精浆肉碱测定在男性生育力评估和弱精子症疗效监测中的应用

目的比较正常男性与弱精子症男性精浆中肉碱含量,评估精浆肉碱水平与前向运动精子百分率(PR)之间的一致性,并外源性补充肉碱对弱精子症患者的影响。方法收集511例正常可育男性及弱精子症患者精液样本,采用精浆肉碱检测试剂盒(固定时间法)测定精浆肉碱,比较两组水平差异及与PR的一致性。另选77例弱精子症患者给予左卡尼汀(1 g/次,3次/日,30日/疗程)治疗,监测服药前后精浆肉碱及PR变化。结果弱精子症患者组精浆肉碱含量[(194.34±65.41)μmol/L]显著低于正常可育男性组[(405.43±72.12)μmol/L](P<0.01);以精浆肉碱≥325μmol/L为阈值,Kappa值为0.81,诊断符合率达93.74%;给予左卡尼汀治疗后,弱精子症组精浆肉碱浓度[(356.03±84.87)μmol/L]较之前[(183.61±79.54)μmol/L]明显上升,PR[(32.69±8.35)%]较之前[(16.56±7.74)%]显著升高(P均<0.01)。结论精浆肉碱检测试剂盒能准确高效检测大量临床样本,可用于弱精子症诊断及疗效评估。外源性补充肉碱可提高弱精子症患者精浆肉碱水平和精子活力,有助于改善其生育能力。

巨细胞病毒糖蛋白在骨髓移植术后抗原血症中的临床意义

目的比较人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)糖蛋白B(glycoprotein B,gB)、IE和pp65抗原检测,探讨HCMVgB检测的应用价值。方法检测92份异基因造血干细胞移植术后白细胞样本中的HCMV gB、即刻早期(immediate-early,IE)和磷蛋白65(phosphoprotein 65,pp65)抗原,并按移植术后时间进行分组,分析gB抗原检测在监测HCMV感染中的意义。结果 HCMV gB抗原与pp65和IE抗原检测均呈正相关,其阳性率(82.6%)和pp65抗原阳性率(90.2%)差异无显著意义(P=0.065),但比IE抗原阳性率(92.4%)低(P=0.035)。三种抗原检测阳性率在移植术后1年内无显著差异;而在移植术后时间长于1年的标本中,gB阳性率低于IE和pp65阳性率(P=0.005),并且在gB阴性而IE或pp65阳性的标本中,IE或pp65阳性值处于一个较低的范围(1～6/5×10~4WBC)。结论 HCMV gB对移植术后早期诊断感染有潜在的价值,并可能是一个提示病毒感染能力的指标;在对长期随访病人HCMV感染的监测中,gB可能是较pp65和IE更合适的指标。

HCMV感染对多种机会性病毒感染的影响

目的探究肾移植前人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对移植后多种机会性病毒(HCMV、多瘤BK病毒(BK virus,BKV)、多瘤JC病毒(JC virus,JCV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV))机会性感染的影响。方法采用免疫组化方法检测肾移植病人移植前后外周血HCMV被膜抗原pp65,巢式PCR方法检测病人尿液标本中的BKV DNA、JCV DNA;ELISA方法检测病人血液标本中的HBV抗原、抗体和HCV丙肝抗体(Anti-HCV);根据移植前有无感染HCMV将病人分为HCMV感染组和非感染组。结果 HCMV感染组与非感染组移植后HCMV、JCV、BKV、HBV、HCV感染率分别为20%与2.8%(P=0.049)、50%与19.4%(P=0.017)、0%与8.3%(P=0.545)、0%与13.9%(P=0.144)、0%与3.0%(P=1.000)。结论肾移植前HCMV感染不仅可引起移植后HCMV再激活感染,还可转化激活JCV的复制和感染。

肾移植术后多瘤JC病毒感染

目的探究肾移植受者术后多瘤JC病毒(JCvirus,JCV)的感染情况及其感染的危险因素。方法采用巢式PCR方法检测32例肾移植病人术后尿液标本中的JCV-DNA,并以15例健康体检者为对照;免疫组化法检测肾移植病人外周血巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)被膜抗原pp65;以病人的年龄、性别、免疫抑制方案、CMV感染作为影响JCV感染的危险因素。结果 JCV在肾移植病人中的感染率为43.8%,健康体检者为0.0%。与非感染者相比,感染者的年龄更大,使用MMF+强的松+环孢素的三联免疫抑制剂的感染比例更高,差异具有统计学意义(t=2.106,P=0.044;χ2=5.723,P=0.017)。结论 JCV在肾移植者中的感染率高,年龄和使用强的松+MMF+环孢素三联免疫抑制方案是影响JCV感染的危险因素。

基于人工智能的荧光法与传统流式法精子DFI检测的对比研究

目的:探究基于人工智能(AI)识读技术的荧光法精子DNA碎片指数(DFI)检测在检测结果上与传统流式细胞法精子DFI检测的差异性以及AI荧光法DFI在检测方法上的可靠性。方法:338例门诊患者,对每例患者的精液样本分别采用流式法和AI荧光法进行DFI检测,分析两种方法检测结果的相关性及检测阳性率是否存在统计学显著差异;另外对每例患者的精液样本分别进行两次独立重复的AI荧光法DFI检测实验,观察AI荧光法DFI检测的稳定性。结果:流式法DFI与AI荧光法DFI两种检测的结果相关性较好(R;=0.7131),阳性率无统计学显著差异(P=0.10);对于极端精液样本(包括低浓度精液样本、黏稠精液样本),流式法DFI与AI荧光法DFI检测结果的相关性较差(R;=0.206 5)。AI荧光法DFI检测具有良好的技术稳定性(R;=0.967 1)。结论:AI荧光法DFI检测技术稳定性良好,检测结果与传统流式法DFI无显著差异,能够满足临床工作对于DFI检测的要求,具有较好的临床应用前景。

