老年新型冠状病毒感染患者外周血淋巴细胞亚群和多种细胞因子水平分析及其临床价值研究

目的探讨淋巴细胞亚群联合多种细胞因子在老年新型冠状病毒感染肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)感染患者疾病进展中的应用价值。方法选取2022年12月~2023年1月解放军总医院第八医学中心应急病房收治的146例老年COVID-19确诊患者,根据预后分成两组:生存组(n=127)和死亡组(n=19),另收集老年医学科51例骨质疏松患者作为对照组。比较对照组与新冠组、生存组与死亡组患者的包括T,B和NK等重要淋巴细胞亚群的比例和绝对计数,以及血浆12项细胞因子(包括IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-17,TNF-α,IFN-α和IFN-γ)水平。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价其在预测老年COVID-19感染患者预后的价值。结果与对照组比较:①新冠组的NK细胞比例降低,B细胞比例升高,差异有统计学意义(Z=-3.386,-4.140,P<0.01);T,CD8+T,CD4+T细胞比例差异均无统计学意义(Z=-1.244,-1.770,-0.951,均P>0.05)。②新冠组的T,CD8+T,CD4+T,NK和B细胞绝对数均降低,差异有统计学意义(Z=-9.418~-6.539,均P<0.01)。③新冠组的IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-γ,IL-8,IL-17,IL-12p70和IL-10浓度均升高,差异有统计学意义(Z=-8.851~-1.986,均P<0.05);IL-5,IFN-α,TNF-α和IL-4浓度差异均无统计学意义(Z=-0.460~-0.217,均P>0.05)。与生存组比较:①死亡组的T,CD8+T,CD4+T,NK,B细胞比例差异均无统计学意义(Z=-1.873~-0.422,均P>0.05)。②死亡组的T,CD8+T,CD4+T细胞绝对数均降低,差异有统计学意义(Z=-2.667,-2.287,-2.556,均P<0.05);NK,B细胞绝对数差异均无统计学意义(Z=-1.934,-0.532,均P>0.05)。③死亡组的IL-6,IFN-γ,IL-8,IL-17和IL-10浓度均升高,差异有统计学意义(Z=-4.211~-2.655,均P<0.05);IL-5,IFN-α,IL-2,IL-1β,IL-12p70,TNF-α和IL-4浓度差异均无统计学意义(Z=-1.329~-0.279,均P>0.05)。ROC曲线分析淋巴细胞亚群联合细胞因子对老年COVID-19患者的预后预测价值显示:总T细胞、B细胞和NK细胞数量在预测新冠感染预后的ROC曲线下面积分别为0.94,0.80和0.93;其中CD4+T细胞CD8+T细胞数量在预测COVID-19感染预后的ROC曲线下面积分别为0.93和0.90;细胞因子中的IL-6,IFN-γ,IL-8,IL-17和IL-10在预测COVID-19感染预后的ROC曲线下面积分别为0.91,0.71,0.87,0.74和0.90;而联合淋巴细胞亚群和细胞因子在预测新冠感染预后的ROC曲线下面积达到0.99。结论老年患者在新型冠状病毒感染时免疫呈全面低下状态,评估免疫状态对疾病诊断、病情观察以及预后等方面具有重要的临床指导意义。

基于免疫学展开多学科研究生培养模式的探索与实践

解放军总医院第八医学中心呼吸与危重症医学部研究所适临改革调整学科转型之际,依托北京市器官移植与免疫调节重点实验平台,构建以免疫学为核心的多学科研究生联合培养模式,从个体化研究生培养背景、教学模式、能力培养等方面进行分析,探索多个临床学科研究生共同培养的实践模式,以期培养具有系统和整体论的医学思维人才,更好地展开临床工作。

论高校教师职称评价中教学与科研的平衡

我国高校中普遍存在"重科研,轻教学"的现象,本文主要从高校教师职称评价切入,分析了教师职称评价体系中"重科研"现象产生的问题及其形成的原因,提出了建立教学、科研并重,切实可行的教师职称评价体系的观点。

