高效抗肿瘤药物烟曲霉素的分离纯化及杂质分析

目的开发一种高纯度烟曲霉素的分离纯化工艺,并对烟曲霉素中的主要杂质进行分离纯化、结构鉴定。方法发酵液采用全料液萃取,以烟曲霉素收率为指标筛选最佳萃取溶剂,优化萃取条件,以甲醇和二氯甲烷混合溶液进行结晶,通过HPLC对烟曲霉素晶体中的主要杂质进行分离纯化,并采用核磁共振和质谱分析鉴定杂质结构。结果以甲基叔丁基醚为萃取溶剂得到的烟曲霉素收率最高,当甲基叔丁基醚:发酵液体积比为2:1时,萃取收率大于85%,再经过两次结晶可以得到纯度95%以上的烟曲霉素晶体,分离并鉴定了烟曲霉素晶体中的两个主要杂质。结论通过对烟曲霉素提取工艺研究,确定了较优的工艺条件,该方法具有易操作、纯度高、收率高、成本低的特点,适合工业化生产,烟曲霉素中两个主要杂质是烟曲霉素类似物,通过杂质鉴定为烟曲霉素质量控制和安全性评价提供支持。

基因工程菌Streptomyces bingchenggensis BCJ60的次级代谢产物研究

对基因工程菌Streptomyces bingchenggensis BCJ60的次级代谢产物化学成分及杀虫活性进行研究,采用正相硅胶柱层析、反向硅胶柱层析和Sephadex LH-20分离纯化,结合核磁共振、质谱等波谱学方法鉴定化合物结构,从中分离获得11个化合物,分别为3,4-dihydro-3-hydroxy-5-oxomilbemycin A3(1)、3,4-dihydro-3-hydroxy-5-oxomilbemycin A4(2)、seco-milbemycin C(3)、seco-milbemycin A(4)、米尔贝霉素H(5)、米尔贝霉素β_(13)(6)、米尔贝霉素ST906(7)、米尔贝霉素β_(3)(8)、25-ethylmilbemycinβ_(3)(9)、米尔贝霉素β_(6)(10)和米尔贝霉素β_(7)(11)。其中化合物1和2为新化合物,杀虫活性结果显示,化合物1和2对朱砂叶螨(LC_(50)=0.121±0.010 mg/L和0.116±0.015 mg/L)和松材线虫(LC_(50)=5.217±0.064 mg/L和5.581±0.059 mg/L)具有显著的杀虫活性,与商品化的杀虫剂米尔贝霉素A3/A4相比没有显著性差异。

一株乳酸菌的分离鉴定及在苹果汁发酵中的应用

从苹果树根际土壤中筛选获得一株产酸菌株,经形态学和生理生化特征结合分子生物学研究,鉴定为植物乳杆菌,命名为Lactobacillus plantrum asZ;以苹果为原料,将乳酸菌Lactobacillus plantrum asZ应用于苹果汁发酵,通过单因素和正交试验,初步确定发酵苹果汁的最佳工艺条件为在苹果汁含量为35%、接种量为5%、蜂蜜添加量为2%、30℃发酵5 d的条件下,苹果汁的感官评分达到91分,发酵苹果汁中总氨基酸和乳酸含量明显增加,总SOD活性和总黄酮含量分别增加80.0%和16.9%,维生素C含量保持在80%以上。

一株乳酸菌的分离鉴定及其在梨汁发酵中的应用

本研究从梨树根际土壤中筛选获得一株产酸菌株,经形态特征、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析鉴定为一株欺诈明串珠菌,命名为Leuconostoc fallax SYBC psL4;以砀山砂梨为原料,用Leuconostoc fallax SYBC psL4发酵梨汁,通过单因素和正交实验,确定了梨汁的最佳工艺条件:接种量5%,发酵时间25 h,蔗糖添加量为6%时,发酵梨汁的感官评分达92分,发酵梨汁中乳酸和总黄酮含量显著升高,VC含量仍保持在83.87%。

一株放线菌次级代谢产物分离鉴定研究

目的对放线菌Streptomyces tyrosinilyticus NEAU-Jh3-20菌株的次级代谢产物进行分离鉴定。方法发酵液经大孔树脂HP-20吸附洗脱、正相硅胶和凝胶Sephadex LH-20层析、制备型和半制备型高效液相色谱分离纯化,然后运用核磁共振、高分辨质谱等对单体化合物进行结构鉴定。结果从放线菌Streptomyces tyrosinilyticus NEAU-Jh3-20菌株发酵液提取物中获得5个代谢产物,均为戊二酰亚胺类化合物,除化合物1为新化合物外,其余均为已知化合物,分别鉴定命名为:(5E,9E,11E)-8,10-二甲基-3-(2-氨基-2-氧乙基)-7-十三氧代-5,9,11-三烯酸(1),(E)-4-[5-甲基-7-(3-甲基环氧乙烷-2-基)-2-羟基-4-氧代辛-6-烯-1-基]呱啶-2,6-二酮(2),2-{2-[(3E,5E)-3,5-二甲基-7-羟基-2-氧代辛-3,5-二烯-1-基]-6-氧代四氢-2H-吡喃-4-基}乙酰胺(3),3-(4-羟苄基)六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮(4),3-(6-甲基-1-羟基)-庚基-5-(羟甲基)二氢呋喃-2(3H)-酮(5),5个化合物均为首次从该菌中分离得到。结论本研究丰富了微生物化合物多样性,同时为其他放线菌产活性物质的研究与发掘提供了参考与理论基础。

植物内生菌Plantactinospora sp.NEAU-gxj3中一个新的酰胺类化合物（英文）

对植物内生菌Plantactinospora sp.NEAU-gxj3的次级代谢产物进行了研究,分离得到3个化合物,经1D和2D NMR、MS波谱分析及与文献数据的比较鉴定三个化合物分别为一个新的酰胺类化合物,(2E,7Z)-9-hydroxy-4,6,8-trimethylnona-2,7-dienamide(1)和两个已知化合物,抗生素U-62162(2)和salternamide C(3)。对三个化合物的细胞毒活性实验结果表明化合物2对人白血病细胞株K562、人肺腺癌A549细胞和人肝癌细胞株Hep G2表现出较强的细胞毒活性,其IC_(50)分别为6.8、32μg/m L和19μg/m L。

一株乳酸菌的分离鉴定及在香蕉饮料发酵中的应用

本研究从美人蕉属植物根际土壤中筛选获得一株产酸菌株,经形态学、生理生化特征研究和16S rRNA基因序列分析,鉴定为一株植物乳杆菌,命名为Lactobacillus plantarum SYBC psL;以香蕉为原料,将Lactobacillus plantarum SYBC psL应用于香蕉饮料发酵,结果表明,当香蕉与水比例为1∶2、蜂蜜添加量为2.0%时,氨基酸、乳酸和黄酮的含量明显升高;当果葡糖浆添加量为10%时,产品酵素的黏度适当、酸甜适口,具有较高的稳定性。