响应面法优化Rhizopus microsporus var.chinensis产生淀粉酶的条件

对Rhizopus microsporus var.chinensis固态发酵产生淀粉酶的条件进行了优化。首先采用单因子实验确定最适固态发酵基质为小麦麸皮,最适碳源和氮源分别为可溶性淀粉和硫酸铵,通过控制培养基初始pH为3.0、初始湿度为70%时,使其生淀粉酶产量提高3.5倍。在此基础上,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得出每500mL三角摇瓶中含小麦麸皮13.7g、可溶性淀粉0.063g、硫酸铵0.052g时,生淀粉酶产量达到48.50U/mL,比初始产量提高了8倍。

利用Native制备电泳分离来源于Rhizopus microsporus var. chinensis的葡萄糖淀粉酶同工酶

将Native制备电泳应用于Rhizopus microsporus var. chinensis中2个葡萄糖淀粉酶同工酶的分离,考察了电泳缓冲系统、凝胶浓度和凝胶长度对分离效果的影响。结果表明:先使用Ornstein-Davis系统分离同工酶,再使用0.02mol/L,pH6.2的NaAc.CH3COOH缓冲液洗脱,在长度为6cm的7%的Native电泳胶上,2个性质相近仅电泳迁移率略有差别的同工酶能有效分离。分离回收的蛋白质可保持其活力,便于后续研究。

荧光分析法测定银杏酚酸

根据银杏酚酸在紫外光激发下能产生荧光的性质，建立了检测银杏酚酸的荧光分光光度法。以80％乙醇80℃回流8h提取银杏外种皮，提取液经硅胶柱层析后得酚酸样品。以白果酸为标样，激发波长345nm、发射波长420nm测定银杏酚酸。线性回归方程为，y=2．5024x＋0．4152；线性范围为0．50～100mg／L，相关系数r=0．9922，相对标准偏差2．6％；检出限0．11mg／L。

银杏外种皮多酚氧化酶的研究

采用不同条件抽提银杏外种皮多酚氧化酶(简称PPO),比较抽提条件对PPO活性的影响;利用乙醇分级法对PPO进行初步分离纯化,比活力从49.8u/mg提高到292u/mg;研究pH、温度、金属离子对乙醇分级提纯后的PPO的影响,发现其最适温度为30℃,最适pH=7.6,Mg2+对酶有明显的激活作用。而Na+、K+、Fe2+则对酶有抑制作用。

银杏外种皮多酚氧化酶的研究

本文采用不同条件抽提银杏外种皮多酚氧化酶(简称PPO),比较了抽提条件对PPO活性的影响;利用乙醇分级法对银杏外种皮多酚氧化酶进行初步分离纯化,比活力从49.8μ/mg提高到292μ/mg;研究pH值、温度、金属离子对乙醇分级提纯后的外种皮多酚氧化酶的影响,发现银杏外种皮中的多酚氧化酶的最适温度为30℃,最适pH值在7.6,Mg2+对酶有明显的激活作用,而Na+、K+、Fe2+则对酶有抑制作用。

体积排阻色谱法测定胸腺肽分子量校准曲线条件的优化

在体积排阻色谱(SEC)法测定胸腺肽分子量校准曲线过程中,流动相中乙腈的比例对核糖核酸酶A、人胰岛素、胸腺肽α1和生长激素释放抑制因子4种蛋白的保留时间有重要影响,进而影响校准曲线的线性关系。当乙腈比例为75%时,胸腺肽分子量校准曲线线性最好,此时分子量校准方程为y=-3.138 6x+21.724,线性相关系数r2=0.988 5。4种蛋白的理论塔板数在45 783～63 345之间,拖尾因子在0.96～1.18之间,分离度在3.52～8.82之间。SEC法测定胸腺肽分子量校准曲线的液相色谱条件对4种蛋白的分离效果优异,分子量校准曲线线性良好,可用于胸腺肽制剂中高分子量物质的检测。

“互联网+”背景下南昌零售企业的困境与突围

传统零售企业受到互联网环境的巨大冲击,亟待转型。从南昌本土零售业调查出发,分析其发展受到制约的原因,主要包括:国内外大型连锁零售企业的冲击、“互联网+”背景下消费者购物方式及支付习惯的转变、线下实体零售运营成本不断攀升等。基于新零售轮理论、零售环境理论,提出通过加深互联网与传统零售业融合度,推动传统南昌零售业升级转型的新运营模式。

Rhizopus microsporus var. chinensis生淀粉糖化酶的分离纯化及酶学性质

从Rhizopus microsporus var.chinensis CICIM F0088菌株中分离纯化一种新的具有生淀粉降解能力的糖化酶,并研究其酶学性质.经硫酸铵沉淀、双水相交换、DEAE-650M阴离子层析、Bio-Rad制备电泳等步骤后获得电泳均一的糖化酶,其相对分子质量约为52×103.该酶最适反应pH为4.5,在pH3.5～6.5范围内稳定;最适反应温度为75℃,具有较宽的pH耐受范围和较高的温度耐受性.经飞行质谱分析得到酶蛋白中3个肽段的氨基酸序列,通过比对发现,该酶与NCBI中已报道的糖化酶序列具有一定的同源性.

固相萃取-高效液相色谱法检测油炸薯条中丙烯酰胺

目的建立了一种采用固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定油炸薯条中丙烯酰胺的方法。方法样品用2.0 mol/L氯化钠溶液进行提取,使用Styre Screen H2P固相萃取柱(200 mg/3 ml)净化,然后用Sapphire C18反相色谱柱进行分析,流动相为甲醇/水(5∶95),流速为1.0 ml/min,检测波长为200 nm。结果在1.0～10.0μg/g的添加水平范围内,样品中丙烯酰胺的平均回收率为66.2%～80.9%,相对标准偏差为1.6%～2.1%,最低检测限和最低定量限分别为0.025和0.080μg/g。结论该方法操作简单、快速、准确,可用于油炸薯条中丙烯酰胺的快速测定。