光合细菌研究进展

概述了光合细菌的分布、类群、形态结构、生理等特征,从水产养殖、畜牧业、种植业、环境保护等方面介绍了其应用进展和前景,旨在为光合细菌深入研究和应用提供参考.

对虾养殖池底泥中光合细菌分离及其生物学特性

从虾池底泥样品富集分离出2株光合细菌,分别编号为M1和M2,均为革兰氏阴性菌,繁殖方式为二均分裂.细胞中含有细菌叶绿素a,经形态、生理生化特性初步鉴定,M1和M2菌株均为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)的成员,初步研究了NaCl浓度对其生长的影响.

一株好氧反硝化菌的分离鉴定及脱氮条件研究

好氧反硝化菌在生物脱氮中有很好的应用前景,文章旨在从环境中分离具有高效脱氮能力的反硝化菌,对其进行分类及反硝化特性研究。以对硝酸盐氮的去除能力为主要指标,从对虾养殖池底泥分离筛选出有效去除硝酸盐氮的好氧反硝化菌,通过生理生化特性及16S r DNA序列分析对菌株进行初步鉴定。在好氧条件下,研究不同碳源、氮源、温度、p H值对该菌总氮去除率的影响。试验结果表明菌株S4在以柠檬酸钠为唯一碳源,30℃,100 r/min振荡培养24 h和36 h,硝酸盐氮去除率分别达到60%和72%。其16S r DNA序列与海源菌的同源性达98%,结合生理生化特点,初步确定菌株S4属于海源菌属(Idiomarina sp)。最适碳源、氮源、分别为乙酸钠和牛肉膏,最适培养温度为20℃,最适p H值为8,在最适条件下总氮去除率达80%。

光合细菌类胡萝卜素的提取及稳定性研究

对光合细菌3号菌株进行类胡萝卜素的提取、分离纯化及稳定性研究.选取几种有机溶剂提取光合细菌类胡萝卜素并用皂化法分离纯化,通过可见分光光度计研究类胡萝卜素在不同光照、温度,pH和金属离子条件下的稳定性.结果表明:最佳提取溶剂为体积比7∶2的乙酸乙酯和甲醇的混合溶剂,当菌体量与提取溶剂为0.1 g/5 mL,提取时间为8 h时浸提率最高.该菌类胡萝卜素在自然光照直射72 h损失88.3%;对温度有一定的耐受性,但高温容易导致其失活;pH中性条件下相对稳定,强酸强碱条件下不稳定,pH 2条件下32 h损失了92%;对金属离子敏感,尤其对Fe3+最敏感,24 h损失了77.3%,对K+有较高耐受性,24 h仅损失5.6%.因此对类胡萝卜素进行操作或者保存时,要注意在中性条件下避光、低温,避免与金属器皿接触.

光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基优化

探讨了光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基的优化以及类胡萝卜素的提取.首先对3号菌株的60%蔗糖悬液进行全波长扫描,确定了3号菌株在457nm波长下出现最大吸收峰,因此用457nm波长下的OD值作为类胡萝卜素相对含量高低的指标.通过改变培养基碳源、氮源和盐度确定最佳的碳源、氮源和盐度,得出最优碳源为蔗糖,最优氮源为硝酸铵,最适盐度为0.1‰.利用最佳培养基培养3号菌株,用皂化法分离纯化类胡萝卜素,得类胡萝卜素纯品,提取率为30.06mg.g-1.

耐酸酵母的分离鉴定及在丢糟发酵中的应用

从白酒丢糟及酒醅中分离得到2株酵母菌YP2、YZ13,两株菌均能在pH 3.0条件下正常生长,经鉴定YP2为Candida属,与Candida pseudolambica(KM384061.1)相似度98%;YZ13为Pichia属,与Pichia kudriavzevii(LC014798.1)相似度100%.2株酵母(种子液体积比1∶1)应用于丢糟发酵中,接种量100mL/kg,在鲜丢糟870g/kg、麸皮100g/kg、硫酸铵15g/kg、生石灰15g/kg,28℃混合固态发酵60h,丢糟(干样)的真蛋白含量达172.30g/kg,比发酵前丢糟(干样)提高了28.29%,丰富了丢糟饲料蛋白,为丢糟发酵和高效饲料提供了依据.

