LDH释放法检测肿瘤患者PBMC和CIK细胞的细胞毒活性

目的建立检测细胞毒活性的乳酸脱氢酶(LDH)测定法,了解肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的抗肿瘤活性,为肿瘤的免疫细胞治疗提供参考。方法采集肿瘤患者和健康成人外周血,常规分离PBMC,体外进行CIK的培养,用LDH释放法分别检测PBMC和CIK对肿瘤细胞K562的细胞毒活性。结果肿瘤患者PBMC对K562的杀伤活力比正常人显著降低(P<0.05)。经多种细胞因子诱导培养7～10d后,健康人和肿瘤患者的CIK对K562的杀伤活力都有显著提高(P<0.01),肿瘤患者CIK杀伤活力接近于健康人。结论肿瘤患者PBMC细胞毒活性显著降低,但经诱导培养成CIK后则显著提高。用LDH释放法检测肿瘤病人CIK细胞毒活力,有助于CIK疗法适应病人的选择及个体疗效观察。

CIK体外抗癌活性分子机制的探讨

目的:分析细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)抗肿瘤活性增强的分子机制。方法:从健康人志愿者和恶性肿瘤患者PBMC培养获得CIK细胞,用LDH释放法分别对PBMC和CIK进行体外杀伤肿瘤细胞的活性测定,用流式细胞术分析PBMC和CIK细胞群中颗粒溶素(granulysin,GNLY)和穿孔素(perforin,PFN)的表达。结果:在效靶比为5∶1时,健康人和肿瘤患者PBMC对肿瘤细胞K562的裂解率分别为6.33%和1.29%,两组CIK细胞对肿瘤细胞K562的裂解率分别为14.7%和14.16%,PB-MC与CIK对细胞的裂解率显著提高,P<0.01;GNLY阳性表达细胞百分比由4.43%和1.95%上升到19.15%和17.52%,P<0.01。但PFN细胞却由21.91%和14.69%降低到4.96%和3.7%,P<0.05。结论:肿瘤患者PBMC抗肿瘤活性下降可能与该细胞中GN-LY和PFN表达减少有关;CIK细胞杀伤肿瘤活性的提高可能与GNLY的表达增加相关;PFN表达下降可能是维持CIK细胞在体外大量增殖的调节因素。

由咽食管异物引起的致死性颈深部脓肿18例分析

目的:回顾性调查由下咽或颈段食管异物引起的致死性颈深部脓肿的类型和相关因素。方法:32例颈深部脓肿患者中18例有明确的下咽或颈段食管异物史。回顾性调查患者年龄、起病原因、临床表现及诊治经过。结果:18例患者中13例根据脓肿范围及时行颈部或胸部脓肿引流,紧急行气管切开术9例,环甲膜切开术2例。16例成功救治,2例死亡。结论:下咽或颈段食管异物创伤是引起颈深部脓肿的常见原因,及时行脓肿切开引流和气管切开术是成功救治的关键。