绞股蓝总皂苷激活Atgl诱导结肠癌细胞凋亡的作用研究

目的分析绞股蓝总皂苷(gypenosides,Gyp)对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用,并阐明其机制。方法采用Cell counting kit-8(CCK-8)法和流式细胞术检测细胞活力、细胞周期分布及凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印记(Western blot)分别检测mRNA和蛋白质表达水平;采用Bodipy染色检测脂滴数量。结果Gyp呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HCT116细胞增殖;Gyp显著增加G_(0)/G_(1)期HCT116细胞的比例,下调周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs,包括CDK2、CDK4和CDK6)蛋白的表达水平并上调p21和p27蛋白的表达水平;Gyp显著增加凋亡的HCT116细胞的比例,上调活化型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、活化型聚(ADP-核糖基)转移酶1[Cleaved Poly(ADP-ribose)polymerase 1,Cleaved PARP1]和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达水平并下调B淋巴细胞瘤-xl(B cell lymphoma-xl,Bcl-xl)蛋白的表达水平;Gyp显著降低HCT116细胞中脂滴的数量,下调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,Fasn)mRNA的表达水平并上调甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)mRNA及蛋白的表达水平;与Gyp单独处理相比,Gyp与阿格列他汀(Atgl inhibitor,Atgl抑制剂,简称Atgli)合用显著增加HCT116细胞中的脂滴数量、显著下调HCT116细胞的凋亡率,并降低Cleaved caspase-3的表达水平。结论Gyp通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制HCT116细胞增殖,其机制与Atgl介导的脂代谢有关。

川芎对衰老大鼠脑保护作用及对PI3K/AKT/HIF-1α通路的影响

目的:通过构建衰老合并血瘀大鼠模型,探讨川芎小剂量久服对于延缓衰老脑保护的药效及作用机制,为川芎的临床用药提供依据。方法:将66只SD大鼠分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组,每组11只。除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖(300 mg/kg)连续42 d,同时继续造模并给药14 d,第15天冰水浴20 min,连续14 d,最后1 d注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC),TBA法检测脂质过氧化产物丙二醛(MDA),酶联免疫吸附试验检测蛋白质羰基(PC)含量,酶联免疫吸附试验检测脑组织一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)-1含量。蛋白质印迹法(Western Blotting)测定检测脑组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白、蛋白激酶B(AKT)蛋白、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达量。结果:与空白组比较,模型组体质量下降(P<0.001),血清SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低(P<0.001,P<0.01,P<0.01),MDA、PC含量升高(P<0.001),脑组织NO、TXB2、ET-1含量升高(P<0.001,P<0.05,P<0.001),eNOS含量降低(P<0.01),HIF-1α表达量降低(P<0.05);与模型组比较,川芎2 g及4 g能升高血清GSH-Px含量,增加T-AOC,降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量,升高eNOS(P<0.01),川芎4 g可以增加HIF-1α蛋白表达量(P<0.01)。川芎1 g与人参1 g配伍后进一步升高血清SOD、GSH-Px含量,降低血清MDA、PC含量,降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量(P<0.001,P<0.05,P<0.001),升高eNOS(P<0.001),增加HIF-1α蛋白表达量(P<0.01)。结论:对衰老合并血瘀大鼠模型,川芎小剂量久服即可改善内皮功能,抑制氧化应激,发挥抗氧化作用;川芎剂量减少并与人参配伍后可以起到协同增效作用,可能通过HIF-1α通路对脑起到保护作用。