链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制

目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用。方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成。①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠。②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白。③用0,10,20,100mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用。④Bel-7402细胞经10mg/L或50mg/L细菌蛋白分别作用48,72h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布。⑤Bel-7402细胞经50mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率。⑥用50mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响。结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系。②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P<0.05);流式细胞术检测显示,经50mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P<0.01)。③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低。结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平。

竹节纱的生产体会

为了保证竹节纱规格达到要求,成纱质量稳定,根据细纱设备的性能特点、竹节纱纺制原理及竹节纱纺纱工艺实践,总结出竹节纱与普通环锭纱工艺配置的区别.实践表明：竹节纱捻系数应比普通同号纱高10%～20%;细纱机前罗拉速度要低于纯棉同号普通纱;竹节纱节长、节距与细纱机车况关系很大,要进行试纺;竹节纱牵伸效率与普通环锭纺有所不同;生产中要加强竹节纱装置、设备的维护保养.

链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞及人正常肝细胞生长的影响

目的观察链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞及人Chang氏正常肝细胞生长增生的影响。方法常规培养链球菌,提取细菌全蛋白并通过阴离子交换层析获得蛋白分离组分SpⅠ和SpⅡ。不同浓度链球菌蛋白(10、50、100mg/L)作用于人肝癌Bel-7402细胞及人Chang氏正常肝细胞24～72h后,采用MTT法检测两种细胞的增生活性。倒置显微镜下观察50mg/L链球菌全蛋白和SpⅡ对两种细胞的形态学变化。结果MTT结果显示,链球菌全蛋白及SpⅡ能显著抑制Bel-7402细胞的生长,与蛋白剂量和作用时间呈负相关关系;SpⅠ对Bel-7402细胞未显示出明显增生抑制作用。链球菌全蛋白及SpⅡ对人Chang氏正常肝细胞显示出不同程度的刺激生长作用。倒置显微镜下观察,链球菌全蛋白及SpⅡ作用后的Bel-7402细胞,细胞稀疏、脱落、排列紊乱,失去正常形态,而人Chang氏细胞未发现明显的形态学变化。结论链球菌全蛋白及SpⅡ能抑制人肝癌Bel-7402细胞的增生,并且能在一定程度上促进人Chang氏正常肝细胞增生。

肠内营养制剂的特点和应用选择

商品化的肠内营养制剂品种众多,组分不同,特点各异,对肠内营养产品进行分类归纳,了解众多肠内营养产品的组成要素和比例、能量密度、渗透压、产品特点及适用疾病,以及剂型等产品信息,临床医生才可以根据患者的疾病特点和营养需求,在进行正确的评估后,选择适用的肠内营养制剂。欧洲肠外肠内营养学会(ESPEN)继续教育提供了正确选择肠内营养制剂的途径,临床可根据这个途径在众多的肠内营养产品中,根据患者的疾病特点和肠内营养产品的特征为患者选择最为适用的营养制剂,使患者在营养支持中获益。

中草药治疗公牛精液品质不良的试验

公牛精液品质不良为由公牛睾丸结构或功能异常引起的一种雄性生殖障碍疾病，主要表现为射精量少、无精子、死精子、精子畸形和活力不强等。品质不良的精液经冷冻处理后不能作人工授精使用；而对于精液品质不良的公牛，一般情况下也只能作淘汰处理。因此会给企业特别是种公牛站造成不小的经济损失。

微生物学试卷分析及评价

对河北大学生命科学学院06、07、08级生物学专业微生物学期末考试试卷进行综合分析与评价。3次考试成绩均呈正态分布,试卷难度在0.611～0.742之间,区分度在0.194～0.338之间,信度系数在0.58以上。表明成绩分布基本合理,三套试卷整卷难度、区分度良好,考试成绩可信。本院微生物学卷库质量良好,但有部分试题需要修改或删除。