高水平科研团队:建设一流大学的基石

现代科学交叉性和渗透性特点突出,科研团队,作为合作创新的一种有效组织形式,适应了当代科技发展的趋势。世界一流和高水平大学作为科研创新的推动者,也日趋意识到高水平科研团队在提升高校科技创新能力中的重要地位。本文通过文献研究法和实证研究法得出:高水平大学发展必须要建设高水平创新团队。应加强大学对高水平科研团队的引导和控制。

独立学院资助工作育人体系及对策研究——以浙江工业大学之江学院为例

教育是民族振兴的基石，是强国之路，近年来我国教育事业不断深化改革，取得了辉煌的成绩，各类院校迅速发展，学生来源越来越广，数量也越来越多，为国家培养了大量的人才，但是依然有很多学生因为家庭经济贫困而面临求学难的问题。2007年国务院就已经发布了《关于建立健全普通本科高校、高等职业学校和中等职业学校家庭经济困难学生资助政策体系的意见》，经过近10年的时间，现在已基本形成了贫困生资助体系，但是在一些具体的问题上还存在不足，特别是资助体系的育人体系还不完善，这也是本文探讨的重点。

学院现代书院制的实践与研究——以浙江工业大学之江学院为例

近年来,我国教育事业获得了很大的发展,教育体制改革、素质教育改革等不断深化,高校的人才培养模式也在发生变化,全人教育理念越来越受到人们的重视。在这种背景之下,学院现代书院制开始兴起,有效地将第一课堂的通识教育与第二课堂学生社区育人功能进行结合,依托校园"第三空间"育人平台,充分尊重学生,发挥学生的"三自"功能,培养学生的个性发展和能力提升,成为一种非常有效的全新育人模式。文章以浙江工业大学之江学院为例,结合学院特色,探索现代学院制的实践路径,有效开展思想政治教育工作,不断提升学生的思想政治素养,促进学生全面发展。

深入学习贯彻党的十八大精神 全面提升辅导员工作科学化水平

高等院校不仅仅是知识的传授地,更是思想道德的培养圣地,作为当代高校的辅导员,我们肩负着重要的使命。为了响应国家对教育的改革号召,我们认真学习和贯彻党的十八大精神,用正确的社会主义价值观来帮助学校解决发展的问题,帮助学生解决面临的困难。教育是民族振兴和社会进步的基石,要坚持教育优先发展,全面贯彻党的教育方针,坚持教育为社会主义现代化建设服务、为人民服务,把立德树人作为教育的根本任务,培养德智体美全面发展的社会主义建设者和接班人。为此,辅导员有着义不容辞的责任,辅导员的工作和责任非常重要,本文从几个方面阐述了如何科学地提升辅导员的工作。