人巨细胞病毒gB糖蛋白研究进展

人巨细胞病毒（HCMV）的包膜gB糖蛋白在病毒穿入宿主细胞、细胞间传播,以及诱导宿主的免疫应答中起着重要作用.此文就gB的结构、基因分型、生物学特性、单克隆抗体及HCMV疫苗情况进行了综述.

人巨细胞病毒感染对多种病毒感染的影响

人巨细胞病毒（ human cytomegalovirus,HCMV）属β疱疹病毒亚科,人群对其普遍易感,成人HCMV感染率可达30％～100％[1].在机体免疫功能正常时,HCMV常呈隐性或潜伏感染,而在免疫功能低下或缺陷时（如移植受者、艾滋病患者等）常呈显性感染.HCMV感染后不仅可通过直接的致细胞病变作用,引起HCMV症状和侵入性疾病（如HCMV肺炎、肝炎、胃肠炎、脑炎等）,还可通过间接的宿主依赖的免疫病理作用,引起移植排斥、移植物损伤,诱发机会性感染等[2].HCMV感染可诱导激活其他人疱疹病毒（ human herpesviruses,HHV）的活动性感染,如HHV-6、HHV-7、EB病毒（EBV）等[2],而有关其对多瘤病毒[多瘤BK病毒（BK virus,BKV）、多瘤JC病毒（JC virus,JCV）、乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）、丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV）]机会性感染的影响研究甚少.因此,本研究通过比较肾移植患者HCMV感染组和非感染组移植术后HCMV、BKV、JCV、HBV、HCV感染率的差别,来初步探究HCMV感染对上述病毒机会性感染的影响.

JC病毒在肾移植受者中的感染状况

目的 探究多瘤JC病毒（JC virus,JCV）在肾移植受者中的感染情况及其感染对移植肾功能的影响,并初步探索JCV感染的影响因素.方法 采用巢式PCR方法检测49例肾移植病人术后尿液标本中的JCV DNA,并以24例健康体检者为对照;定性PCR方法检测病人尿液标本中的巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV）DNA;Binary Logistic回归方法分析JCV感染的可能影响因素：病人的年龄、性别、免疫抑制方案、CMV感染;以肾小球滤过率（glomerular filtration rate,GFR）作为肾功能的指标,t检验方法比较JCV感染和非感染者GFR有无差别.结果 JCV在肾移植病人中的感染率为42.9%,健康体检者为4.2%.移植后CMV感染和强的松＋MMF＋环孢素三联免疫抑制方案是JCV感染的危险因素（OR=10.101,P=0.049;OR=6.286,P=0.008）.JCV感染者和非感染者的GFR分别为86.470±29.990和84.060±33.729,两者间的差异无统计学意义（t=0.259,P=0.797）.结论 JCV在肾移植病人中有很高的感染率,CMV感染和使用强的松＋MMF＋环孢素三联免疫抑制方案可明显增加JCV感染的危险性;JCV感染对移植肾功能无影响.

HLA高分辨等位基因与骨髓移植受者HCMV抗原血症研究

目的 分析HLA高分辨等位基因与骨髓移植术后HCMVpp65抗原血症的相关性.方法 选取2009年2月至2010年10月在我院行骨髓移植术患者48例；采用免疫组化方法检测患者HCMVpp65,采用直接测序分型方法（PCR-SBT）检测患者HLA-A＊1101、HLA-A＊0201、HLA-A＊2402、HLA-B＊4001、HLA-DRB1＊0901五个高分辨等位基因.结果 ①48例骨髓移植术后患者HCMV感染率100％；②HLA-A＊1101、HLA-A＊0201、HLA-A＊2402、HLA-B＊ 4001等位基因阳性率在pp65抗原血症12例低感染组和36例高感染组中比较没有统计学意义（P＞0.05）,其阳性率HLA-A＊1101为33.3％ （8/24）和20.8％ （15/72）、HLA-A＊0201为4.2％ （1/24）和13.9％ （10/72）、HLA-A＊ 2402为12.5％ （3/24）和19.4％ （14/72）、HLA-B＊ 4001 16.7％ （4/24）和12.5％ （9/72）;③HLA-DRB1＊0901等位基因阳性率在pp65抗原血症12例低感染组和36例高感染组中比较有统计学意义（P =0.048）,其阳性率为4.2％ （1/24）和19.4％ （14/72）；④HLA-DRB1＊0901组患者pp65抗原血症高于HLA-A＊2402组（P =0.007）和HLA-A＊1101组患者（P=0.028）,HLA-A＊0201组患者pp65抗原血症高于HLA-A＊2402组患者（P=0.02）,其他高分辨等位基因组之间pp65抗原血症差异没有统计学意义（P＞0.05）.结论 HLA-DRB1＊0901等位基因可能与骨髓移植术后患者发生高HCMVpp65抗原血症有关；HLA-A＊2402等位基因可能与骨髓移植术后患者发生低HCMVpp65抗原血症有关.