抗B型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其鉴定

本文用纯化B型葡萄球菌肠毒素(SEB)免疫Balb/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,经筛选及克隆化共获6株能稳定分泌抗SEB的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。通过将以混合佐剂(降植烷+FIA的混合物)和杂交瘤细胞同时注射制备McAb腹水的方法与常规法相比较,不仅量多(多1.56～1.84倍),而且活性好(高1个数量级)。初步鉴定表明:6株McAb均属IgGl亚类;其培养上清和腹水的ELISA滴度分别为10^(-3)～10^(-4)和10^(-5)～10^(-8)。它们与SEA均不起反应,其中3株(Sl.B4和E7)与SECl有轻微交叉反应;都能被10μg/m的SEB完全阻断等。说明其免疫学活性及特异性均较良好。

抗葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体的免疫学特性鉴定及其应用

作者以国产纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)免疫BALB/c小鼠制备出6株抗SEB单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系(S_1,S_2,D_1,3D_6,B_4及E_7).对其分泌的抗SEB McAb的主要免疫学特性鉴定的结果表明,6株McAb具有相同的表位特异性或构象表位相关;它们的相对亲和力由高至低依次为:S_1>D_1>3D_6>B_4>S_2>E_7;对SEB刺激外周血单个核细胞(PBMC)增殖活性的中和抑制作用不一(抑制率65.1％-22.0％).在上述鉴定的基础上,应用D_1株McAb建立的BA-ELISA及反向被动血凝试验(RPHA),检测了SEB人工污染的4种食物标本,所获敏感性分别为:0.38-0.75ng/ml及9.4-15.6ng/ml.

抗B型葡萄球菌肠毒素(SEB)单克隆抗体的研制及其初步鉴定(简报)

葡萄球菌肠毒素是一组分子量为24,000—34，000的单肽链蛋白质。已知有SEA、SEB、SECs(包括SEC1，SEC2及SEC8)，SED及SEE等血清型。都能引起食物中毒。并证实SEA和SEB还具有强烈的有丝分裂原效应。对机体可产生广泛地免疫调节作用。因此，建立抗SEB单抗的杂交癌细胞系具有重要的实际意义。

免疫学简介(2)

抗原(Antigen)一、概念及特征抗原是指通过非肠道途径进入机体后,能刺激机体免疫系统产生免疫效应物质(抗体或致敏淋巴细胞)并与之发生结合而出现特异性免疫反应的物质.作为抗原一般具有两个特征:①刺激机体产生免疫效应物质的能力,称为免疫原性或抗原性;

免疫学简介(1)

第一章免疫学概论免疫学(Immunologg)是研究生物体对抗原物质应答的理论及其方法的科学。早期的免疫学是从19世纪抗细菌性感染的研究中逐渐形成的。因此,原是细菌学的一个分支,主要研究传染病的特异性预防、诊断和治疗。近30年来由于近代生物学的发展和许多实验技术的建立。

免疫学简介(3)

第三章免疫球蛋白免疫球蛋白(Immunoglob lin,Ig)是世界卫生组织专题委员会于1964年命名的。包括具有免疫活性的抗体和极少数化学结构上与抗体相似,但不具免疫活性或活性甚低的球蛋白,如多发性骨髓瘤病人血清中的髓瘤蛋白。Ig与抗体虽有区别。

TLSF_(JM)对T细胞IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化的调节作用

应用免疫组化染色技术,研究了TLSF_(JM)对T细胞IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化的调节作用。结果表明:TLSF_(JM)对PHA或PA活化的人PBMC以及小鼠CTLL-2 IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化具有明显的抑制作用,但对在T淋巴细胞增殖、分化过程中起重要作用的细胞因子IL-1、IL-2和IL-6的产生无明显影响。

胎盘因子对机体细胞免疫功能的调节作用

紫河车,出自《本草纲目》。又名混沌衣、人胞。有补气、养血、温肾、益精之功效。近年来对胎盘及其制剂的研究已日益受到重视。本文在观察了胎盘因子(PF)对T淋巴细胞的增殖影响的基础上,应用CTLL细胞株作为指示细胞以及碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色对诱导的外周血单个核细胞(PBMC)IL-2产生以及IL-2R的表达进行了研究。材料与方法一、胎盘因子制备:按文献进行。二。

红细胞在葡萄球菌肠毒素B刺激人PBMC增殖中的辅佐作用

通过葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激人外周血淋巴细胞增殖,对完整红细胞及红细胞膜能否在提呈抗原中起辅佐作用进行了研究,并与单核细胞的辅佐作用进行了对比。结果显示,在SEB刺激去除单核细胞的人外周血淋巴细胞中,分别加入红细胞、红细胞膜碎片或单核细胞后,淋巴细胞增殖均有明显升高(P<0.01)。当同时加入红细胞和单核细胞时,淋巴细胞增殖的幅度略高于单独加入红细胞或单核细胞组。提示红细胞具有与单核细胞作用类似而机理不同的辅佐作用。

TLSF_（JM）对PMA诱导Jurkat细胞IL－2Rα链基因表达的抑制作用

本文应用原位杂交和双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ方法，探讨了来自ＪＭＴ细胞白血病细胞系产生的抑制因子（ＴＬＳＦ_（ＪＭ））对ＰＭＡ诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒα链基因表达的影响。结果表明：ＴＬＳＦ_（ＪＭ）可明显抑制ＰＭＡ诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒα链ｍＲＮＡ转录，并降低膜表面ＩＬ－２Ｒα链的表达和细胞培养上清中可溶性ＩＬ－２Ｒ（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究＊董邦权李恩善雷祚荣１杨琨金伯泉汪美先（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２）由金黄色葡萄球菌产生的肠毒素（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，简称ＳＥ）是一组分子量为２４～３０ｋｄ的单肽...

