氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡及bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察氨茶碱对体外不同密度嗜酸细胞 ( Eos)凋亡及 bcl- 2 m RNA表达的影响 ,探讨其促进哮喘 Eos凋亡的机制。方法卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型 4 8h后行支气管肺泡灌洗 ,分离不同密度 Eos。氨茶碱 ( AM) ( 10 - 6 ～ 10 - 3m ol/L)干预 2 4 h,原位杂交检测 Eos的 bcl- 2 m RNA表达 ,TU NEL 法检测细胞凋亡。结果 AM干预 2 4 h,可见 Eos凋亡增加 ,以低密度 Eos( HEos)为明显 ,bcl- 2 m RNA表达降低 ,呈剂量依赖性。bcl- 2 m RNA的表达与 Eos凋亡呈负相关。结论 AM可抑制 bcl- 2 m RNA表达 ,促进 Eos凋亡。 bcl- 2参与了 AM对 Eos凋亡的调节。

雷公藤甲素对哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡及Fas,Bcl-2 mRNA表达的影响

目的 :观察雷公藤甲素 (triptolide ,TP)对体外不同密度嗜酸粒细胞 (eosinophils ,Eos)凋亡及Fas ,Bcl 2mRNA表达的影响 ,探讨其促进哮喘时Eos凋亡的机制。方法 :卵蛋白激发豚鼠哮喘 4 8h后行支气管肺泡灌洗 ,分离不同密度Eos。加入TP10 - 7～ 10 - 4mol·L- 1,以原位杂交检测Eos的Fas及Bcl 2mRNA表达 ,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 :TP干预 2 4h ,可见细胞凋亡增加 ,FasmRNA表达增加 ,Bcl 2mRNA表达降低 ,呈剂量依赖性。Fas表达与Eos凋亡呈正相关 ,而Bcl 2的表达与Eos凋亡呈负相关。结论 :TP可促进Fas表达 ,抑制Bcl 2表达 ,促进Eos凋亡。Fas表达增加及Bcl

雷公藤甲素对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞IL-5等受体表达的影响

目的观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage f luid,BALF）中不同密度嗜酸细胞(Eos）上白介素-5受体α(IL-5Rα)、IL-3Rα、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα）及共同β链受体（βcR）mRNA表达及雷公藤甲素（TP）对它们的影响，探讨TP促进哮喘Eos凋亡的机制。方法健康豚鼠18只随机分为正常组、哮喘组、TP组。以卵蛋白 致敏激发制作豚鼠哮喘模型，分离BALF中的低密度Eos（HEos）及正常密度Eos（NEos），TUNEL法检测细胞凋亡，原位杂交检测各受体mRNA表达，RT-PCR法检测Eos IL-5Rα、IL-3Rα相对含量。结果哮喘豚鼠Eos凋亡明显减少，而细胞数明显高于正常组。用TP 24 h后不同密度Eos数量明显低于哮喘组（P<0.01），以HEos下降为明显（P<0.05）;TP组Eos凋亡明显高于哮喘组(P<0.01)。哮喘豚鼠Eos表达α受体mRNA明显低于正常组，而βcR表达明显增高；TP处 理组Eos各α受体mRNA表达均明显增加，βcR表达明显下降。RT-PCR检测显示，TP组IL-5R α、IL-3Rα mRNA显著增加。结论哮喘Eos存在凋亡抑制；TP可通过促 进IL-5、IL-3、GM-CSF受体各自α链表达，抑制这3种受体的共同β链表达，减少其生物 学功能，促进Eos凋亡。

哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞Fas表达及药物的影响

目的：研究哮喘时嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）凋亡与Ｆａｓ表达的关系及药物对它们的影响。方法：应用地塞米松（ＤＭ）、雷公藤甲素（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ，ＴＰ）及氨茶碱（ＡＭ）干预哮喘豚鼠，以ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡，以ＲＴ－ＰＣＲ及原位杂交检测ＦａｓｍＲＮＡ表达。结果：哮喘组Ｅｏｓ凋亡率较正常对照组显著降低（Ｐ＜０．０１），应用ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ后均显著增加（Ｐ＜０．０１）。正常豚鼠Ｅｏｓ可检测到ＦａｓｍＲＮＡ表达，不同密度Ｅｏｓ表达差异不显著（Ｐ＞０．０５）。哮喘组ＦａｓｍＲＮＡ明显减少，以低密度Ｅｏｓ减少明显（Ｐ＜０．０５），应用ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ后其表达明显增加。结论：凋亡调节的缺失是导致组织及血中Ｅｏｓ增多的重要原因，Ｆａｓ抗原参与了哮喘Ｅｏｓ凋亡的调节，低密度Ｅｏｓ更能反映哮喘的特征。ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ可促进哮喘肺组织中的Ｅｏｓ表达Ｆａｓ抗原，进而加强细胞凋亡。

氨茶碱对体外嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的 通过观察氨茶碱对体外不同密度嗜酸性粒细胞 (Eos)凋亡及FasmRNA表达的影响 ,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法 卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型 4 8h后行支气管肺泡灌洗 ,分离不同密度Eos。氨茶碱 (AM )( 10 -6 ～ 10 -3mol·L-1)干预 2 4h ,原位杂交检测Eos的FasmRNA表达 ,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 AM干预 2 4h ,可见Eos凋亡增加 ,以低密度Eos(HEos)为明显 ,与不加药物相比 ,在 10 -5mol·L-1时差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,FasmRNA表达降低 ,呈剂量依赖性 ,HEos与正常密度 (NEos)相比 ,其FasmRNA表达无差别。FasmRNA的表达与Eos凋亡呈正相关。结论 AM可提高FasmRNA表达 ,促进Eos凋亡。Fas可能是AM调节Eos凋亡的通路之一。

地塞米松对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡及bc1-2 mRNA表达的影响

目的观察地塞米松（ＤＭ）对哮喘豚鼠体外不同密度的嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）凋亡及ｂｃ－２表达的影响，并探讨激素促进哮喘ＥＯＳ凋亡的机制。方法以卵蛋白激发哮喘豚鼠模型４８ｈ后，进行支气管肺泡灌洗，分离灌洗液中不同密度的Ｅｏｓ。加入ＤＭ（１０～（１０）～１０～５ｍｏｌ／Ｌ），以原位杂交法检测Ｅｏｓ的ｂｃｌ－２表达，ＴＵＮＥＬ法检测Ｅｏｓ的凋亡。结果ＤＭ干预２４ｈ，可见Ｅｏｓ凋亡增加，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达降低，且呈剂量依赖性。ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ的表达与Ｅｏｓ凋亡呈负相关。结论ＤＭ可抑制ｂｃｌ－２的表达，促进ＥＯＳ凋亡。ｂｃｌ－２表达的减少可能是ＤＭ调节Ｅｏｓ凋亡的机制之一。

氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-3、IL-5及GM-CSF受体表达的影响

目的 观察氨茶碱(AM)对嗜酸细胞(Eos)上白介素 5受体α(IL 5Rα)、白介素 3受体α(IL 3Rα)、粒 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨茶碱促进哮喘Eos凋亡的机制。方法 18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、茶碱组,每组 6只,以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管灌洗液(BALF)中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos),以末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,RT PCR法检测EosIL 5Rα、IL 3Rα相对含量。结果 哮喘组HEos及NEos凋亡 (4±2, 3±2)明显低于正常组(8±2, 7±2,P<0 01),而哮喘组细胞数 (75±13, 51±11 )明显高于正常组(5±2, 10±3,P<0 01)。用AM 24h后不同密度Eos数量 ( 36±14, 33±8 )均明显低于哮喘组 (P<0 01, 0 05),AM组Eos凋亡 ( 15±5, 14±4 )明显高于哮喘组(P<0 01);哮喘组Eos表达IL 5、IL 3及GM CSFα受体mRNA,明显低于正常组 (P<0 01, 0 05 ),AM组中低密度Eos表达各受体mRNA均明显高于哮喘组 (P<0 05 );而哮喘组βcR表达(41±6, 39±7)表达显著高于正常组 (28±5,26±5,P<0 01),AM组βcR表达与哮喘组比较差异无显著性(P>0 05)。