铁皮枫斗颗粒对气阴两虚证小鼠环核苷酸-内分泌-免疫系统的影响

目的:通过建立气阴两虚证小鼠模型,探讨铁皮枫斗颗粒的益气养阴功效与作用机制。方法:将60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、玉屏风颗粒组、铁皮枫斗颗粒高、中、低剂量组,每组10只,连续给药30 d。实验采用单日限制饮食,双日负重力竭游泳运动,结合灌胃左甲状腺素钠片构建小鼠气阴两虚证模型。动态观察小鼠一般状态,测定小鼠体质量、脏器指数、四肢抓力和力竭游泳时间;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-6(IL-6)、补体成分3(C3)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T)相关指标,采用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)观察下丘脑组织中蛋白激酶A(PKA)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果:与模型组比较,各给药组均可改善小鼠的一般状态,实验第30天,铁皮枫斗颗粒高、中剂量组均可增加小鼠体质量(P<0.01)。铁皮枫斗颗粒高剂量组可以增大小鼠胸腺指数、脾脏指数和四肢抓力,延长负重游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),降低血清cAMP、cAMP/cGMP、T3、E2、E2/T和IL-6水平(P<0.05,P<0.01),升高血清T、C3水平(P<0.01),降低下丘脑组织PKAmRNA表达水平(P<0.01)。铁皮枫斗颗粒中剂量组可以升高血清中TSH水平(P<0.01),低剂量组可以降低下丘脑组织中CREBmRNA的表达水平(P<0.05)。结论:铁皮枫斗颗粒可以改善气阴两虚证小鼠的一般状态,通过调节环核苷酸、内分泌和免疫系统这一网络机制,上调PKA/CREB信号通路,起到益气养阴的功效。

高效液相色谱法测定铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)含量的方法,完善铁皮枫斗颗粒质量标准,有效控制产品质量。方法采用HPLC法,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,色谱柱为Waters XSelect HSS T35μm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,检测波长为203 nm,进行梯度洗脱,并对其进行方法学考察。结果研究建立了铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)的液相色谱条件,3批样品人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)的总含量分别为17.85 mg/g、17.36 mg/g、17.63 mg/g;该方法重复性、稳定性、线性、精密度的相对标准偏差(RSD)值均小于2%,平均加样回收率分别为100.35%、99.59%、101.17%。结论本研究在《中华人民共和国药典》2020年版一部“西洋参”项下的基础上,结合铁皮枫斗颗粒的配方特点,通过色谱柱的筛选,改变流动相洗脱方法,解决了复方产品中色谱峰干扰的问题,建立了铁皮枫斗颗粒中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)含量测定方法,并对其方法进行验证,方法准确可靠,可为完善和提高铁皮枫斗颗粒的质量标准、探讨功效物质基础提供科学依据。

浙江省中药材生产现状及特色道地药材发展趋势

目的:分析2021年浙江省中药材种植面积、产量等数据,对浙江省中药资源种类多样性进行研究,为相关政策规划的制定提供参考依据。方法:采用Microsoft Excel 2010和Origin 2021软件,从全省中药材种植情况、县域中药材种植情况及道地药材等多个角度对2021年度浙江省中药材生产情况进行统计分析。结果:2021年浙江省中药材种植面积为5.74万hm^(2),其中多年生草本类、藤本类和乔木类中药材占比较高;“浙八味”生产总体保持稳定,新“浙八味”在种植面积、产量和产值上分别同比2020年增长3.60%、6.20%、4.11%。此外,黄精种植发展较快。结论:浙江省中药材产业整体呈现良好的发展态势,逐步形成了一批特色、优势道地品种,但部分道地药材种植出现一定萎缩,应综合考虑当地社会经济发展需求与临床用药需求,通过制定政策等形式给予引导和支持。

西红花新品种‘番红2号’的选育研究

目的:选育综合性状优良的西红花新品种。方法:以建德西红花农家种辐射变异种质中优选出的2012B为试验材料,经品系比较、区域试验,对其主要农艺性状、生育期、抗逆性、产量和品质等方面进行综合评价,最终选育出综合性状优良的西红花新品种‘番红2号’。结果:‘番红2号’在2018-2020年浙江省西红花品种区域试验中,平均球茎、鲜花丝产量分别为7 367.93 kg/hm^(2)和28.3 kg/hm^(2),分别比对照增产14.3%和32.1%,均达显著水平;其药材主要有效成分西红花苷Ⅰ、Ⅱ总量为16.12%,苦番红花素含量为9.92%;吸光度0.586,吸光度比值0.898,均符合2020年版中国药典(一部)标准要求。结论:西红花新品种‘番红2号’具有丰产性好、花丝产量高、品质优、抗病性强等特点,于2022年4月通过浙江省农作物品种认定委员会认定。