SE-hBCG对重组巨细胞病毒糖蛋白B及冻干人用狂犬病疫苗免疫原性的影响

目的探讨含角鲨烯的水包油纳米乳剂-热灭活卡介苗(SE-hBCG)对重组巨细胞病毒糖蛋白B(CgB)及冻干人用狂犬病疫苗(Rab)免疫原性的影响。方法选取145只SPF级6~8周龄雌性BALB/c小鼠进行以下实验。实验1:取25只小鼠,分成SE组、SE-hBCG组、CgB组、SE+CgB组、SE-hBCG+CgB组等5组,每组5只;于实验开始第0、2、4周分别给每只小鼠肌内注射SE、SE-hBCG、CgB、SE+CgB、SE-hBCG+CgB各0.2 ml,末次免疫后2周解剖小鼠。实验2:取120只小鼠,分成PBS组、Rab组、SE+Rab组、SE-hBCG+Rab组等4组,每组30只;于实验开始第0周及第1周每只小鼠分别腹腔注射PBS、Rab、SE+Rab、SE-hBCG+Rab各0.2 ml,于初免后第4、8、10、12、14、35天各解剖5只小鼠。无菌摘取小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液,采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测抗原特异的IFN-γ或IL-4的斑点形成细胞数(IFN-γ-SFC或IL-4-SFC);取小鼠眼球血,离心后收集血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原特异的IgG水平。结果SE-hBCG组诱导小鼠产生CgB特异的IFN-γ-SFC(266.0±87.9)高于SE组(104.5±28.8,P<0.05);SE-hBCG+CgB组诱导小鼠产生抗-CgB IgG抗体滴度(18800.0±2396.0)及CgB特异的IFN-γ-SFC(440.5±38.4)高于CgB组(抗体滴度为3333.0±737.9,IFN-γ-SFC为189.2±21.4,P<0.05)。SE+Rab或SE-hBCG+Rab初免后第4天可诱导低水平抗-Rab IgG抗体(OD450≤0.2);Rab、SE+Rab及SE-hBCG+Rab组抗-Rab IgG抗体均于初免后第12天达到峰值;SE-hBCG+Rab组于初免后第8、10、14及35天检测的抗-Rab IgG抗体(分别为1700.0±200.0、19400.0±1661.3、23000±358.9、23600.0±6038.2)均高于Rab组(分别为310.0±97.9、6730.0±1655.4、6000.0±1655.6、4400.0±1655.5,P<0.05)。SE-hBCG+Rab组初免后第4、8、14及35天检测的Rab特异IFN-γ-SFC(分别为110.8±52.5、213.0±29.7、105.2±33.7、80.4±36.8)均高于对照组(分别为6.4±3.5、32.2±12.9、11.4±5.1、4.4±2.5,P<0.05)。结论SE-hBCG可增强CgB及Rab的免疫原性,是一种较好的免疫增强剂。

肾移植术后1个月内因毛霉菌感染致移植肾切除1例报告

毛霉菌为条件致病菌,具有嗜血管的特性,极易侵犯血管,易引起血栓和周围组织坏死及移植肾动脉破裂出血,因此,单纯性移植肾毛霉菌感染是一种严重的疾病,预后极差,病死率高达80%。肾移植术后肾动脉毛霉菌感染比较少见,我院2017年有1例肾移植术后1个月内因毛霉菌感染致移植肾切除的病例,现报道如下。

易误诊为胃恶性肿瘤的亲属肾移植术后人巨细胞病毒性胃炎1例

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒科,直径约为200 nm,是最大的动物病毒之一。HCMV 感染非常普遍,多呈亚临床非显性感染或潜伏感染,当机体免疫力降低时,潜伏状态的HCMV 活化而致病[1]。HCMV 可以感染胃肠黏膜引起巨细胞病毒性胃炎,临床病理特征为胃黏膜变性、坏死和淋巴细胞浸润,肾移植术后HCMV胃炎少见。本文报道2018 年1 例亲属肾移植术后HCMV 胃炎的病例。

BCG复种或结核菌素复强反应对外周血CD4+记忆T细胞特征的影响

目的探讨复种BCG或结核菌素试验复强反应对外周血CD4^(+)记忆T细胞特征的影响。方法将结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)皮试和干扰素释放试验(QuantiFERON-TB Gold in-tube,QFT)均为阴性的健康者(PPD-QFT-)分成2组,其中一组接种BCG(BCG复种组),另一组接种安慰剂(对照组)。12周后,采集受试者外周血进行流式细胞术分析,然后在受试者右臂和左臂皮内分别注射TB-PPD和重组结核杆菌融合蛋白ESAT6-CFP10(EC),48 h观察皮试反应。结果对照组和BCG复种组再次TB-PPD皮试阳性率分别为14.3%和47.9%。对照组、TB-PPD阳转者与TB-PPD阴性反应者比较,其外周血CD27-CD28+CD4^(+)-EM细胞百分含量增加而CD27+CD28-CD4^(+)-CM细胞百分含量降低。BCG复种组、TB-PPD阳转者外周血CD27+CD28-CD4^(+)-EM细胞含量低于TB-PPD阴性反应者。结论成人复种BCG或TB-PPD皮试复强反应可影响外周血CD4^(+)