地塞米松对哮喘豚鼠肺组织嗜酸细胞bcl-2表达的影响及意义

目的研究哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞(Eos)凋亡与bcl-2 mRNA表达的关系及地塞米松(DM)对它们的影响。方法应用DM干预哮喘豚鼠,分离哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中不同密度Eos,以TUNEL法检测细胞凋亡,以原位杂交检测bcl-2 mRNA表达。结果哮喘组Eos凋亡率较正常组明显降低(P<0.01),应用DM后均显著增加(P<0.01)。正常豚鼠Eos可检测到bcl-2 mRNA表达,不同密度Eos表达无显著差异(P>0.05)。哮喘组bcl-2 mRNA明显增加,应用DM后其表达明显减少。结论凋亡调节的缺失是导致组织及血中Eos增多的重要原因,bcl-2参预了哮喘Eos凋亡的调节。DM可促进哮喘肺组织中的Eos细胞凋亡,bcl-2可能是DM调节Eos细胞凋亡的重要途径之一。

雷公藤甲素对体外不同密度嗜酸细胞凋亡及GM-CSF受体αmRNA表达的影响

目的观察雷公藤甲素(Triptolide,TP)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸细胞(Eos)凋亡及粒细胞-巨噬细胞克隆剌激因子受体α(GM-CSFRα)mRNA表达的影响,探讨TP促Eos凋亡的机制。方法卵蛋白激发哮喘豚鼠48h后,行支气管肺泡灌洗,分离低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos)。HEos及NEos分别与TP(10-7～10-4mol/L)共培养24h,以原位杂交检测Eos表达GM-CSFRαmRNA,3′末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(d-UTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果哮喘豚鼠不同密度Eos经TP干预24h后,细胞凋亡增加,与对照相比HEos在10-7mol/L时出现差异(P<0.05),NEos在10-6mol/L时出现差异(P<0.05),同时不同密度EosGM-CSFRαmRNA表达增加,与对照相比均在10-5mol/L时出现差异(P<0.05)。Eos凋亡与TP浓度呈剂量依赖性。HEos与NEos表达GM-CSFRα无差异(P>0.05)。不同密度Eos表达GM-CSFRα与Eos凋亡呈正相关(P<0.05)。结论TP可促进哮喘豚鼠不同密度Eos凋亡,提高GM-CSFRα mRNA表达,TP可通过提高Eos表达可溶型GM-CSFRα,抑制GM-CSF细胞因子活动,促进Eos凋亡。

哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞凋亡及活性变化

目的 :研究哮喘时肺内不同密度嗜酸细胞 (Eos)凋亡与活性的关系 ,探讨其在哮喘发病中的作用。方法 :健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组 ,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型 ,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液 (BALF)中低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos) ,TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫细胞化学方法检测EosEG2 +。结果 :哮喘组不同密度Eos均显著高于正常组 ,以HEos为著 (P <0 .0 1 ) ;Eos凋亡率明显低于正常组 (P <0 .0 1 )。HEos、NEos细胞数与细胞凋亡率明显负相关。EG2 +检测显示 ,嗜喘组明显高于正常组 ,哮喘组HEos明显高于NEos。HEos、NEos凋亡与EosEG2 +明显负相关。结论 :哮喘时Eos存在凋亡抑制 ,细胞活性增加 ,细胞凋亡受阻是哮喘Eos增多、活性增加的原因之一。

氨茶碱对体外不同密度嗜酸细胞凋亡和白介素5受体α mRNA表达的影响

目的观察氨茶碱(抗哮喘药)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸细胞 (Eos)凋亡及白介素5受体α(IL-5Rα)mRNA表达的影响。方法制备卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型,48 h后,行支气管肺泡灌洗,分离低密度及正常密度Eos(HEos,NEos),HEos及NEos分别与(1×10-6-1×10-3mol· L-1)氨茶碱共培养24 h;以原位杂交方法检测不同Eos的IL-5Rα mRNA表达,在3’末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端,标记法检测细胞凋亡。结果氨茶碱干预24 h后,可见Eos细胞凋亡增加,不同密度 Eos IL-5Rα mRNA表达也增加,且与氨茶碱浓度呈剂量依赖关系,IL-5Rα表达与Eos凋亡呈正相关(P<0．05)。结论氨茶碱可促进不同密度Eos表达IL-5Rα,抑制其细胞因子活动,促进Eos凋亡。

