宫颈癌HeLa细胞内HPV L1蛋白表达的观察

目的:通过观察电镜下所见的人宫颈癌细胞株——HeLa细胞胞质内包涵体类物质的性质,了解人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌细胞内HPV主要外壳蛋白(L1)的表达规律。方法:培养HeLa细胞,采用ELISA、光镜和电镜的免疫组织化学、Western blot方法,以HPV18 L1小鼠单克隆抗体对细胞内L1的表达情况进行检测,同时用反转录PCR方法检测细胞内L1 mRNA的存在。结果:ELISA检测显示,HeLa细胞裂解液内有HPV L1的存在。HRP标记的光镜免疫组织化学显示,培养的HeLa细胞呈现强的HPV L1阳性反应。电镜下观察,可见部分培养的HeLa细胞胞质内有团块状包涵体样物质,这些团块由大小均匀的颗粒样物质密集而成。这些颗粒性物质可为HPV L1抗体携带的胶体金颗粒标记。Western blot检测结果显示,HeLa细胞裂解液在56 kD区域,出现了一条L1特异阳性条带,说明HeLa细胞内有HPV18 L1的存在。反向PCR方法检测显示细胞内有L1 mRNA的存在。结论:电镜下所见到的培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞胞质内的包涵体类物质,系由HPV18 L1构成,说明HeLa细胞能够表达L1。

HPVL1在不同宫颈病变组织中的表达规律探讨

目的探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表达情况。结果共收集到48例标本,其中42例HPV16阳性,3例HPV18阳性。HPV16阳性标本中,25例病毒基因组为游离型,7例为混合型,10例为整合型;HPV18阳性标本全部为整合型。ELISA及蛋白质印迹检测显示,随着病变程度的加重,HPV L1的表达量有逐渐降低的趋势。免疫组织化学显示,组织内的HPV L1阳性反应有多种形式,依病变组织内病毒基因组物理状态、病变组织分化程度以及病变进程的不同而不同。结论 HPV L1在宫颈病变组织内的表达有一定的结构基础,其表达量与病毒基因组在病变组织和细胞内的物理状态、肿瘤组织的分化程度、病毒基因组插入宿主基因组基因序列的状态有着非常密切的关系。

人乳头瘤病毒与生殖系统肿瘤

人乳头瘤病毒是一种与肿瘤发生发展密切相关的病毒,已被鉴定出的HPV血清型有120余种,其中约40种可以感染人生殖器,被称为"生殖器"型,主要引起生殖器部位的良、恶性病变。全文就HPV与生殖系统肿瘤的关系及研究进展进行综述。