒分型和耐药突变检测中的应用

目的探讨基因芯片技术在乙肝病毒（HBV）分型和耐药突变检测中的应用。方法采用基因芯片法检测105例HBV病毒携带者血清标本,观察HBV基因分型特点及针对核苷酸类药物的耐药突变情况,并结合受试者荧光定量PCR病毒载量、血清HBV标志物及病理检测结果进行分析。结果 105例HBV病毒携带者C型63例（60.0%）,B型、C型混合型16例（15.2%）,B型26例（24.8%）,各基因型构成差异有统计学意义（P〈0.05）。C型HBV-DNA载量对数值、HBe Ag阳性率与B型比较差异有统计学意义（P〈0.05）。病理活检结果显示炎症分期G3~G4期、纤维化分级S3~S4级C型乙肝病毒携带者所占比重高于B型,差异有统计学意义（P〈0.05）。共检出耐药突变28例（26.67%）;204I居多,占11.4%,180M＋204V＋204I突变共7例,占6.67%。临床耐药种类表现为拉米夫定耐药26例,阿德福韦耐药2例。结论基因芯片技术对乙肝病毒分型及耐药突变检测具有重要的作用。

成年鼠髁突增龄性变化的组织学和组织化学研究

目的 :观察成年鼠髁突组织形态与组织化学形态增龄变化的特征。方法 :2 0周和 2 4周龄SD种雄性大鼠各 2 0只。光镜下观察 :髁突组织形态、髁突内碱性磷酸酶的分布及相对活性 ;年龄对髁突组织形态和碱性磷酸酶相对活性的影响。结果 :髁突的组织形态及碱性磷酸酶相对活性存在着增龄性变化。结论 :大鼠髁突有与人类髁突非常相似的组织学构造 ,是研究TMJ及相关疾病较为理想的动物模型 ;随着年龄的增加 ,成年鼠髁突软骨的再生能力、成骨能力及组织钙化能力均下降 ,软骨下骨呈骨硬化性变化。提示 :随着年龄的增加 ,成年鼠下颌关节的适应能力下降。

MCP-1水平与冠心病严重程度的相关性分析

目的:探讨冠心病患者单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量与冠心病严重程度的关系。方法:心内科收治稳定性心绞痛(SAP)患者20例(SAP组)、不稳定性心绞痛(UA)患者20例(UA组)及急性心肌梗死(AMI)患者20例(AMI组),应用夹心酶联免疫吸附法对3组患者血清中MCP-1的含量进行检测;对比3组患者MCP-1的水平,根据GRACE危险评分将所有患者再次分为低危组、高危组和极高危组3个组,分析MCP-1与GRACE危险评分的相关性。结果:SAP组血清中MCP-1含量最低,其次为UA组,3组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在3个组中,低危组患者血中MCP-1含量最低,其次为高危组,3组比较,差异也有统计学意义(P<0.05);MCP-1与GRACE危险评分的相关性分析发现,患者血中MCP-1含量与冠心病GRACE评分存在正相关关系(r=0.61,P<0.05)。结论:MCP-1与冠心病严重程度存在显著的相关性,可用于预测冠心病的严重程度。

利用基因芯片技术研究乙肝病毒耐药机制

目的探讨基因芯片技术在乙型肝炎基因中的分型及乙肝病毒耐药性检测中的临床价值,研究乙肝病毒耐药机制。方法采用基因芯片技术和传统的PCR核酸扩增技术,对接受了拉米呋啶治疗的239例乙肝患者进行基因分型以及拉米夫定治疗中YM-DD基因变异即乙肝病毒耐药性进行检测。结果所有HBV DNA阳性者中,B基因型10例,C基因型132例,B/C混合型2例;拉米夫定治疗小于3个月、3个月～1 a以及1 a以上的YMDD突变率分别为3.77%,15.56%和40.6%。结论基因芯片技术能很好地用于乙肝的诊断分型,并能检测到YMDD变异情况,从而对拉米夫定治疗后耐药性进行判断。

356例乙型肝炎患者病毒分型及拉米夫定治疗所致耐药突变株变化分析

目的分析乙型肝炎患者病毒分型和拉米夫定治疗所致耐药突变株变化。方法运用荧光定量PCR结合DNA分子测序技术对2007年8月—2012年8月本院收治的356例乙型肝炎患者进行HBV分型,并对拉米夫定治疗所致耐药突变株变化进行检测。结果拉米夫定治疗2、6、12及18个月时,外周血中HBV-DNA含量、转阴率、ALT水平均逐渐升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),HBeAg复常率及转阴率均逐渐升高;门诊检查的乙肝患者与经拉米夫定治疗患者的HBV基因型无显著差异(P>0.05);经拉米夫定治疗的乙肝患者,氨基酸位点173的有12例(3.37%)、位点180的18例(5.06%)、位点204的78例(21.91%)、位点207的7例(1.97%)、位点213的8例(2.25%)。结论经拉米夫定治疗的乙肝患者仍然存在较多的拉米夫定耐药突变菌株;对乙肝患者病毒分型以及拉米夫定治疗所致耐药突变菌株进行及时的监测,能够为临床治疗与用药提供一定的依据。