地塞米松对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及fas、bcl-2 mRNA表达的影响

目的:观察地塞米松(DM)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸性粒细胞(Eos)凋亡及fas、bcl-2mRNA表达的影响,探讨DM促进哮喘Eos凋亡的机制。方法:卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48h后行支气管肺泡灌洗,分离低密度及正常密度Eos(HEos,NEos)。HEos及NEos分别与地塞米松(DM)(10-10-10-5mol/L)共培养24h,以原位杂交方法检测不同Eos的fas及bcl-2mRNA表达,3’末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(d-UTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果:DM干预24h后,可见Eos细胞凋亡增加的同时,不同密度Eos的fasmRNA表达也增加,bcl-2mRNA表达降低,并与DM浓度呈剂量依赖性。fas表达与Eos凋亡呈正相关(P<0.05),而bcl-2的表达与Eos凋亡呈负相关(P<0.05)。结论:DM可促进不同密度Eosfas表达,抑制其bcl-2表达,促进Eos凋亡。DM可以通过嗜酸性粒细胞fas表达增加及bcl-2表达减少而调节Eos凋亡。

雷公藤甲素对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡与活性的影响

目的 :观察雷公藤甲素 (TP)对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中嗜酸细胞 (Eos)凋亡及活性的影响 ,探讨TP治疗哮喘的机制。方法 :以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型 ,随机分为哮喘组、TP组 ,密度梯度分离法分离BALF中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos) ,以TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫细胞化学的方法检测EosEG2 +。结果 :用TP 2 4h后细胞总数及不同密度Eos数量均明显低于哮喘组 (P <0 .0 1) ,以HEos下降为明显 (P <0 .0 5 ) ,BALF中Eos以NEos为主 ;TP组Eos凋亡明显高于哮喘组 (P <0 .0 1) ,不同密度Eos凋亡率无明显差异 ;EG2 +检测显示 ,哮喘组HEos明显高于NEos,表明哮喘时以HEos增加为主。TP组EosEG2 +明显低于哮喘组 ,HEos与NEosEG2 +无明显差异。结论 :TP可促进哮喘豚鼠肺内Eos凋亡 ,抑制Eos活性 ,这是其减少肺内Eos浸润。

哮喘豚鼠嗜酸细胞Bcl-2和Bax mRNA表达及意义

目的:观察Bcl-2及Bax mRNA表达与嗜酸粒细胞（Eos）凋亡的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法:健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型,检测支气管灌洗液（BALF）中低密度EoS（HEos）及正常密度Eos（NEos）细胞凋亡,原位杂交及RT-PCR法检测Bcl-2及Bax mRNA表达。结果:哮喘组EoS显著高于正常组,以HEos为著（P<0.01）;Eos凋亡率明显低于正常组（P<0.01）。哮喘组不同密度Eos表达Bcl-2 mRNA明显增加,而Eos表达Bax mRNA明显减少。结论:哮喘时Eos存在凋亡抑制,这是哮喘时Eos增多的原因之一,哮喘豚鼠BALF Eos表达Bcl-2增加,表达Bax减少,表明Bcl-2及Bax可通过调节Eos凋亡参与哮喘发病。

地塞米松对嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的:观察地塞米松对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸性粒细胞(Eos)凋亡及Fas mRNA表达的影响,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法:卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48 h后行支气管肺泡灌洗,分离不同密度Eos。地塞米松(DM)(10-10~10-5mol/L)干预24 h,原位杂交检测Eos的Fas mRNA表达,3'末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(d-UTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果:DM干预24 h,可见Eos凋亡增加,以低密度Eos(HEos)为明显,与对照组相比,在10-9mol/L时出现显著差别(P<0.05);DM可使Eos表达Fas mRNA增加,并具有剂量依赖性;HEos与NEos相比,其Fas mR-NA表达无明显差别;Eos Fas mRNA表达与其细胞凋亡呈正相关。结论:DM可提高Fas mRNA表达,促进Eos凋亡。Fas可能是DM调节Eos凋亡的通路之一。