固有免疫细胞在肺移植中的研究进展

肺移植是许多终末期肺病患者的唯一选择治疗手段,但是其成功率远低于其他实体器官。肺移植早期缺血/再灌注引发机体先天性免疫反应,导致原发性移植物失功(primary graft dysfunction,PGD)是重要的影响因素之一,且可能导致晚期的慢性同种异体肺移植物功能障碍(chronic lung allograft dysfunction,CLAD)[1]。另外,由于肺脏直接与外界环境相通,所以发生感染的风险较高,且环境中许多病原菌可激活机体的免疫系统,导致排斥反应的发生[2]。虽然外科手术技术和术后管理水平的进步及新型免疫抑制剂的不断应用.

肾移植术后稳定状态受者淋巴细胞亚群的动态变化及其与肾功能的相关性分析

目的探讨肾移植术后稳定状态受者外周血淋巴细胞亚群的动态变化及其与肾功能的相关性。方法筛选行首次肾移植且术后半年内移植肾功能稳定的受者45例,采用流式细胞术(FCM)检测受者术后15 d及1、3、6个月共计180份外周血样本淋巴细胞亚群比例和绝对值。分析淋巴细胞亚群随术后时间延长的动态变化及其与血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的相关性。结果受者术后4个时间点Scr值比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后15 d与术后1个月、术后1个月与术后3个月BUN比较,差异均有统计学意义(P=0.002、P=0.001);术后15 d与术后1个月比较,CD3+CD8+T细胞、CD3+CD4+T细胞、自然杀伤(NK)细胞比例及CD4/CD8比值,差异均有统计学意义(P=0.009、P=0.004、P<0.001、P=0.004)。B细胞比例术后15 d与术后1个月比较、术后1个月与术后3个月比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3+CD4+T细胞和NK细胞绝对值术后15 d与术后1个月比较,差异均有统计学意义(P=0.001、P=0.002、P=0.003、P<0.001)。CD3+CD8+T细胞绝对值术后3个月和术后6个月比较,差异有统计学意义(P=0.015)。B细胞绝对值术后1个月与术后3个月比较,差异有统计学意义(P=0.001)。淋巴细胞亚群比例和绝对值与Scr均不相关(均为P>0.05),CD3+CD8+T细胞、NK细胞比例和绝对值与BUN均呈负相关(P<0.001~0.05),CD3+CD4+T细胞、B细胞比例与BUN均呈正相关(P<0.001~0.05),CD3+T细胞绝对值与BUN呈负相关(P<0.05)。结论肾移植术后稳定状态受者的淋巴细胞亚群中T细胞和NK细胞术后1个月内升高至稳定状态,B细胞术后3 个月内降低至稳定状态,且淋巴细胞亚群的动态变化与BUN 相关。

淋巴细胞亚群动态监测在肺移植患者中的应用价值

目的探讨淋巴细胞亚群(包括T、B、NK细胞)动态监测在肺移植术后的应用价值。方法采用流式细胞术动态监测2例肺移植患者术前及术后不同时间点淋巴细胞亚群变化情况。结果2例肺移植患者术前及术后淋巴细胞亚群呈现不同的变化,病例1术前淋巴细胞亚群在正常水平,术后9 d T淋巴细胞亚群绝对数恢复至参考值范围,NK细胞绝对数持续偏低,该患者术后CD4/CD8先低后高,术后6个月淋巴细胞亚群已恢复至正常水平。病例2术前淋巴细胞亚群严重降低,术后7 d CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞绝对数恢复至正常水平,CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞和CD4/CD8持续低下,NK细胞和B细胞稍有波动,多数时间点低于参考值范围。结论肺移植患者术后淋巴细胞亚群动态监测,可及时评估患者免疫状态,为患者个体化诊疗和及时调整用药方案提供参考。