贵州师范学院学生体育课学习满意度调查研究

为提高体育课程的教学质量,采用问卷调查法和访谈法对贵州师范学院学生就体育课满意度问题进行调研。结果显示:学生对体育教师的满意度整体上较高,其中,对中年教师的评价优于对年轻教师的评价。建议开展以老带新的帮教活动,努力提高教学质量。

黔北时期浙江大学体育活动研究

采用文献资料法分析黔北时期浙江大学体育活动状况。主要结论:黔北时期浙江大学体育活动呈现出管理者重视,要求严格;体育课内容丰富,考核标准人性化;体育活动形式多样;师生共同参与,锻炼氛围良好等特点。黔北时期浙江大学体育活动对"阳光体育"的启示:管理者重视是开展"阳光体育"的前提;体育教师尽职尽责是基础;营造良好气氛是外部条件;调动学生的积极性是内部因素。

体育锻炼缓解灾区中学生焦虑与抑郁的研究

为了解体育锻炼在促进灾区中学生心理健康方面的作用,运用健美操、羌族舞及慢跑三个项目对灾区中学生的焦虑与抑郁心理进行干预实验。结果显示,三个项目的体育锻炼均获得了良好的心理效益。

大学体育对社区体育的促进作用研究

运用文献资料法分析了社区体育发展中遇到的问题及大学体育潜在的优势。结果显示:社区体育的发展遇到了场馆设施不足、社会体育指导员缺乏及锻炼身体的成本较高等问题,而大学体育具有解决以上问题的优势。结论:大学体育可根据自身优势促进社区体育的发展。

桐梓海校体育活动研究

采用文献资料法分析桐梓海校体育活动概况及体育活动的特点。主要结论:"桐梓海校"重视体育活动;体育课要求严格,考试标准科学合理;学校积极开发体育课程资源;"桐梓海校"的体育活动促进了桐梓学校体育及社会体育的发展。

“北碚复旦”体育考

采用文献资料法分析抗战时期复旦大学内迁北碚下坝之后的体育活动概况及体育活动的特点。主要结论:复旦大学具有良好的体育传统;"北碚复旦"体育活动内容简单而丰富,具有较强的"战时教育"特点,竞技体育具有较强的实力。

三亚市候鸟老人体育活动研究

采用文献资料法及访谈法研究三亚市社区候鸟老人体育活动状况。主要结论:三亚市社区候鸟老人体育活动呈现活动时间有规律、活动项目丰富多彩、活动参与率高、活动项目的开展受场地设施制约等特点。建议:社区要建设充足的体育场地;要组织体育骨干带领老年人参加体育锻炼,营造良好的锻炼氛围,促进社区老年体育活动良性发展。

荧光定量PCR技术在淋病预后诊断中的作用

目的探讨荧光定量PCR技术在性病预后诊断中的应用。方法用荧光定量PCR法追踪检测25例性病门诊患者淋球菌(NG)。结果荧光定量PCR法能够检测淋病的治疗效果。结论荧光定量PCR技术具有高灵敏性、高特异性、高精确性、效率高和污染小等特点,是一种有效、快速和简便的检测方法,具有广泛应用价值。

结核分枝杆菌ESAT6基因克隆与表达质粒构建

目的 克隆结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白ESAT6基因 ,并构建重组表达质粒。方法 根据Genbank中ESAT6基因序列 ,针对其编码区合成引物 ,采用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出ESAT6基因 ,并连接到T载体 ,然后定向克隆到原核表达质粒pGEX 4T 2 ,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定。结果 经双内切酶消化所切下的片段 ,大小与预计相符 ;测序结果证实基因序列正确 ,符合表达框架。结论 成功构建了重组原核表达质粒 pGEX ESAT6。

尖锐湿疣患者荧光定量PCR检测结果分析

目的探讨尖锐湿疣患者疣体中人乳头瘤病毒(HPV)分型、基因含量及其意义。方法采用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测尖锐湿疣患者疣体中HPV-DNA含量及其型别。结果169例尖锐湿疣患者经FQ-PCR检测后168例(99.41%)阳性,其中HPV6/11型阳性150例(88.76%),平均1.2×107拷贝/ml;HPV16/18型阳性13例(7.69%),平均2.3×106拷贝/ml;HPV6/11和HPV16/18型同时阳性5例(2.96%),平均1.0×107拷贝/ml;4型均阴性1例(0.59%),定量为0×10拷贝/ml。结论HPV6/11型是尖锐湿疣发病的主要型别,尖锐湿疣患者疣体中HPV-DNA含量与其是否复发无明显关系,FQ-PCR可作为尖锐湿疣早期诊断的指标。