基于Agent的网络通用考试系统的研究与实现

针对职业院校学生的认知特点,分析了职业院校学生的评价体系,建立了以学生认知能力分析Agent,智能组卷Agent和智能考试Agent为核心的系统模型,并详细阐述了各Agent的内部结构和功能,提出基于学生知识点掌握程度值的智能组卷算法,并最终实现了基于B/S模式的智能化网络通用考试平台.

地塞米松对体外嗜酸细胞白介素5受体αmRNA表达的影响及意义

观察地塞米松(DM)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸细胞(Eos)凋亡及白介素5受体α(IL-5Rα)mRNA表达的影响,探讨DM促进哮喘Eos凋亡的机制。以卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48h后行支气管肺泡灌洗,分离低密度及正常密度Eos(HEos,NEos)。HEos及NEos分别与DM(10-10-10-5mol/L)共培养24h,以原位杂交方法检测不同Eos的IL-5RαmRNA表达,3'末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果显示DM干预24h后,可见Eos细胞凋亡增加的同时,不同密度EosIL-5RαmRNA表达也增加,并与DM浓度呈剂量依赖性。IL-5Rα表达与Eos凋亡呈正相关(P<0.05)。表明DM可促进不同密度Eos表达IL-5Rα,抑制其细胞因子活动,促进Eos凋亡。DM可以通过增加EosIL-5Rα表达调节Eos凋亡。

地塞米松对不同密度嗜酸细胞凋亡及GM-CSF受体αmRNA表达的影响

目的:观察地塞米松(DM)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸细胞(Eos)凋亡及粒细胞巨噬细胞克隆刺激因子受体α(GMCSFRα)mRNA表达的影响,探讨DM促进哮喘Eos凋亡的机制。方法:卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型,48h后行支气管肺泡灌洗,分离低密度及正常密度Eos(HEos,NEos)。HEos及NEos分别与DM(10-10～10-5)mol/L共培养24h,以原位杂交方法检测不同Eos的GMCSFRαmRNA表达,3′末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果:DM干预24h后,在Eos凋亡增加的同时,不同密度EosGMCSFRαmRNA表达也增加,并与DM浓度呈剂量依赖性。GMCSFRα表达与Eos凋亡呈正相关(P<0.05)。结论:DM可促进不同密度Eos表达GMCSFRα,抑制其细胞因子活动,促进Eos凋亡。

雷公藤甲素与地塞米松对哮喘豚鼠不同密度嗜酸粒细胞凋亡及bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察雷公藤甲素(TP)与地塞米松(DM)对体外不同密度嗜酸粒细胞(Eos)凋亡及bcl-2 mRNA表达的影响,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制.方法卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48小时后行支气管肺泡灌洗,分离不同密度Eos.TP(10-7～10-4mol/L) 或DM(10-10～10-5mol·L-1)干预24小时,原位杂交检测Eos的bcl-2 mRNA表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 TP及DM干预24小时,可见Eos凋亡增加,以低密度Eos(HEos)为明显,bcl-2 mRNA表达降低,呈剂量依赖性.bcl-2 mRNA的表达与Eos凋亡呈负相关.结论 TP及DM可抑制bcl-2 mRNA表达,促进Eos凋亡.bcl-2参与了TP及DM对Eos凋亡的调节.TP可能具有激素样促进细胞凋亡的作用.

高职院校数字化校园建设机制探讨和实践

本文从高职院校数字化校园建设现状和存在的主要问题入手,剖析了主要原因,并探讨了高职院校数字化校园建设的机制问题,提出了健全组织机构、完善管理制度、强化顶层设计和培养技术队伍等四个方面的措施,最后以浙江工业职业技术学院数字化校园建设为例,分享了数字化校园建设的成功实践经验,具有很好的借鉴意义。