植酸酶高产菌株的选育

从土壤中分离到1株植酸酶高产菌株Pe0,初步鉴定为米曲霉.为了提高植酸酶活力,对Pe0菌株分别进行紫外线和亚硝基胍诱变处理,经初筛、复筛、遗传稳定性能检测,得到1株酶活相对较高、性状相对稳定的菌株Pe2#,酶活稳定在10.66U/mL,较原始菌株提高到3.34倍.另对其发酵条件进行优化,确定最适接种量为4%,最适pH为5.5,最适培养时间为6.5d.在此基础上进行培养基正交优化,结果表明:葡萄糖质量浓度为25g/L,蛋白胨质量浓度为4g/L,(NH4)2SO4质量浓度为2g/L,MgSO4.7H2O质量浓度为0.1g/L时所得菌株产酶活力最高.

染料高效脱色光合细菌的分离与分析

为增强染料废水的生物处理,从印染厂的污泥中分离筛选出1株高效脱色光合细菌HL.对其在不同pH、碳源和氮源的条件下对5种染料的脱色效果进行了研究.结果表明,菌株HL菌落呈鲜红色,圆形、光滑、湿润、稍突起、边缘整齐,直径0.5～2.0mm;个体呈螺旋状,单根极生鞭毛,革兰氏染色为阴性,含有细菌叶绿素a,可进行光合作用.对活性艳红和直接胡兰的脱色效果显著,特别是对直接胡兰在24h内脱色率达到100%.菌株HL在中性环境下,分别以葡萄糖和氯化铵作为脱色培养基的碳源和氮源时,对直接胡兰的脱色率和降解率分别达到100%和98.67%.

人肺癌转移相关蛋白1重组慢病毒载体的构建和病毒包装及其鉴定

目的构建人肺癌转移相关蛋白1（LCMR1）重组慢病毒载体，并包装慢病毒颗粒，为进一步研究该基因在人肺癌发生发展中的功能提供实验基础。方法将人肺癌转移相关基因LCMR1扩增后，酶切连接构建人pLVX—IRES—Neo病毒载体，转化DH5a大肠杆菌，挑取阳性克隆测序鉴定，将重组质粒与慢病毒系统一起转染Lenti—X293T病毒包装细胞，并将收集的病毒感染肺癌细胞系95C，即时定量聚合酶链反应（q—PCR）及蛋白质印迹法验证其表达情况。结果DNA测序结果证实成功构建人LCMR1重组慢病毒载体，包装后的病毒浓缩液浓度可达2．5×10^8IFU／ml以上。包装后的病毒颗粒感染95C细胞系，LCMR1的mRNA水平提高9．98倍（P〈0．05），蛋白水平的表达也明显增强。结论本研究成功构建了pLVX—IRES—LCMR1-Neo慢病毒载体，获得的慢病毒颗粒有效感染肺癌细胞系95C，为研究该基因在肺癌中的功能建立了模型。

酵母双杂交技术筛选人95D细胞中肺癌转移相关蛋白1相互作用蛋白及其验证

目的通过酵母双杂交实验、免疫共沉淀及GST pull down技术筛选并验证肺癌细胞系95D细胞中与肺癌转移相关蛋白1(lung cancer metastasis-related protein 1,LCMR1)相互作用蛋白,为进一步研究LCMR1在肺癌发生发展中的作用提供科学依据。方法将诱饵质粒p GBKT7-LCMR转化AH109,应用酵母双杂交系统筛选出95D细胞中与LCMR1相互作用的候选克隆;应用反复划线法、X-α-Gal显色法和共转化回复验证法排除假阳性克隆,对真阳性克隆进行测序及生物学分析;构建含Myc标签的LCMR1融合蛋白的重组载体p CMV-Myc-LCMR1载体,以及带flag标签的目标相互作用蛋白载体,共转染细胞,利用免疫共沉淀技术验证LCMR1与相互作用蛋白之前的相互作用;融合蛋白沉降(GST pull-down)法进一步体外验证LCMR1与相互作用蛋白之间的作用。结果诱饵质粒p GBKT7-LCMR1与95D细胞c DNA文库共转化AH109,初步获得20个候选克隆;重复划线法后获得16个阳性克隆,X-α-Gal显色法获得12个蓝色阳性克隆,进一步将文库质粒与诱饵质粒共转化酵母菌回复验证,最终获得6个真阳性克隆;成功构建含标签重组载p CMV-Myc-LCMR1、pc DNA3.0-flag-RPL29及pc DNA3.0-flag-GNG5载体,经免疫共沉淀验证LCMR1与RPL29在细胞内有相互作用,与GNG5在细胞内无相互作用;GST pull-down实验验证LCMR1与RPL29在体外有相互作用,与GNG5在细胞外无相互作用。结论酵母双杂交技术筛选出95D细胞中相互作用蛋白6个,经免疫共沉淀和GST pull-down实验验证LCMR1与RPL29体内体外均有相互作用。