子痫前期患者血清肾功能生化指标变化及临床意义

目的探讨子痫前期(PE)患者尿酸(UA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平的变化及其临床意义。方法采用生化分析仪检测42例PE患者及38例健康妊娠晚期孕妇血清UA、Cr和BUN水平。结果(1)PE患者与健康妊娠孕妇相比,血清UA、Cr和BUN含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)轻度PE患者血清UA、Cr及BUN含量呈升高趋势,但与健康妊娠晚期孕妇比较,仅血清UA含量增高;重度PE患者与健康孕妇比较,3项指标均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)重度PE患者血清UA、Cr和BUN含量显著高于轻度PE患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清UA、Cr和BUN水平的升高可提示妊娠高血压患者肾功能受损;血UA可作为判断PE肾功能损害较敏感的指标;血清UA、Cr和BUN对评价和监测妊娠高血压肾功能受损程度具有一定应用价值。

光固化流体树脂在窝沟封闭术中的应用

目的:评价光固化流体树脂在恒牙窝沟封闭术中的临床应用效果,并与传统可见光窝沟封闭剂做力学对比观察。方法:对90例12～14岁患者的360颗上、下颌第二恒磨牙采用Dyract flow流动复合体进行窝沟封闭术,评价其涂膜保留率;制作Dyract flow流动复合体和传统光固化窝沟封闭剂试件,抗压强度测试并分析。结果:随诊3年发现光固化流体树脂在术后1、2、3年的涂膜保留率较高;其试件的破坏载荷和位移均小于传统光固化窝沟封闭剂,并且其差异具有显著性(P<0.05)。结论:光固化流体树脂是一种可靠的恒牙窝沟封闭剂,值得临床推广应用。

慢性阻塞性肺疾病患者血清维生素D与炎症因子和肺功能相关性研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清维生素D与炎性反应和肺功能的相关性。方法于2014年5月至2015年4月,选择急性加重期COPD患者60例,稳定期COPD患者50例,体检健康者40例,分析受试对象年龄、身高、体质量、吸烟情况等一般资料,采用Medisoft肺功能仪测量1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及呼气峰流速(PEF)。酶联免疫吸附试验检测血清25-羟基维生素D3[25(OH)D3]、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。分析各指标的组间差异及各指标间的相关性。结果急性加重期和稳定期患者25(OH)D3水平低于健康者,IL-6、TNF-α水平高于健康者(P<0.05)。急性加重期患者25(OH)D3水平低于稳定期患者,IL-6、TNF-α水平高于稳定期患者(P<0.05)。急性加重期和稳定期COPD患者血清25(OH)D3水平与IL-6、TNF-α呈负相关(P<0.05),与FEV1、PEF呈正相关(P<0.05)。结论 COPD患者体内存在明显的维生素D缺乏或不足,且与炎性反应和肺功能具有一定的相关性。

冠心病患者血清TBIL与OX-LDL水平的变化与相关性研究

目的探讨冠心病(CHD)血清总胆红素(TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)水平的变化及其相互之间的关系。方法采用日立7600-20型全自动生化分析仪氧化酶法检测血清TBIL含量。用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测OX-LDL水平。结果冠心病组血清TBIL明显低于健康对照组[(8.85±2.97)μmol/Lvs(15.51±3.92)μmol/L,P<0.01],而血浆OX-LDL明显高于健康对照组[(85.63±32.45)mmol/Lvs(29.21±11.36)mmol/L,P<0.01]。冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL的变化呈显著负相关(r=-0.61,P<0.01),而健康对照组中两者间的相关性则不明显(r=-0.15,P>0.05)。结论冠心病时血清TBIL显著降低而OX-LDL显著升高。冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。

ENA多肽抗体检测临床意义的初步探讨

风湿性疾病病患者血清中存在各种自身抗体，已作为疾病的血清标记性抗体广泛用于临床诊断。应用免疫印迹技术（ＩＢＴ）以兔胸腺可提取核抗原（ｅｘｔｒａｃｔａｂｉｅｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎＥＮＡ）为抗原，建立在一条硝酸纤维薄膜上检测包括系统性红斑狼疮相关抗体（抗Ｓｍ），抗核糖多肽抗体（抗Ｒｉｂ）细胞核核糖蛋白抗体（ＲＮＰ）干燥综合征相关抗体（抗ＳＳＡ）。