鲜铁皮石斛佐治小儿顽固性发热53例疗效观察

小儿顽固性发热是临床常见病和疑难病。笔者采用铁皮石斛鲜品佐治小儿顽固性发热53例，疗效明显。

灵芝孢子粉苦味与三萜含量的相关性

对不同来源的灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉原料及产品的苦味进行感官评定和三萜含量测定,分析苦味与三萜含量的关系。结果表明:不同灵芝孢子粉原料及产品中三萜的含量存在差异,大部分孢子粉混悬液无法尝到苦味,当孢子粉混悬液中三萜的质量浓度超过其苦味阈值30μg·mL^-1时,就可以品尝到苦味;灵芝孢子粉的苦味与其所含的三萜含量呈正相关性,三萜含量越高孢子粉的苦味越强,提取浓缩可以提高孢子粉产品中的三萜含量,使其呈现苦味。

基于膜技术的灵芝粗多糖分级分离及抗氧化活性比较

本文主要研究膜分离技术对灵芝粗多糖分级分离效果及其抗氧化活性的影响。以灵芝子实体为原料,通过热水浸提后用100、10和1 kDa超滤膜多级组合对灵芝粗多糖进行分级分离,分别记为GLP100、GLP10和GLP1。比较3种不同孔径膜对灵芝粗多糖的分级效果、理化性质和抗氧化活性的差异。傅里叶红外变换光谱分析结果证明3种多糖样品均具有典型的β-型糖苷键吸收峰,刚果红与圆二色谱分析证明了3种粗多糖是具有螺旋结构的多糖,且GLP100和GLP10是具有三螺旋结构的多糖。SEM结果表明三种多糖颗粒大小明显不同,进一步验证了不同膜是可以对灵芝粗多糖进行分级。还原力、OH自由基、2, 2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS自由基)和1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH自由基)清除结果表明,3种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,但存在些许差异。其中三种多糖还原力十分接近,GLP100的OH和DPPH自由基清除能力好于其他两种多糖, GLP1的ABTS自由基清除能力比其他两种多糖效果更好。实验结果表明,膜分离技术可以有效地对灵芝多糖进行分级。

寿仙谷牌铁皮石斛含片增强免疫力功能的药效学研究

通过小鼠淋巴细胞转化试验、SRBC诱导小鼠DTH实验、抗体生成细胞检测、小鼠血清溶血素的测定、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬CRBC试验、NK细胞活性测定、脏器/体重比值,研究寿仙谷牌铁皮石斛含片对实验小鼠免疫力的影响.结果发现:与阴性对照组比较,中、高剂量组小鼠左后足部24h与0h厚度差值均增加、空斑数增多、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均增加.有此得出结论:寿仙谷牌铁皮石斛含片具有增强实验小鼠免疫力功能.

中药配方颗粒标准化研究现状与思路探讨

中药配方颗粒经过20多年的发展,由于其剂量小、使用方便等特点,市场规模不断扩大。国家食药总局曾下发《中药配方颗粒管理办法(征求意见稿)》,拟从多个角度对中药配方颗粒的发展提出要求,转变管理方式,中药配方颗粒产业发展将进入新的阶段。标准的建立是中药配方颗粒产业进一步发展的的必要前提,而当前中药配方颗粒生产试点多年仍未能形成统一的标准,标准化成为当前中药配方颗粒产业进一步发展的首要任务。本文结合中药配方颗粒产业发展现状与征求意见稿的相关要求,对进一步开展中药配方颗粒标准化研究的思路进行探讨,为中药配方颗粒相关标准研制提供参考。