不同他克莫司血药浓度检测方法的对比分析

目的分析化学发光微粒子免疫法和胶乳增强免疫抑制法检测他克莫司(Tacrolimus,Tac)全血药物浓度的结果。方法用化学发光微粒子免疫法和胶乳增强免疫抑制法平行检测96例肾移植受者他克莫司全血药物浓度,对比检测结果差异性并进行相关和回归分析。结果采用化学发光微粒子免疫法测得的Tac血药浓度(5.78±2.18)μg/L低于采用胶乳增强免疫抑制法测得的Tac血药浓度(6.51±2.32)μg/L,且差异具有统计学意义(P<0.001);两种方法检测Tac血药浓度结果呈显著正相关(r=0.9676,P<0.0001);两种方法检测Tac血药浓度结果符合一元线性回归方程Y=0.551+1.032X(其中X为化学放光微粒子免疫法,Y为胶乳增强免疫抑制法)。结论两种方法检测Tac血药浓度具有很好的相关性,但差异显著,不可相互比较,二者可通过一元线性回归方程来互相推算,建议同一患者长期选用同一种方法监测Tac血药浓度,以便为临床提供准确可靠的个体化用药依据。

结核病患者外周血淋巴细胞亚群以及12项血浆细胞因子流式检测分析

目的:分析结核病患者淋巴细胞亚群和12项血浆细胞因子的流式检测结果,探讨其在结核病中的诊断效能。方法:回顾性病例对照研究。选取2022年1月至2023年12月在解放军总医院第八医学中心初诊的有病原学证据或临床确诊的结核病患者128例为研究对象,根据结核分枝杆菌感染部位分为肺结核组(83例)与肺外结核组(45例)。另选择性别、年龄与结核病患者相匹配的健康体检者100例为对照组。采用流式细胞术检测各组外周血淋巴细胞亚群和12项血浆细胞因子[包括10项促炎因子:白细胞介素(IL)-5、干扰素(IFN)-α、IL-2、IL-6、IL-1β、IFN-γ、IL-8、IL-17、IL-12p70、肿瘤坏死因子(TNF)-α和2项抑炎因子:IL-4、IL-10]水平。比较各组淋巴细胞亚群和血浆细胞因子水平的差异,采用Spearman相关法分析淋巴细胞亚群与细胞因子的相关性,二元Logistic回归筛选结核病相关因素,受试者工作曲线(ROC)评价结核病相关因素的诊断效能。结果:与对照组比较,肺结核组和肺外结核组CD3+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、NK细胞和B细胞绝对数较低(P均<0.05),肺结核组除IL-1β外的其他11项细胞因子水平均较高(P均<0.01),肺外结核组IL-6、IFN-γ、IL-17、TNF-α、IL-4和IL-10水平较高(P均<0.05)。与肺外结核组比较,肺结核组IL-8水平较高(P=0.026)。Spearman相关性分析显示,IL-6、IFN-γ、IL-8分别与CD3+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、NK细胞和B细胞绝对数均呈负相关(IL-6:R^(2)=-0.30、-0.28、-0.32、-0.26、-0.28;IFN-γ:R^(2)=-0.36、-0.31、-0.37、-0.25、-0.36;IL-8:R^(2)=-0.14、-0.13、-0.16、-0.14、-0.22;P均<0.001),IL-10与CD3+CD4+T淋巴细胞、NK细胞和B细胞绝对数呈负相关(R^(2)=-0.14、-0.19、-0.21,P均<0.05);二元Logistic回归分析显示,IL-6、IFN-γ、IL-8、IL-10是结核病的相关因素(OR=1.809、1.136、0.910、2.218,P均<0.05);ROC曲线分析显示IL-6、IFN-γ、IL-8、IL-10联合诊断结核病的ROC曲线下面积为0.845,敏感度为0.766,特异度为0.820。结论:肺结核和肺外结核患者的淋巴细胞亚群绝对数和细胞因子水平显示其免疫功能处于低下状态,促炎因子(IL-6、IFN-γ、IL-8)和抑炎因子(IL-10)水平明显升高,4项细胞因子联合检测对结核病具有较高的诊断效能。