一例公牛鼻腔肿瘤的诊断报告

1 发病及诊疗情况 2006年10月3日,X号公牛表现采食缓慢、流鼻涕、偶尔咳嗽,初步诊断为咽喉部炎症,随采取肌肉注射抗生素进行治疗.10月13日该牛表现出返草现象.怀疑为瘤胃机能障碍,随进行对症治疗,症状缓解,但是停药后症状复发且病牛逐渐消瘦.通过剖检确诊为鼻腔肿瘤.……

日本沼虾卵巢发育过程中脂肪酸变化的研究

报道了日本沼虾 (macrobrachiumnipponese)卵巢发育过程中脂肪酸种类和含量变化的情况。用GC MS法对脂肪酸进行了分析测定 ,结果发现 :卵巢发育早期脂肪酸种类和含量较少 ,卵巢生长期和成熟期脂肪酸种类较多 ,含量也高。卵巢发育的整个过程中棕榈酸、油酸、亚油酸是主要的脂肪酸。十七碳一烯酸 (C1 7∶1 )随着卵巢的发育含量减少 ,油酸、亚油酸含量上升 ;实验中未检到游离的二十碳五烯酸 (C2 0∶5)

不同锌水平对荷斯坦种公牛血液理化指标的影响

本文旨在研究不同水平的锌对荷斯坦种公牛血液理化指标的影响。试验选取30头荷斯坦种公牛,随机分为5组,单因子饲养试验设计,分别饲喂不同锌水平的日粮,A为对照组,饲喂基础日粮,B、C、D、E组锌的添加水平分别为50、80、110和200 mg/kg(按日粮干物质计),试验期为8个月。结果表明:(1)不同锌水平对荷斯坦种公牛血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)酶活性影响极显著(P<0.01),对碱性磷酸酶(AKP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性无显著影响(P>0.05);(2)不同锌水平对荷斯坦种公牛血清中睾酮含量影响极显著(P<0.01),对血清锌影响不显著(P>0.0 5)。综合分析不同锌水平试验牛生理生化指标的变化得出,锌的适宜添加量为1 1 0 mg/kg日粮干物质。

原油降解菌的筛选鉴定及降解特性的研究

实验从河北省唐山市柳赞镇冀东油田油井污水中筛选出8株以原油为唯一碳源的降解菌株(编号为T1-8),通过形态学特征观察以及16SrDNA分子生物学鉴定,确定这8个菌株分别为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、Bacillus safensis、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、嗜冷杆菌(Psychrobacter pulmonis)、鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)、纺锤芽孢杆菌(Bacillus fusiformis)和洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)。采用无机盐培养基,以华北任丘油田原油为唯一碳源,分别对上述8种菌株进行原油降解能力测试,通过为期7d的降解,其相对应的降解率分别为67.14%、43.13%、30.37%、24.74%、43.00%、37.94%、55.28%和14.51%,而且其中的金黄色葡萄球菌和嗜冷杆菌对原油具有降解能力为首次报导。后续对铜绿假单胞菌进行了影响降解率的单因素实验,实验结果显示在pH为7、初始原油浓度为5g/L和菌液接种量1mL(约1.8×1010cfu/mL)时铜绿假单胞菌对原油的降解率达到其最大值67.14%。