UPLC-MS/MS测定铁皮石斛中9个有机酸成分含量

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定铁皮石斛中9个有机酸类成分的含量。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以0.1%甲酸溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;流速0.6 mL/min;柱温40℃。采用电喷雾离子源,负离子检测方式,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量。结果:9个有机酸类成分具有良好的线性关系,r值均大于0.998,方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3%,加样回收率在95.61%~102.66%,RSD值均小于3.5%。不同产地铁皮石斛中有机酸类成分在组成和含量上存在较大差异。结论:该研究建立的方法操作简便、准确、重复性好,可用于铁皮石斛药材中有机酸类成分的定量测定,测定结果可为该药材质量标准的完善提供依据。

酶法联合超声技术制备灵芝寡糖及其对乳酸杆菌的增殖作用

为探究酶解联合超声法制备灵芝寡糖的最佳工艺及灵芝寡糖对乳酸杆菌的增殖作用。以灵芝水提物为原料,优化了酶解和超声条件,对比了原料液和酶解联合超声处理后经3000 Da超滤膜处理所得寡糖得率和结构的差异,分析了其对乳酸杆菌的体外增殖作用。结果表明,酶解条件为酶解时间9 h、温度50℃、pH5、酶用量1000 U/g底物、超声时间60 min、超声功率480 W时,灵芝寡糖得率最高,为1.76%,比原料液中提高了61.46%。经傅里叶红外光谱分析,灵芝寡糖样品具有典型的β-型糖苷键特征和吡喃环化合物的特征。乳酸杆菌增殖实验表明灵芝寡糖对乳酸杆菌具有良好的增殖效果,且其增殖效果优于灵芝多糖。实验为灵芝寡糖的制备及其应用于功能性食品的开发提供了依据。

铁皮石斛酶解多糖对姜黄素乳液功能性质的影响

通过酶解法获得低分子质量铁皮石斛多糖,并通过添加该多糖,用于改善乳清蛋白稳定的姜黄素乳液的功能性质。以铁皮石斛酶解多糖/乳清蛋白作为乳化系统制备荷载姜黄素的乳液,评估乳液的物理稳定性和乳液对姜黄素的保护作用;探讨荷载姜黄素的乳液抑制癌细胞的效果及乳液中的姜黄素在模拟胃肠道环境中的释放情况。结果表明,酶解降低了多糖的黏性,增强了多糖的弹性;酶解后的多糖界面压力在1800 s后可增加至11.43 mN/m,能够显著改善其乳化活性;铁皮石斛酶解多糖比酶解前稳定乳液的能力更强;含有铁皮石斛酶解多糖的乳液在紫外照射4 h后,姜黄素含量仅下降了18.4%,氧化实验17 h后,姜黄素保留率为76.9%;乳液处理72 h后,Caco-2细胞活力为27.4%,显著低于只采用乳清蛋白稳定的姜黄素乳液处理的细胞组;体外模拟消化实验表明,乳液包封使得姜黄素仅在胃部少量释放,而在进入肠道后释放率达到63%,表明铁皮石斛酶解多糖的加入不会影响姜黄素在肠道中的吸收利用,而且可以保护姜黄素免受胃部的消化影响。因此,铁皮石斛酶解多糖可提高乳清蛋白稳定的荷载姜黄素的乳液的稳定性及抗癌活性,该乳液体系具有输送疏水性药物的应用价值。