Fas(Apo-1/CD95)及其配体在免疫病理学中的作用

Ｆａｓ系统是新近受到普遍重视的介导细胞凋亡的信号转导系统。本文主要综述了Ｆａｓ系统在某些肿瘤细胞免疫逃逸中的重要作用；Ｆａｓ系统参与淋巴细胞克隆的选择，以及参与某些自身免疫性疾病。

吐温20、BSA和8种血清在ELISA中抑制作用的比较

目前酶联固相免疫测定(ELISA)已成为广泛应用的一种血清学试验。本法的主要优点是:敏感、快速、简便,不需特殊的设备等。但在某些实验系统中易受非特异性反应的干扰而影响其特异性。一般试验流程中的步骤越多,非特异性反应越明显。为此,常需使用一定的抑制剂来克服非特异性反应的干扰。为了探讨各种抑制剂的作用效果,

分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用

应用常规方法建立了３株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌Ｃ１型肠毒素（ＳＥＣ１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系Ｂ３、Ｃ４和Ｇ８。其中Ｂ３和Ｃ４均为ＩｇＧ１（ｋ），Ｇ８为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。Ｂ３和Ｇ８与ＳＥＡ、ＳＥＢ及ＳＥＤ均无交叉反应；Ｃ４虽与ＳＥＡ和ＳＥＤ无交叉反应，但与ＳＥＢ有交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水效价为１０－５～１０－８。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＳＥＣ１，敏感性可达１ｎｇ／ｍｌ。

抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用

应用小鼠杂交瘤技术获得５株分泌抗Ｄ型葡萄球菌肠毒素（ＳＥＤ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞（ＤＣ３、ＤＣ４、ＤＢ１１、４Ｄ３和４Ｄ５）。其中４Ｄ３为ＩｇＭ（λ），其余为ＩｇＧ１（ｋ）。这组ＭｃＡｂ除ＤＣ３外，其它４株ＭｃＡｂ识别的抗原构象表位相同，其相对亲和力依次为４Ｄ５＞ＤＣ３＞ＤＣ４＞４Ｄ３＞ＤＢｌｌ。利用抗ＳＥＤ多克隆抗体与ＨＲＰ标记的ＤＣ３和４Ｄ３（针对不同表位）混合ＭｃＡｂ建立了夹心ＥＬＩＳＡ法，并以该法检测了自临床标本中分离的８０林金葡萄菌所产生的ＳＥＤ，其产毒率为４１．３％。

CD95介导细胞凋亡机制的最新研究动态

ＣＤ９５介导细胞凋亡机制的最新研究动态刘志国樊代明李恩善＊（第四军医大学西京医院全军消化中心＊免疫学教研室，西安７１００３２）ＣＤ９５（Ｆａｓ／Ａｐｏ－Ｉ）为神经生长因子／肿瘤坏死因子（ＮＧＦ／ＴＮＦ）受体超家族成员，主要表达于活化Ｔ细胞表面，其配体...

新生血管抑制分子IP-10/Crg-2的cDNA克隆及序列鉴定

目的： 拟获得编码ＩＰ１０ （ＩＦＮγｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ１０） 和Ｃｒｇ２ （ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｇｅｎｅ２） 的ｃＤＮＡ 序列。方法： 针对ＩＰ１０ 和Ｃｒｇ２ 的ｃＤＮＡ序列设计相应引物， 通过反转录ＰＣＲ技术， 分别从用ＩＦＮγ及ＴＮＦα处理的人成纤维细胞及Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠肝脏中， 扩增出编码ＩＰ１０ 和Ｃｒｇ２ 的全基因序列， 并将其克隆入载体ｐＵＣ１９及ｐＧＥＭ３Ｚｆ （＋ ） 中， 通过酶切及序列测定鉴定重组载体。结果： 经序列测定证实， 重组载体含有正确地分别编码ＩＰ１０ 及Ｃｒｇ２ 的ｃＤＮＡ序列。结论： 获得的阳性克隆分别含有３０６ｂｐ 和３１４ｂｐ 的重组片段， 为进一步对其生物学活性和配体进行研究奠定了基础。

一种用于制备McAb杂交瘤的体内和体外联合免疫诱导方法

在研制抗可溶性抗原McAb杂交瘤的免疫过程中,若免疫原的分子量较小、免疫原性较弱或抗原珍贵难以获得时,选择最适的免疫方法和途径对于制备高质量McAb杂交瘤甚为重要。近年来,国内外对此曾进行了一些探讨,并取得一定的进展。

抗人黑(素)瘤单克隆抗体免疫组化的研究

本文应用3种小鼠抗黑色素瘤单克隆抗体(McAbs)Leo Me13、HB 59、HB60和APAAP免疫组化染色对5种黑(素)瘤细胞系、7种其它肿瘤细胞系以及黑(素)瘤和各种皮肤色素痣的病理标本进行了研究。结果表明,黑(素)瘤细胞系均呈阳性反应,其它肿瘤细胞系仅1种呈弱阳性反应;黑(素)瘤病理标本的阳性率为93％,皮肤色素痣的阳性率为11％。提示这3种McAbs特异性较高。本文所获结果可为黑(素)瘤抗原的基础研究和临床病理诊断提供实验依据。

基因免疫诱导9.1C3分子内影像类抗独特型抗体的产生

本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单克隆抗体重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＳ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪分析表明，基因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像类抗独特型抗体的产生。