浅谈《理解国际冲突:理论与历史》的层次分析法

《理解国际冲突:理论与历史》一书提出了著名的"层次分析法",即利用"体系""国家"和"个人"三个层次来解释国际冲突的原因,为理解国际冲突提供了新的视角。文章从本书的篇章结构出发,深入剖析层次分析法的构建过程,并结合具体事例检验层次分析法的合理性,以求为理论历史的学习提供借鉴。

肾移植术后病毒感染对外泌体研究影响的初步探索

目的探讨移植后病毒感染患者人群体液中存在的病毒颗粒和核酸物质是否会存在于提取的外泌体样品中。方法选取2015年1月至2017年7月于解放军第三。九医院全军器官移植中心行同种异体肾脏移植手术的受者10例，其中白细胞人巨细胞病毒（HCMV）-pp65抗原检测阳性，同时血浆HCMVDNA检测结果为阳性或可疑阳性的病例5例，血浆BK病毒（BKV）DNA检测结果为阳性的病例5例。用试剂盒法提取血浆外泌体，电镜和纳米颗粒粒度分析仪（NTA）观察和分析外泌体。用实时荧光定量PCR分别检测并比较血浆、外泌体和流出液中的病毒DNA拷贝数。结果电镜下可见样本中的外泌体样囊泡结构，NTA检测样品浓度为（1．2～4．5）X10^11颗粒／Ⅱd，颗粒直径30～200nm。外泌体与血浆病毒DNA定量结果基本在同一数量级，而流出液中急遽降低。结论病毒DNA在移植后病毒感染患者外泌体样品中被大量检测出来，不仅提示了病毒传播可能利用了外泌体的生物形成过程，更提醒了现有的外泌体提取方式的局限性可能是病毒感染患者人群中外泌体研究的瓶颈。

水油微球/BCG复合佐剂对结核杆菌融合蛋白PstS1-LEP免疫原性的影响

目的探讨水油微球与热灭活BCG(heat-killed BCG,HKBCG)或无细胞BCG(acellular BCG,ABCG)复合佐剂对结核杆菌融合蛋白PstS1-LEP免疫原性的影响。方法制备水油微球/HKBCG、水油微球/ABCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗,经皮下注射免疫BALB/c小鼠3次,间隔2周,末次免疫后2周采血,处死小鼠并无菌摘脾;ELISA法检测小鼠血清抗Pst S1-LEP的IgG、IgG1和IgG2a抗体,ELISPOT法检测小鼠脾淋巴细胞经PstS1-LEP刺激分泌IFNγ、IL-4和IL-17的斑点形成细胞数(spots forming cell,SFC)。结果水油微球/HKBCG、水油微球/ABCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗免疫小鼠诱导Pst S1-LEP特异性IgG、IgG1和IgG2a水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);水油微球/ABCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗免疫小鼠的IFNγ-SFC、IL-17-SFC及IL-17-SFC/IL-4-SFC均高于水油微球/HKBCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗,而两种疫苗免疫小鼠的IL-4-SFC、IFNγ-SFC/IL-4-SFC和IFNγ-SFC/IL-17-SFC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论水油微球/ABCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗诱导偏向Th1和Th17型细胞免疫,IFNγ-SFC、IL-4-SFC和IL-17-SFC的两两比值显示,水油微球/ABCG复合佐剂PstS1-LEP疫苗更有利于诱导Th17型细胞免疫漂移。