不同药物诱导小鼠胸腺萎缩模型的对比研究

目的:对比研究地塞米松、氢化可的松、聚肌胞苷酸以及苯甲酸雌二醇分别诱导的小鼠胸腺萎缩模型。方法:将55只雌性ICR小鼠分为5组,除对照组外分别给予地塞米松磷酸钠、氢化可的松、聚肌胞苷酸与苯甲酸雌二醇建立模型。观察其胸腺指数、脾脏指数、血细胞变化、血浆中MDA与GST水平、胸腺病理学检测、胸腺细胞凋亡以及相关蛋白的表达情况。结果:各模型组小鼠胸腺指数较对照组均显著降低(P<0.01)。血细胞分析结果中聚肌胞苷酸组白细胞计数低于对照组(P<0.01),雌二醇组高于对照组(P<0.05);雌二醇组淋巴细胞百分率较对照组降低(P<0.01)。地塞米松组、氢化可的松组血浆中MDA含量较对照组显著性降低,雌二醇组较对照组显著性升高(P<0.01)。胸腺HE病理学染色结果表明地塞米松与氢化可的松诱导的胸腺皮质细胞大量坏死,组织萎缩严重,而聚肌胞苷酸与苯甲酸雌二醇所诱导的模型则较轻。胸腺TUNEL检测结果发现对照组小鼠胸腺仅存在极少数细胞出现凋亡,其余组别胸腺皮质均出现大量的细胞凋亡,其中雌二醇组皮质髓质均出现较为明显的凋亡。蛋白电泳结果中地塞米松组与氢化可的松组小鼠胸腺中所测凋亡及炎症蛋白的表达量均显著低于对照组;聚肌胞苷酸组caspase-3、NF-κB激活水平与对照组无显著性差异,但其caspase-3、NF-κB蛋白的表达总量均高于对照组(P<0.05);雌二醇组NF-κB蛋白磷酸化水平以及TNF-α蛋白的表达低于对照组(P<0.05),而IL-6的表达量高于对照组(P<0.05)。结论:4种药物均能够成功诱导胸腺的萎缩,但胸腺萎缩程度存在较大差异,故药效评价时应注意模型的选择。

基于对衰老大鼠心脏抗氧化保护作用及Keap1-Nrf2-HO-1通路探讨川芎临床“久服”用药策略

目的通过构建衰老合并血瘀大鼠模型,基于抗氧化通路探讨川芎小剂量下久服对于延缓衰老的药效及作用机制,从而探讨川芎的临床用药策略。方法SD大鼠66只,分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组;除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖(300 mg/kg)连续42天,同时继续造模并给药14天,第15天冰水浴20分钟,连续14天,最后一天注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清及心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶活性(glutathione peroxidase,GSH-PX)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),TBA法脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA),ELISA检测蛋白质羰基化合物(protein carbonyl,PC)含量,检测心脏组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量。蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定检测心脏组织核因子E2相关因子2(nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)蛋白、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白、Kelch样ECH相关蛋白1(recombinant kelch like ECH associated protein 1,Keap1)表达量。结果与空白组相比,模型组体质量下降(P<0.05),血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低(P<0.01),MDA、PC含量升高(P<0.01),心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量降低(P<0.01),Nrf2、HO-1表达量降低(P<0.05);与模型组相比,维生素E组能升高大鼠体质量、血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量,降低MDA、PC含量,升高心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶(P<0.05);川芎2 g、4 g升高血清GSH-PX、T-AOC含量,且川芎4 g提高心脏GSH-PX,降低血清及心脏MDA含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.05),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。川芎配伍人参配伍后进一步升高血清及心脏SOD、GSH-PX含量,降低血清MDA、PC含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.01),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。结论对衰老合并血瘀大鼠模型,川芎小剂量久服即可发挥抗氧化作用;川芎与人参合用后川芎剂量减少可以起到协同增效作用,可通过Keap1-Nrf2-HO-1抗氧化通路对心脏起到保护作用。

石斛多糖改善糖尿病作用的影响因素及机制研究进展

石斛属植物是目前广泛应用的补品和珍贵食品,它含有多糖、生物碱、氨基酸和微量元素等多种活性成分。近年来,随着代谢相关疾病的高发,石斛在防治糖尿病中的作用逐渐被挖掘。现代药理学研究证实,石斛多糖作为石斛中的主要活性成分,具有显著的降血糖效果,同时可以改善糖尿病的并发症,有被开发为保健食品、药品的潜力。针对此现状,该文阐述了石斛多糖在糖尿病中的药理作用(降血糖、防治糖尿病并发症),总结了影响石斛多糖药理活性的因素,并归纳了其主要作用机制的研究进展,为石斛多糖在防治糖尿病方面的研究及应用提供参考。

灵芝新品种‘仙芝3号’的选育

通过种质资源收集,结合全基因组测序辅助分析,并进行分离初筛、小区品比、两年三地区域实验和示范推广,选育出灵芝新品种‘仙芝3号’。与对照(‘仙芝1号’和‘仙芝2号’)相比,‘仙芝3号’菌丝束粗,菌丝密度小于‘仙芝1号’、大于‘仙芝2号’,在不同温度(10、20、30℃)条件下的生长速度显著降低(P<0.05);三者之间存在明显的拮抗现象;菌盖厚度显著增加,菌盖横径显著变小,菌柄长度显著变短(P<0.05);区域实验时,现蕾早5、6 d,成熟孢子弹射早12、14 d;污染率显著降低(P<0.05);子实体多糖、三萜及甾醇含量(以齐墩果酸计)分别提高7.64%、5.71%和15.76%、11.53%,孢子粉多糖和甘油三油酸酯分别提高25.79%、24.80%和35.68%、36.07%,差异均显著(P<0.05);示范推广时,子实体、孢子粉的产量及有效成分含量稳定。结果表明,‘仙芝3号’是一个综合性状较为优良的灵芝新品种。

基于UPLC-QTOF-MS和多元统计分析的赤芝道地性研究

目的:研究不同产地、不同栽培方式对赤芝中三萜类成分的影响,为赤芝的道地性研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS)对120批赤芝样品进行化学成分分析。将赤芝样品按照浙产/非浙产、浙产段木/非浙产段木、浙产段木/浙产野生、不同发育时期进行模式分类,应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对赤芝样品进行多元统计分析,用变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果:从供试样品中鉴定出13种响应高、分离度好的灵芝酸类成分。筛选发现,浙产赤芝中灵芝酸D、灵芝烯酸D显著高于非浙产赤芝,可作为浙产赤芝的标志性成分;浙产段木赤芝中灵芝酸D、灵芝酸B、灵芝酸C1、灵芝酸G的含量显著高于非浙产段木赤芝;段木赤芝中灵芝酸A等6个成分均显著高于野生赤芝;随着赤芝子实体逐渐成熟(现蕾期→开伞期→成熟期→采摘期),多数灵芝酸含量呈现下降趋势,但部分样品采摘期(喷孢后)灵芝酸含量较成熟期(喷孢前)高,值得进一步研究。结论:浙产与非浙产赤芝成分差异较明显,且浙产段木赤芝与非浙产段木赤芝成分也存在明显差异,可能与生态环境、种植方式有关。

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的杭白菊道地性研究

目的:鉴定不同产区胎菊、朵菊的主要差异化学成分,为杭白菊的道地性研究提供依据。方法:收集不同产区的杭白菊胎菊和朵菊样品,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行化学成分分析,综合运用数据非依赖扫描(DIA)与数据依赖扫描(DDA),结合本地及在线数据库,鉴定主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,对胎菊与朵菊、不同产区胎菊与朵菊、道地产区(桐乡)与非道地产区胎菊与朵菊进行模式分类,以分析过程中变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出主要的差异化合物。结果:从供试样品中共鉴定出33个化合物。胎菊与朵菊化学轮廓差异明显,D-甘露糖、羟基芫花素、槲皮素等为主要的差异化合物;不同产区胎菊化学轮廓差异较明显,其中桐乡胎菊中鸟苷、姜糖酯B等成分含量显著高于其他产区,可作为鉴定道地产区的标志性成分;不同产区朵菊的差异相对较小,但浙江和其他省份(江苏、河南)产朵菊有一定差别,红车轴草素-7-O-β-D-葡萄糖苷为主要的差异化合物。结论:不同产区胎菊的差异较大,而朵菊的差异较小,可能的原因为杭白菊成熟后,化学成分的含量趋于稳定。